屮大历届试题+答案生化-遗传篇 简答30分 复制和转录的异同点
相同点：酶促核背酸聚合过程；DNA为模板；依赖DNA的酶；方向聚合；磷酸二酯键; 碱某互配 不同 复制 转录
整个基因组
模板 两股链
原料 4种dNTP
基因组中一部分基因 单链
4 种 NTP
配对 A=T、C三G A=T、C三G、A=U 酶 DNA-pol校读功能 RNA-pol无校读功能 引物 需要 不需要
产物 子代DNA 各种RNA,转录初始产物是三种RNA前体 特点 半保留复制 不对称转录 加工修饰 无 有；转录初始产物T成熟RNA
将染色体的目的基因克降到载体（如质粒）进行表达，主要过程
1、 目的基因的获取：化学合成、基因组DNA文库、CDNA文库、PCR
2、 克隆载体的选择与构建：为携带和表达目的外源DNA而釆用的一些DNA分子称克隆载 体，
其中插入外源DNA可转录翻译成多肽链的称表达载体。常用的载体包括：质粒DNA、 噬菌体
DNA、病毒DNA
*3＞外源基因与载体的连接：粘性末端连接、平端连接、同聚物加尾连接、人工接头连接 4、 重组DNA导入受体菌：转化、转染、感染
问答22分
列举三种特殊DNA序列并说明生物学功能
端粒：真核生物染色体DNA分子末端特殊结构，短GC丰富的序列以及蛋白质组成。 作用：1）维持染色体的稳定性；2）维持DNA复制的完整性。 四膜 1U TTGGGG/AACCCC 脊椎动物 TTAGGG/AATCCC
-35区TTGACA序列是RNA-pol中o亚基识别并结合的位点；
?10区有TATAAT序列-Prinbow盒，因富含AT而DNA双链易分离，利RNA-pol发挥作用，为
RNA-pol与DNA模板结合的部位。
Hogness盒：真核生物转录起始上游保守序列5'TATA序列 2003级五年制生化期末考试大题
名词解释（3分/题）：
1、 HGP
2、 质粒细菌屮，独立于染色体外的双链闭环DNA分子，用于克隆几千bp外源DNA片段。 基
因工程常用载体-能将外源冃的DNA导入受体细胞，并能自我复制增至的工具； 现常用的质粒经人工改造，有多种限制酶切点。
5、 cDNA以mRNA为模板，利用反转录，合成的互补cDNA,在复制成双链cDNA
6、 不对称转录两方面含义，一是DNA分子双链上-?股链作为模板指引转录，另一股不转录;
二是模板链并不总在同一单链上。 简答题（6分/题）：
1、乳糖操纵子的结构和功能。
*乳糖操纵子（Lac operon）结构
控制区：调节基因I■编码阻遏蛋白，CAP结合位点，启动序列P （其CAP结合位点位于RNA 聚合酶结合位点上游）和操纵基因0；
I基因T阻遏蛋白T0 ）予列9阻遏RNApol
结构基因：B■半乳糖苜酶基因lacZ\\通透酶基因lacY\\乙酰基转移酶?lacA。 低乳糖时，lac操纵子处于阻遏状态，机制： 启动序列PIT调节基因T阻遏蛋白T操纵序列0 T阻遏RNApol结合启动序列P,从而抑制转录启动；
将染色体的目的基因克隆到载体（如质粒）进行表达，主要过程
1、 目的基因的获取：化学合成、基因组DNA文库、cDNA文库、PCR
2、 克隆载体的选择与构建：为携带和表达目的外源DNA而采用的一些DNA分子称克隆载体,
其屮插入外源D7A可转录翻译成多肽链的称表达载体。常用的载体包括：质粒DNA、噬菌体
DNA、病毒 DNA
*3、外源基因与载体的连接：粘性末端连接、平端连接、同聚物加尾连接、人工接头连接 4、 重组DM导入受体菌：转化、转染、感染
问答22分
列举三种特殊DNA序列并说明生物学功能
端粒：真核生物染色体DNA分子末端特殊结构，短GC丰富的序列以及蛋白质组成。 作用：1）维持染色体的稳定性；2）维持DNA复制的完整性。 四膜虫 TTGGGG/AACCCC 脊椎动物 TTAGGG/AATCCC
