分子生物学考研习题集

达的单位即转录单位，在原核生物中一般由多个可翻译成蛋白质的片段组成；而在真核生物中则不然，仅含有一个翻译单位的转录单位称为一个顺反子。顺反子可以通过互补分析得以鉴定：若两个突变单位不能通过反式互补实验使功能得以恢复，则说明这两个突变单位位于同一转录单位。

假定你在25℃条件下用如下浓度的DNaseI：0，0.1，1.0及10.0mg/ml，对鸡红细胞细胞核的染色质进行酶切20分钟。将这些样品与分子量标记一起上样于6％变 性聚丙烯酰胺凝胶，下图是凝胶电泳的结果。但由于你混淆了样品，因此弄不清每个泳道对应的样品是什么。惟一可以确信的是分子量标记上样于左边的泳道，但忘记了各带对应的分子量大小(图1．1)。 (1)请回忆起在各泳道分别使用的是哪一浓度的DNaseI? (2)请指出分子量标记泳道(用M表示)各带的大约分子量。 (3) 描述各泳道所显示的染色质结构特征，证实所记忆的数字是正确的。 --类型：分析题

--答案：36 答： (1)和(2)的答案示如图A1.1。 (3)在没有DNaseI加入时，染色质没有被消化，可以看到一条高分子量的带。在 低浓度下(O.1mg/ml)，DNase I切割核小体之间的连接DNA产生一个单核小体 带(200nt的带)、双核小体带(400nt的带)等等。增加核酸酶的浓度到1.0mg／ml， 这时所有的多核小体带都被切割成单核小体的带。在非常高的浓度下，包围组 蛋白八聚体的DNA也会被切割。只有当一条链处于双螺旋之外时，它才可能 有敏感性。消化后，产生了与DNA的周期性结构相关的相间10个核苷酸的条带。由此可说明记忆的数字是正确的。

假定你从一新发现的病毒中提取了核苷酸，请用最简单的方法确定：（1）它是DNA还是RNA？（2）它是单链还是双链？ --类型：分析题

--答案：37 答： 确定碱基比率。如果有胸腺嘧啶，为DNA，如果有尿嘧啶，则为RNA。如果为双 链分子，那么A与T(或U)的量以及G与C的量应相等。

RNA 是由核糖核酸通过（ ）键连接而成的一种（ ）。几乎所有的RNA都是由（ ）DNA（ ）而来，因此，序列和其中一条链（ ）。 --类型：填空题

--答案：38 磷酸二酯；多聚体； 模板； 转录； 互补

多数类型的RNA是由加工（ ）产生的，真核生物前体tRNA的（ ）包括（ ）的切除和（ ）的拼接。随着（ ）和（ ）端的序列切除，3’端加上了序列（ ）。在四膜虫中，前体TRNA 的切除和（ ）的拼接是通过（ ）机制进行的。 --类型：填空题

--答案：39 前体分子；加工；内含子；外显子；5’； 3’； CCA； 内含子； 外显子；自动催化

Rnase P 是一种（ ），含有（ ）作为它的活性部位，这种酶在（ ）序列的（ ）切割（ ）。 --类型：填空题

--答案：40 内切核酸酶；RNA；tRNA；5’端；前体RNA

C0t1/2实验测定的是（ ）。 --类型：填空题

--答案：41 RNA的复性程度

假定摆动假说是正确的，那么最少需要（ ）种TRNA来翻译61种氨基酸密码子。 --类型：填空题

--答案：42 32

写出两种合成后不被切割或拼接的RNA：（ ）和（ ）。 --类型：填空题

--答案：43.真核生物中的5SrRNA； 原核生物中的mRNA

原核细胞信使RNA含有几个其功能所必需的特征区段，它们是：( ) --类型：选择题 --选择：(a)启动子，SD序列，起始密码子，终止密码子，茎环结构 (b)启动子，转录起始位点，前导序列，由顺反子间区序列隔开的SD序列和ORF 尾部序列，茎环结构 (c)转录起始位点，尾部序列，由顺反子间区序列隔开的SD序列和0RF，茎环结构 (d)转录起始位点，前导序列，由顺反子间区序列隔开的SD序列和0RF，局部序列

--答案：d

tRNA参与的反应有：( ) --类型：选择题 --选择：(a)转录 (b)反转录 (c)翻译 (d)前体mRNA的剪接 (e)复制

--答案：a

氨酰tRNA的作用由( )决定 ． --类型：选择题 --选择：(a)其氨基酸 (b)其反密码子 (c)其固定的碱基区 (d)氨基酸与反密码子的距离，越近越好 (e)氨酰tRNA合成酶的活性

--答案：c,d

I型内含子能利用多种形式的鸟嘌吟，如：( ) --类型：选择题 --选择：（a）GMP (b)GDP (c)GTP (d)dGDP (e)ddGMP(2’，3’–双脱氧GMP)

