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§探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化
一. 材料用具:酵母菌贮用培养液、无菌葡萄糖溶液、血细胞计数板、盖玻片、移液管、
滴管、有螺旋盖的试管、试管架、记号笔、直尺、坐标纸、比浊计(比色计)、显微镜。 二. 材料简介:
1. 选用酵母菌的原因:1.酵母菌是单细胞真核生物;
2.生长周期短,繁殖速度快,世代间不重叠。 2.血球计数板:
具体操作方式:用滴管从试管中取1滴培养液到血球计数板的方格区,盖上盖玻片,
让培养液自行渗入。(多余的培养液用滤纸吸去)
★计数板:
五点取样法 1个大方格=16个中方格
=400个小方格(16×25)
3.比浊计(比色计):测定溶解度。
三.实验步骤 Ⅰ
. 配置样品并分组(配置2个样品):用记号笔标记有螺旋盖的试管A、B;
A组(10mL无菌葡萄糖溶液+0.1mL酵母菌贮用培养液)
B组(10mL无菌葡萄糖溶液)
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注:酵母菌可以用液体培养基培养。
Ⅱ. 细胞计数(抽样检验方法)
1.拧紧试管盖将试管A轻轻震荡几次(目的:使酵母菌分布均匀,减少误差)。
2. 用滴管从试管中取1滴培养液到血球计数板的方格区,盖上盖玻片,让培养液自行
渗入。静待片刻,待酵母菌细胞全部沉降到计数室底部,将计数板放在显微镜的载物台上,计数一个小方格内的酵母菌数量。 3.试管B重复该步骤; 4.样品2重复2、3。 ★计数注意事项:
细胞总数计算方法: 每方格内细胞数(细胞数÷方格数)×2500×10
2500:每方格体积=2mm×2mm×0.1mm=0.4mm2 1mL=1cm2=1000mm2
1000÷0.4=2500个(每毫升方格数) 10:一试管大约为10mL。
盖 1.计数顺序:左上 右上 右下 左下;
2.压在方格线上的细胞,只计左线和上线上的细胞数; 3.细胞间若有粘连(死亡),则数出团块中的每一个细胞;
4.出芽酵母的芽体体积若超过细胞体积的1/2,则算独立个体。
芽体
出芽生殖——无性生殖
5.用比浊计测定各试管的浑浊程度(探究酵母菌数量变化与其浑浊度之间的关系) 6.记录数据,求平均值 时间 ;.
1 2 3 4 5 6 7 ..
组别 样品1 样品2 平均
Ⅲ.培养
1.第2天,重复1-5,在坐标纸上标记当天样品的浑浊度读数与酵母数。用直尺连接两
个标记点,依据此线的延长线估算此后两天的酵母数量。 2.第4和第7天进行计数,每天用比浊计测定混合度并记录。(也可每天计数) ★注:1.每天计数酵母菌的时间要固定;
2.若方格内细胞数目多于300个或数不过来,则稀释(详见书P73)
Ⅳ.整理数据,绘制种群数量变化曲线 105~109
图一.酵母菌数量变化及其浑浊度的关系(横坐标:浑浊度(0~100);纵坐标:细胞数)
图二.酵母菌种群数量随时间变化曲线(横坐标:时间/天;纵坐标:细胞数)
★图表分析:1.A曲线:趋于平稳——营养成分减少,种内斗争加剧;
下降:细胞代谢毒素增加,使细胞死亡(死亡率>出生率)
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