第27卷第6期2018年12月
CHINESE JOURNAL OF HISTOCHEMISTRY AND CYTOCHEMISTRY
中国组织化学与细胞化学杂志
Vol.27.No.6December.2018
结膜恶性黑色素瘤3例临床病理分析及文献复习
申发燕，张海萍*，钟山，白冬雨，张海芳，吴琴超
（厦门大学附属第一医院病理科，厦门 361003）
〔摘要〕目的 探讨结膜恶性黑色素瘤的临床特点及病理学特征，并进行文献复习。方法 回顾性分析3例结膜恶性黑色素瘤的临床特点、病理学特征、免疫表型特点及分子生物学特点。结果 老年男性患者多见，病程2个月～1年，有近期肿物增大过快病史。肿瘤细胞呈上皮样细胞型、梭形细胞型或者二者混合型，均可见黑色素沉着。免疫表型：3例HMB45、melan A、S-100、cyclinD1和vimentin均为阳性，只有2例p53阳性，3例Ki-67增殖指数25%~60%。分子病理：3例病例中有1例发生了BRAF V600E突变，均未检测到c-Kit突变。3例患者均进行局部肿瘤切除，随访3个月至5年均未复发、转移。结论 结膜的恶性黑色素瘤临床较罕见，镜下形态多样，有时缺乏黑色素，melan-A、HMB-45、S-100、cyclin D1、vimentin等免疫组织化学标记可以辅助诊断，分子检测BRAF V600E和c-Kit也有提示作用，早期发现并进行局部肿瘤切除术，效果较好。
〔关键词〕结膜；恶性黑色素瘤；病理特征；免疫表型；BRAF V600E
〔中图分类号〕R739.5 〔文献标识码〕A DOI：10.16705/ j. cnki. 1004-1850. 2018. 06. 009
Clinical pathological analysis for and literature review of 3 cases of conjunctival
malignant melanoma
Shen Fayan, Zhang Haiping*, Zhong Shan, Bai Dongyu, Zhang Haifang, Wu Qinchao
(Department of Pathology, the First Affiliated Hospital of Xiamen University, Xiamen 361003, Fujian)
〔Abstract〕Objective To investigate the clinical features and pathological features of conjunctival malignant melanoma and review the literature. Methods The clinical features, pathological features, immunophenotypic characteristics and molecular biological characteristics of 3 cases of conjunctival malignant melanoma were retrospectively analyzed. Results The onset was common in older male patients. The course of disease lasted 2 months to 1 year. There was a history of rapid enlargement of the tumor recently. The tumor cells presented epithelioid cell type, spindle cell type or a mixture of the two, and all of them were melanin. Immunophenotype: the expression of HMB45, melanA, S-100, cyclinD1 and vimentin in the 3 cases were positive, while only 2 cases were positive for p53, and proliferation index of Ki-67 in the 3 cases ranged from 25% to 60% +. Molecular biology: BRAF V600E mutation was ob-served in 1 of 3 cases, while no c-Kit mutation was detected in any of them. All the 3 patients underwent local tumor resection. There was no recurrence or metastasis after 3 months to 5 years of follow-up. Conclusion The malignant melanoma of the conjunctiva is rare in clinical practice, which showed various forms under the microscope and sometimes were lack of melanin. Immunohistochemical markers such as melan-A, HMB-45, S-100, cyclin D1 and vimentin can assist the diagnosis. The molecular detection for BRAF V600E and c-Kit also contributes to the diagnosis. The effect of early detection and local tumor resection is better.
〔Keywords〕Conjunctiva; malignant melanoma; pathological features; immunophenotype; BRAF V600E
黑色素瘤是一种高度恶性肿瘤，是由于黑色素细胞异常增殖而形成，结膜的恶性黑色素瘤临床较
罕见，部分病例镜下观察缺乏黑色素，且病理形态多样，因此诊断较困难，本文回顾性整理分析3例结膜恶性黑色素瘤的临床及病理学特点，旨在提高对该疾病的认识水平。
〔收稿日期〕2018-06-10 〔修回日期〕2018-11-18
