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专题2 细胞工程
2.2..2 动物细胞融合与单克隆抗体
教材预览
导言
我们知道,运用植物体细胞杂家技术,可以跨越植物种属间生殖隔离的屏障,培育出新的作物类型.那么,能不能采用类似的方法,让不同动物的体细胞进行杂交呢?1DQxtBWmHhb5E2RGbCAP 1、动物细胞融合
<1)概念:指______________或______________动物细胞结合形成一个细胞的过程,也称为细胞杂交.1DQxtBWmHhp1EanqFDPw <2)结果:形成____________________细胞.
<3)过程:不同_______________的两个细胞_________________________ 细胞.1DQxtBWmHhDXDiTa9E3d <4)意义:克服了___________杂交的不亲和性,成为研究________、____________ 、1DQxtBWmHhRTCrpUDGiT 肿瘤和生物_____________________培育的重要手段.
思考:1、动物细胞的融合最有价值的应用是什么?细胞融合完成的标志是什么?
提示:远缘杂交;细胞核融合成一个核
2、若a和b两种细胞融合,则融合的方式有三种 ___________ 、___________ 和_____________________.
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满足要求的为______________ ,所以融合后要筛选.1DQxtBWmHh5PCzVD7HxA 提示:a-a b-b a-b 2、单克隆抗体
<1) 抗体:由淋巴细胞<浆细胞)产生,成分为球蛋白,具有_________________ .从血清中分离出来的抗体产量低、纯度低、特异性差.1DQxtBWmHhjLBHrnAILg <2) 单克隆抗体的制备 a.
过
程
_______________________________________________________________1DQxtBWmHhxHAQX74J0X b.杂交瘤细胞的特点:既能大量__________________,又能产生_____________________ .1DQxtBWmHhLDAYtRyKfE c.单克隆抗体的特点:_________________强、_______________高、产量大.1DQxtBWmHhZzz6ZB2Ltk 思考:①单克隆抗体的确切定义是什么? 提示:特异性强,灵敏度高的单一抗体
②制备单克隆抗体时,为什么要选用B淋巴细胞和骨髓
瘤细胞融合形成的杂交瘤细胞?在融合的过程中你可以找出几种类型的细胞?1DQxtBWmHhdvzfvkwMI1 提示:b-b 骨-骨 b-骨 问题探讨
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制备单克隆抗体的过程有两次筛选,两次筛选的目的是什么?
第一次筛选是___________________________________
第二次筛选是____________________________________ 提示:第一次筛选出杂交瘤细胞;第二次筛选出能够产生单一抗体的杂交瘤细胞. 本节聚焦
运用细胞的基础知识,深刻理解这两项技术的原理,并理解这些技术的新进展.结合免疫原理、融合原理以及动物细胞培养,全面理解单克隆抗体的制备过程,利用动物细胞培养技术对杂交瘤细胞进行体外培养和体内培养可生产出专一性强,灵敏性高的抗体.1DQxtBWmHhrqyn14ZNXI 学习过程
我们知道,运用植物体细胞杂家技术,可以跨越植物种属间生殖隔离的屏障,培育出新的作物类型.那么,能不能采用类似的方法,让不同动物的体细胞进行杂交呢?1DQxtBWmHhEmxvxOtOco 一、动物细胞融合
概念:指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的
过程.
原理:细胞膜的流动性
1、动物细胞融合 动物细胞融合的方法:PEG、灭活病毒、电激 过程:诱导动物细胞融合
意义:突破了有性杂交方法的局限
2、动物细胞融合与植物体细胞杂交的异同 比较工程 细胞融合的细胞融合的诱导手段 用途 原理 方法 3 / 17
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植物体细胞细胞膜的流用纤维素杂交 动性 酶、果胶酶去除细胞壁后诱导原生质体融合 动物细胞融细胞膜的流用胰蛋白酶合 动性 使细胞分散后诱导细胞融合 分析讨论
离心、电刺激、振动、聚乙二醇 提示:PEG、灭活病毒、电激 2、动物细胞融合的意义: 提示:这一技术使远缘杂交成为可能,已经成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段. 例题: 动物细胞融合的目的中最重要的是( > A.克服远源杂交不亲和 B.制备单克隆抗体 C.培育新物种 D.生产杂种细胞 解读:考查动物细胞融合的目的.动物细胞融合就是指不同动物细胞的原生质融合,形成杂种细胞的过程.动物细胞融合技术最重要的用途是制备单克隆抗体.( >1DQxtBWmHhSixE2yXPq5 答案:B 例题: 能使动物细胞融合的特有的诱导因子是( > A.离心 B.灭活的病毒1DQxtBWmHh6ewMyirQFL C.电刺激不 D.振动 解读:在体外培养条件下,动物细胞会自发融合,但是频率很低.因此,一般都需要添加具有诱导细胞融合效应的生物药剂或化学药剂,或者采用电融合技术,人为地促进细胞融合.常用的动物细胞融合的诱导因子是聚乙二醇和灭活的病毒.其中聚乙二醇既可用于促进植物原生质体融合,又可用于促进动物原生质体融合.而灭活的病毒只能用于促进动物细胞的融合,如灭活的仙台病毒是最常用的诱导因子,其诱导原理是因为病毒具有侵染细胞的能力,优点是融合率高,对各种动物细胞都适用.1DQxtBWmHhkavU42VRUs 答案:B 例题: 动物细胞融合和植物原生质融合决定于< ) A.细胞膜的流动性 B.细胞膜的选择透过性 C.细胞质的流动性 D.细胞质酶的活性1DQxtBWmHhy6v3ALoS89 4 / 17 个人收集整理资料, 仅供交流学习, 勿作商业用途 解读:考察动物细胞融合和植物原生质融合的原理,二者都利用了细胞膜的流动性 答案:A 同步拓展 对称融合与非对称融合 细胞融合在植物上可以克服有性杂交的不亲和性,打破物种之间的生殖隔离,是扩大遗传重组范围的一种有效手段,也称之为体细胞杂交,由此再生出来的植株是体细胞杂种.1DQxtBWmHhM2ub6vSTnP 进行细胞融合的方式有两种:一是将两个物种的细胞除去细胞壁后,将完整的原生质体融合在一起.在融合的细胞中含有两个细胞核和两种细胞质,这种融合方式叫做对称融合 5 / 17