方法验证：直接说实例,别扯没用的!

方法验证：直接说实例，别扯没用的！ 方法验证实例：色谱法方法验证 研究内容 方法摸索优化 目标优化梯度条件，确定分析波长。 1、 样品溶剂选择； 2、 滤膜吸附试验； 3、 DAD检测器下，波长选择主成分最大吸收或平台处。 4、 分离条件选择； 1、 一般在无参考标准或标准的方法无法直接套用时,需进行此项研究内容，如3类药。 2、样品溶剂：对样品有很好的溶解能力，实验室自然放置稳定存放12小时以上，与流动相有良好的互溶效果。 3、续滤液峰面积达稳定最大值，续滤液体积在5ml以下时较为适宜，否则需要重新筛选溶剂。 4、破坏程度10%左右（5%—15%）为宜，2mol/l酸或碱90℃水浴12小时无破坏即视为样品稳定，不必再追求降解度。4500lx光照48小时，样品粉末及溶液需要同时做。破坏操作过程 技术要点说明 1 / 11

5、 色谱柱对比；（根据情况酌定） 6、DAD检测器下，水、1mol/l后的样品溶液及空白溶剂均需调整至流动相pH方可进样，可避免对色谱柱产生不良影响。如果破坏超过20%，需要降低破坏条件。 5、分离度良好，测定无干扰，各峰酸、碱、氧（10%峰纯度符合单峰要求。 双氧水）、光照、高温破坏，各起始物料，中间体，辅料（制7、方法摸索优化实验一般是不上资剂研究时需同时料的，只是体现在实验记录本中，进行空白辅料破除非是没有方法依据时，如3类药坏）等成分分申报时，梯度选择及波长选择等均离。 需要在资料中体现。 8、方法优化完成后，最后在同一天同一人，用同一台机器，对所有样品进行分析测定，具有可比性。 9、方法摸索优化实验采用工艺已经确定的实验室小试、实验室放大样品进行，前期用于原料合成样品配6、梯度变化要有最高洗脱能力过程，目的证明所有的杂质成分均能够被洗脱检测。 2 / 11

合检测时，可以采用大范围的梯度洗脱进行模糊检测分析。 专属性 目的为了验证方法对目标成分检测的区分能力及全面的杂质分析评价。 3、梯度要有最高洗脱能力过程。 DAD检测器或适4、以前期确定的分析条件及方法，宜的通用型检测在同一天同一人，用同一台机器，器下，水、对所有样品进行分析测定，具有可1mol/l酸、碱、比性。 氧（10%双氧水）、光照、高温破坏，各起始物料，中间体，辅料，各杂质对照品等在同一天进行分析，可以作为申报资料中杂质谱的论述内容。 5、本部分数据进资料，最佳采用生产线验证的第1批样品进行。 当色谱条件与有关物质检查方法相同时，专属性实验数据可以共用。 出图时主成分峰的紫外光谱图及峰纯度图均要出图。 1、参照上述过程进行破坏样品制备，空白及阴性样品都要做。 2、分离度良好，测定无干扰，各峰峰纯度符合单峰要求。 3 / 11