课题 3 血红蛋白的提取和分离
题型一 血红蛋白的提取与分离的原理
1.利用凝胶色谱法分离蛋白质的原理是 ( ) A.蛋白质分子与凝胶的亲和力的大小 B.蛋白质相对分子质量的大小 C.蛋白质所带电荷的多少 D.蛋白质溶解度的大小
答案 B
解析 凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小来分离蛋白质的有效方法, 相 对分子质量小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道, 路程长, 移动的速度慢, 相对 分子质量大的蛋白质不容易进入凝胶内部的通道, 路程短, 移动的速度快, 因此 相对分子质量不同的蛋白质得以分离。
2.凝胶色谱分离法分离蛋白质时,凝胶的种类较多,但其作用的共同点是 () A.改变蛋白质分子通过凝胶时的路径
B.吸附一部分蛋白质,从而影响蛋白质分子的移动速度 C.将酶或细胞固定在凝胶中
D.与蛋白质分子进行化学反应,从而影响其移动速度
答案 A
解析 凝胶的种类较多, 但每一种凝胶内部都有孔隙。 相对分子质量不同的 蛋白质通过凝胶时, 相对分子质量较小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道, 路程 较长,移动速度较慢; 相对分子质量较大的蛋白质只能在凝胶外部移动, 路程较 短,移动速度较快,相对分子质量不同的蛋白质分子因此得以分离, A 正确。
3.如图能正确表示相对分子质量不同的蛋白质在凝胶中的行进过程的是 ()
答案 B
解析 相对分子质量小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道, 路程长,移动的 速度慢;相对分子质量大的蛋白质不容易进入凝胶内部的通道, 路程短, 移动的 速度快, B 正确。
4.下列有关电泳的叙述,不正确的是 ( )
A.电泳是指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程 B.待测样品中各种分子的形
状、大小及带电性质的差异等会影响其在电泳 中的迁移速度
C.进行电泳时,带电粒子会向着与其所带电荷相同的电极移动 D.常用的电泳方法是琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳
答案 C
解析 电泳是指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程,在电场的作用 下,带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动, A 正确,C 错误;由于待分 离样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身的大小、 形状的不同, 会使带电 分子产生不同的迁移速度,从而实现样品中各种分子的分离, B 正确;琼脂糖凝 胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳是两种常见的电泳方法, D 正确。
5.SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法中加入的 SDS的作用是 ( ) A.增大蛋白质的相对分子质量 B.将蛋白质分解成单个氨基酸 C.掩盖不同蛋白质分子间的电荷差别 D.增加不同蛋白质分子间的电荷差别
答案 C
解析 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法中加入 SDS 的目的是使蛋白质完全变 性,解聚成单条肽链;同时 SDS 所带负电荷的量大大超过了蛋白质分子原有的 电荷量,因而掩盖了不同蛋白质间的电荷差别, C 正确。
6.下列有关透析的叙述,错误的是 ( ) A.用于透析的薄膜要具有选择透过性 B.透析膜一般是用硝酸纤维素制成的
C.透析袋能使小分子自由进出,而将大分子保留在袋内 D.透析可用于更换样品的缓冲液
答案 A
解析 透析袋一般是用硝酸纤维素 (又称玻璃纸 )制成的,它没有生物活性, 故不具有选择透过性 (活的生物膜才具有选择透过性 ),B 正确, A 错误;透析袋 能使小分子自由进出,而将大分子保留在袋内, C 正确;透析可以去除样品中相 对分子质量较小的杂质,或用于更换样品的缓冲液, D 正确。
题型二 血红蛋白的提取与分离的实验过程
7.下列关于血红蛋白提取和分离实验的描述,正确的是 ( )
A.红细胞的洗涤:加入蒸馏水,缓慢搅拌,低速短时间离心 B.血红蛋白的释放:
加入生理盐水和甲苯,置于磁力搅拌器上充分搅拌
C.分离血红蛋白:将搅拌好的混合液离心、过滤后,用分液漏斗分离
D.透析:将血红蛋白溶液装入透析袋,然后置于 pH 为 4.0 的磷酸缓冲液 中透析 12 h
答案 C
解析 红细胞洗涤过程中应该用生理盐水,不能用蒸馏水, A 错误;血红蛋 白的释放应该加入蒸馏水和甲苯,使红细胞吸水涨破,释放其中的血红蛋白, B 错误;将搅拌好的混合液通过离心、过滤后,用分液漏斗分离出血红蛋白溶液, C 正确;透析所用的磷酸缓冲液的 pH 为 7.0, D 错误。
8.在血红蛋白的整个提取过程中,不断用磷酸缓冲液处理的目的是 A.磷酸缓冲液会加速血红蛋白的提取过程 B.血红蛋白是一种两性物质,需要酸进行中和 C.防止血红蛋白被氧气氧化
D.让血红蛋白处在稳定的 pH 范围内,以维持其结构和功能
答案 D
( )
解析 在一定范围内,缓冲溶液能够抵制外界的酸和碱对溶液 pH 的影响, 维持 pH 基本不变,防止血红蛋白的结构发生改变, 从而有利于血红蛋白的分离。
9.凝胶色谱柱制作的程序一般是 ( )
① 橡皮塞打孔 ②挖凹穴 ③装玻璃管 ④盖尼龙网
⑤盖尼龙纱 ⑥将橡皮塞插入玻璃管 ⑦接尼龙管、装螺旋夹 ⑧柱顶插入 安装了玻璃管的橡皮塞
A.①→③→④→⑤→⑥→⑧→⑦→② B.①→②→③→④→⑤→⑥→⑦→⑧