〔作者简介〕申发燕，女（1983年），汉族，主治医师
*通讯作者(To whom correspondence should be addressed)：zhp3398@163.com
材料与方法
1 材料
收集整理厦门大学附属第一医院病理科2012年
560中国组织化学与细胞化学杂志
第27卷
1月～2018年5月诊治的具备完整资料的3例结膜恶性黑色素瘤，同期恶性黑色素瘤175例，因此结膜恶性黑色素瘤占同期黑色素瘤的1.7％。患者平均
发病年龄65岁(范围54～83岁)，其中男性2例，女性1例。患者偶有眼红、异物感等临床症状，无视力下降,其中1例伴出血、渗出（表1）。
表1 3例结膜恶性黑色素瘤的临床资料
Tab.1 Clinical data of 3 cases of conjunctival malignant melanoma
病例性别12
女男
年龄59岁83岁
部位右眼结膜左眼结膜
临床病史
发现肿物1年，近2个月增大较明显
手术方式
随访
局部肿瘤切除术5年，未见复发和转移
发现肿物3个月余，初始米粒大小，自觉
局部肿瘤切除术6个月，未见复发和转移
增大发现肿物2个月，肿物进行性增大，左眼
自幼黑色新生物，双眼膜状物生长4年，局部肿瘤切除术3个月，未见复发和转移进行性生长，平素常出现眼红、异物感
3男54岁左眼结膜
2 方法
送检标本均用10％中性福尔马林液固定，经石蜡包埋，3μm厚组织蜡块切片，然后HE染色，显微镜下观察。免疫组织化学检测均用全自动多功能组织病理检测系统（Benchmark ULTRA）检测（美国VENTANA公司），本实验免疫组织化学检测方法是Multimer AP Red，显色系统为ultraVIEW Universal AP Red，一抗包括HMB-45、S-100、melan-A、cyclin D1、vimentin、CK、CD10、CD34、CD99、SMA、desmin、p53和Ki-67。以上一抗均购自福州迈新科技有限公司。步骤严格参照说明书进行，并设立已知的阳性对照及用PBS代替一抗的阴性对照，
结 果
1 大体检查
3例结膜恶性黑色素瘤患者均进行局部肿瘤切其中肿瘤的最大径为0.7cm，浸润皮下最深距离为
质地中等。2 镜下特点
病例1肿瘤细胞呈上皮样型，细胞呈腺泡样、巢团状排列，巢团间见毛细血管增生，瘤细胞呈卵圆形，胞质丰富、淡染，胞界不清，核稍大，核形不规则，部分胞核可见核沟，可见明显核仁，并见病理性核分裂像，伴较多量色素沉着。病例2肿瘤累及表面鳞状上皮，表皮伴破溃，见炎性纤维素性渗出，瘤细胞呈弥漫片状浸润性生长，瘤细胞呈梭形或长椭圆形，核大，核仁不明显，部分胞核呈泡状核，核分裂像多见，胞质透亮、淡染，可见核周空泡，胞界不清，可见少量色素沉着，并可见少量坏死。病例3肿瘤细胞部分区域呈巢团状的上皮样型排列，部分区域呈席纹状的梭形细胞排列，肿瘤累及表面鳞状上皮，上皮样型区域瘤细胞呈卵圆形，胞浆丰富、粉染，核大，核仁明显，伴核偏位；梭形清，核分裂像可见，间质较多量淋巴细胞为主炎细
除术，切除标本范围均≤1cm，肿瘤大体呈结节状，细胞型区域，瘤细胞呈长梭形，胞浆粉染，胞界不0.3cm，肿瘤切面界限不清,呈灰黑、灰褐或暗红色，胞浸润，可见较多量色素沉着（表2，图1A-D）。
表2 3例结膜恶性黑色素瘤的病理资料
Tab. 2 Pathological data of 3 cases of conjunctival malignant melanoma
病例123
性别女男男
年龄59岁83岁54岁
大体表现结节状，灰褐色结节状，暗红色结节状，灰黑色
肿瘤大小0.7×0.4×0.1cm0.8×0.7×0.3cm0.5×0.5×0.2cm
浸润深度0.1cm0.3cm0.2cm
镜下特点上皮样型梭形细胞型上皮样型+梭形细胞型
黑色素较多量少许较多量
坏死无有无
3 免疫表型
肿瘤细胞含有黑色素，因此本研究采用ultra-VIEW Universal AP Red显色，阳性染色呈红色，
有助于阳性细胞观察。免疫组织化学染色显示：3例HMB45、melanA、S-100、cyclinD1和vimentin均为阳性，2例为p53阳性，3例Ki-67增殖指数
第6期申发燕等.结膜恶性黑色素瘤3例临床病理分析及文献复习 561
图1结膜恶性黑色素瘤的HE染色及免疫组织化学染色。A，病例1肿瘤细胞呈上皮样型，细胞核大，核仁明显，并见黑色素沉着；B，病例2肿瘤细胞呈梭形细胞样型，可见出血、渗出；C，病例3上皮样区肿瘤细胞呈片状排列，核呈卵圆形；D，病例3梭形细胞区肿瘤细胞呈席纹状、旋涡状排列；E，HMB-45肿瘤细胞弥漫阳性表达；F，Melan-A肿瘤细胞弥漫阳性表达；G，S-100 肿瘤细胞弥漫强阳性表达；H，Cyclin-D1肿瘤细胞弥漫强阳性表达；比例尺，50μm
Fig.1 HE staining and immunohistochemistry of conjunctival malignant melanoma. A, case 1 tumor cells were epithelial-like type, with large nuclei, obvious nucleoli, and melanin deposition; B, case 2 tumor cells show spindle-cell morphology, with hemorrhages and exudates; C, epithelioid tumor cells of case 3,which are arranged in patches, with an ovoid vesicular nucleus; D, spindle tumor cells of case 3, which are arranged in whorled and storiform; E, diffuse positive expression of tumor cells for HMB-45; F, diffuse positive expression of tumor cells for Melan-A ; G, diffuse strong positive expression of tumor cells for S-100; H, diffuse strong positive expression of tumor cells for Cyclin-D1; scale bar, 50μm
结膜恶性黑色素瘤3例临床病理分析及文献复习