--答案：c,d

I型内含子折叠成的复杂二级结构：( ) --类型：选择题 --选择：(a)有长9bp的核苦酸配对 (b)对突变有很大的耐受性 (c)形成可结合外来G和金属离子的“口袋” (d)使内含子的所有末端都在一起 (e)在剪接过程中发生构象重组 (f)利用P1和P9螺旋产生催化中心

--答案：a,c,e

RNase P：( ) --类型：选择题 --选择：(a) 其外切核酸酶活性催化产生tRNA成熟的5’末端 (b)含有RNA和蛋白组分 (c)体内切割需要两个组分 (d)体外切割需要两个组分 (e)采用复杂的二级与三级结构形成催化位点

--答案：a,b,c,e

锤头型核酶：( ) --类型：选择题 --选择：(a)是一种具有催化活性的小RNA (b)需要仅含有17个保守核苦酸的二级结构 (c)不需要Mg2+协助 (d)可用两个独立的RNA创建锤头型核酶

--答案：a,b,d

I型剪接需要( ) --类型：问答题 --选择：(a)单价阳离子 (b)二价阳离子 (c)四价阳离子 (d)U1SnRNP (e)一个腺苷酸分支点 (f)一个鸟嘌吟核苷酸作为辅助因子

--答案：a,b,f

在I型剪接的过程中，( ) --类型：选择题 --选择：(a)游离的G被共价加到内含子的5’端 (b)GTP被水解 (c)内含子形成套马索结构 (d)在第一步，G的结合位点被外来的G占据，而在第二步时，被3’剪接位点的G 所取代 (e)被切除的内含子继续发生反应，包括两个环化反应

--答案：a,d,e

对于所有具有催化能力的内含子，金属离子很重要；请举例说明金属离子是如何作用的。 --类型：简答题

--答案：53. 答： 锤头型核酶在活性位点上结合一个Mg2+离子。这个Mg2+离子通过去掉一个质子并 攻击切割位点而直接参与切割反应。

列出真核生物mRNA与原核生物mRNA的区别。 --类型：简答题

--答案：54. 答： 原核生物和真核生物mRNA的差别在于可翻译顺反子的数目，真核生物的mRNA是单个顺反子。而且，真核生物的mRNA在其3’末端有多聚腺嘌呤尾巴(po1yA)，而5’末端有7—甲基鸟嘌呤帽子。真核生物的mRNA尾部区域有时会携带特定的去稳定因子。 列出各种tRNA所有相同的反应及个别tRNA的特有反应。 --类型：简答题

--答案：55. 答： (1)相同反应：与核糖体结合；除了起始tRNA以外，其他均与延长因子相互作用。 (2)特殊反应： 起始氨酰tRNA的甲酰化作用； 起始氨酰tRNA同起始因子的相互作用； 密码子与反密码子的碱基配对； 由氨酰tRNA合成酶催化氨酰化。

在体内，rRNA和tRNA都具有代谢的稳定性，而mRNA的寿命却很短，原因何在？ --类型：简答题

--答案：56 答： 在不同的营养状态或细胞分化期间，mRNA的(种类和数量)变化很大；rRNA和 tRNA则无此特性。

为什么真核生物核糖体RNA基因具有很多拷贝? --类型：简答题

--答案：57. 答： 因为rRNA需要的量很大，并且没有翻译扩增作用。

为什么说信使RNA的命名源自对真核基因表达的研究，比说源自对原核基因表达的研究更为恰当? --类型：简答题

--答案：58. 答： 真核基因表达过程是被区室化的。 mRNA的合成与成熟是在细胞核中完成的，翻译则发生在细胞质中，转录“信息”被传递到细胞核外的核糖体中。由于真核细胞 mRNA的半衰期比原核细胞mRNA长而且可以通过多种实验方法干扰转录“信息”的传递，因此可分离出真核细胞的mRNA。

说明为什么mRNA仅占细胞RNA总量的一小部分(3％一5％)。 --类型：简答题

--答案：59 答： mRNA只占总RNA的3％一5％，这主要是有以下两个原因：①由于需要大量的核 糖体和稳定的tRNA群，因此mRNA合成量比其他RNA的量要少；②由于对内切 酶与外切核酸酶敏感，mRNA容易自发地降解，所以在原核细胞中mRNA的半衰期 只有2一15分钟，真核细胞中也只有4—24小时。

为何rRNA和tRNA分子比mRNA稳定? --类型：简答题

--答案：60. 答： mRNA游离存在于细胞之中，并且被特异的单链RNA核酸酶所降解。tRNA和rRNA 是部分双链的，所以能够免遭核酸酶的攻击。另外，rRNA不是游离存在的，通常同蛋白质结合形成核糖体。

起始tRNA具有哪两种与其他跟tRNA不同的特性? --类型：简答题

--答案：61. 答： (1)带有一个甲酰化的氨基酸(N—甲酰甲硫氨酸)； (2)它是惟一一种同30S核糖体亚基—mRNA复合物内的密码子(AUG)起反应的tRNA

