小鼠胚胎中脑神经干细胞分离、培养及分化

小鼠胚胎中脑神经干细胞分离、培养及分化

刘 兵，刘洪涛 (长江大学 医学院，湖北 荆州 434000)

【摘 要】[摘要]目的：探讨小鼠胚胎中脑分离神经干细胞的体外培养方法，以获取高纯度的神经干细胞，为神经干细胞的深入研究提供试验材料。方法：无菌条件下分离孕12～13 d小鼠胚胎中脑曲，制成单细胞悬液，碱性成纤维生长因子(bFGF)和B27存在的培养基中培养扩增，通过免疫细胞化学染色鉴定神经干细胞及子代细胞的分化方向，流式细胞术检测TH阳性神经元比例。结果：培养的部分细胞体外分裂增殖，同时表达神经干细胞特异性抗原nestin， 并向神经细胞和胶质细胞分化并经流式细胞仪检测自然分化为多巴胺能神经元的比例为3.25%。结论：小鼠胚脑中脑存在具有多分化潜能的神经干细胞，它们能在体外稳定培养、传代和分化。 【期刊名称】长江大学学报：医学卷 【年(卷),期】2006(000)012 【总页数】4

【关键词】[关键词]神经干细胞； 培养；分化；中脑

神经干细胞(neural stem cells, NSCs)是一类广泛存在于胚胎及成体中枢神经系统的早期未分化细胞，被认为是神经系统的“发源地”[1]。应用神经干细胞移植的方法修复神经系统脑的损伤与治疗人类神经退行性疾病中更显示出其优越性,其中最具有代表性的就是怕金森病，然而，这种方法在患者中广泛应用的障碍就是胚脑移植的问题。本试验对小鼠胚胎中脑神经干细胞的分离和培养进行了尝试，为神经干细胞的进一步研究奠定基础。

1 材料与方法