-35区TTGACA序列是RNA-pol中o亚基识别并结合的位点；
-10区有TATAAT序列-Prinbow盒，因富含AT而DNA双链易分离，利RNA-pol发挥作用，为 RNA-pol与DNA模板结合的部位。
Hogness盒：真核生物转录起始上游保守序列5' TATA序列 2003级五年制生化期末考试大题
名词解释（3分/题）：
1、 HGP
2、 质粒细菌中，独立于染色体外的双链闭环DNA分子，用于克隆几千bp外源DNA片段。基
因工程常用载体一能将外源目的DNA导入受体细胞，并能自我复制增至的工具； 现常用的质粒经人工改造，有多种限制酶切点。
5、 cDNA以mRNA为模板,利用反转录,合成的互补cDNA,在复制成双链cDNA
6、 不对称转录两方面含义，一是DNA分子双链上一股链作为模板指引转录，另一股不转录;
二是模板链并不总在同一单链上。 简答题（6分/题）：
1、乳糖操纵子的结构和功能。
*乳糖操纵子（Lac operon）结构
控制区：调节基因卜编码阻遏蛋白，CAP结合位点，启动序列P （其CAP结合位点位于RNA 聚合酶结合位点上游）和操纵基因0；
T基因一阻遏蛋白一0序列一阻遏RNApol
结构慕因：半乳糖苛酶基因lacZ\\通透酶基因lacY\\乙酰基转移酶-lacAo 低乳糖时，be操纵子处于阻遏状态，机制： 启动序列PI-调节基因I-阻遏蛋白一操纵序列0 -阻遏RNApol结合启动序列P,从而抑制转录启动；
4、 半保留复制的实验证明。
用N15标记大肠杆菌DNA的实验：将大肠杆菌放在含15NH4CI的培养基中培养若干代后，
DNA全部被标记15N,密度大于正常14N-DNA；
将N15标记大肠杆菌DNA放在14NH4CI中培养，分代提取，发现第一代只位于重带；第二 代出现中带、轻带各一半；随着不断培养，重带被稀释，轻带比例越来越高，说明~
5、 原核启动子的特点如何？有什么应用？ ？ ？ ？
何谓启动子，原核生物启动子中有哪些特征序列，作用如何？
启动子：RNA聚合酶识别、结合并启动转录的特异DNA序列，是控制转录的关键部位。原 核生物需o因子辨认转录起始位点
原核基因转录调控特点：1、。因子决定RNA-pol识别特异性。2、操纵子机制在原核基因调 控中具普遍意义。3、特异的阻遏蛋白与阻遏机制具普遍性。CAP正性调节作用、协调调节 （阻遏蛋白与CAP） 论述题（11分/题）：
1、 实验中如何筛选出含有DNA重组体的宿主细菌？
*重组体筛选和克隆基因的表达厂重组体阳性菌株的筛选 鉴定哪一菌落或噬菌斑的重组DNA分子带有目的基因的过程称~
直接筛选法：1.药物抗性检测；用于细菌，真菌，植物和动物细胞的各种抗生素抗性基因- 若克隆载体携带某种抗菌性标志基因，转化后只有含这种抗菌基因的子细菌，才能在含该抗 生素的培养板上形成菌落；2）标志补救：转化或转染的外源基因表达产物可弥补基因缺陷 性宿主菌的性状；3）分子杂交：対于整合型载体，则应该利用DNA杂交或RNA杂交法证实: 用探针与
DNA克隆片段进行杂交，直接选择鉴定。
免疫学方法：利用特异抗体，与目的基因表达产物作用，进行筛选，包括免疫化学和酶免疫 检测分析。鉴定目的基因的特异表达产物，特异性强、灵敏度高，适用于筛选无任何选择标 记的基因
2、 DNA聚合酶、拓扑酶、连接酶各有何功能？描述一个须要这三种酶同时作用的代谢过程。
拓扑异构酶复制时能松解并理顺DNA超螺旋结构的E,改变DNA拓扑学构象；兼内切酶、 连接酶作用
DNA连接酶催化相邻单链DNA片段连接，磷酸二酯键；条件： 1、 一-条链齐末端有游离径基?0H,另--条链5一末端有磷酸基团?P
期末复习资料(生物化学)中大历届试题.docx