区别tRNA和mRNA在翻译中的作用。 --类型：简答题

--答案： 62. 答： mRNA是氨基酸装配成多肽的模板。 tRNA一方面是识别特异氨基酸的接头分子，另一方面又可以识别特异的mRNA密码子。

氨基酸分子如何与正确的tRNA分子连接? --类型：简答题

--答案：63. 答： 对于每一种氨基酸都有一种特殊的氨酰tRNA合成酶，这种酶可以识别自己的氨基酸和相应的空载tRNA在ATP存在的情况下，它把氨基酸的羧基同tRNA 3’端的 CCA连接起来。

简要说明证明信使的存在及其本质为RNA的证据。 --类型：简答题

--答案：64.答： (1)科学家观察到生物，尤其是真核生物中，染色体DNA只存在于核中，而蛋白 质合成则完全在细胞质中进行。 因此，提出一定存在某种化合物(信使)在核 与细

胞质之间传递遗传信息。1957年，E11iot Volkin和Lazlrus Astrachan注意到用噬菌体T2感染E.coli细胞后细菌的RNA和蛋白质合成迅速停止，而T2的RNA和蛋白质迅速合成。此外，这一RNA的碱基比例与T2 DNA碱基比例一致，而不是细菌DNA.他们的发现第一次证明了信使为RNA。 (2) 1961年Bernard Hall和So1 Spiegelman用杂交实验更令人信服地证明了mRNA假说。他们用噬菌体T2感染E.coli后，马上分离出现的RNA(假定为信使)，再 将E.coli和噬菌体T2DNA温热变性，成为单链DNA，把RNA和单链DNA混合后缓慢冷,发现：①双链DNA分子重新形成；②当单链的DNA和RNA的碱基互补时，形成DNA-RNA杂合双链分子。他们发现噬菌体T2感染后出现的RNA不能与E.coli 的DNA杂交， 但至少能与T2双链DNA中的一条链互补。

列举4种天然存在的具有催化活性的RNA。 --类型：简答题

--答案：65.答： I型内含子、II型内含子、RnaseP、锤头型核酶。

I型内含子发生改变后，可以产生其他酶的活性吗?如果可以，是哪些活性?这意味着I型内含子的催化中心有什么特点？ --类型：简答题

--答案：66.答：可以。这些活性包括：RNA聚合酶、内切核酸酶、磷酸酶、连接酶的活性。将I 型内含子转变成这些酶的能力表明它能结合于RNA的糖—磷酸骨架并能催化在它前后的几个不同反应。例如，连接是剪切的相反反应。

某些自剪接的内含子具有可读框，它们编码何种蛋白?这与内含子的移动有什么关系? --类型：简答题

--答案：67.答： 编码的蛋白有：反转录酶、内切核酸酶、成熟酶。这些蛋白产生内含子的一个DNA 拷贝并在染色体一个新位点上打开双链以便插入内含子。

有一个被认为是mRNA的核苦酸序列，长300个碱基，你怎样才能： (1)证明此RNA是mRNA而不是tRNA或rRNA。 (2)确定它是真核还是原核mRNA。 --类型：分析题

--答案：68.答：根据序列组成进行判断： (1)此序列太长不可能是tRNA。如果它是rRNA，应该含有许多特殊元件，如：假 尿嘧啶和5—甲基胞嘧啶； 同时应具有可以形成发夹环的反向重复序列。如果 是mRNA则应有AUG起始密码子、一段相应的氨基酸密码子和一个相应的终止密码子构成的可读框。 (2)所有的真核生物mRNA在5’端都含有一个7—甲基鸟苷，而且大多数还在3’端 有一个长的po1yA尾巴。这些都是原核生物mRNA所不具有的，但是原核生物mRNA*近5’端有l—个核糖体结合序列(SD序列)。

如果两个RNA分子具有适当的序列以及配对恰当，就可以利用它们构建锤头型核酶。其中，“底物链”必须含有5’—GUN—3’(N代表任一种核苷酸)序列，而“酶链”则必须具有核酶催化中心的序列，同时与底物链配对。这样，酶链在N核昔酸的3’端对底物链进行切割。提供适当的酶链，可以降解细胞中不能被锤头型核酶切割的RNA，这为把酶链作为阻断某些基因表达的治疗试剂提供了可能。例如，一些研究小组正在设计可以切割HIV RNA的酶链，将如何设计这种核酶的酶链?如何选择 HIV RNA中的靶序列?该酶链应具有什么特点?另外，以RNA作为药物，将会碰到什么问题? --类型：分析题

--答案：69.答： 首先，目标RNA必须具有5’-GUN-3’序列。这一序列不能位于参与形成其他RNA 结构(比如说茎—环结构)的区域中，因为这些结构会妨碍RNA与起核酶作用的RNA 链的配对。酶链必须与目标RNA配对，但不能与其它细胞内任何RNA配对，否则RNA会被不正确切除。在目前来说将一种RNA送到目标细胞中还是一件困难的事，但可以通过加上一个