专题1 基因工程 1.2 基因工程的基本操作程序
1．基因工程技术也称DNA重组技术，其实施必须具备的4个必要条件是( )
A．目的基因、限制酶、载体、受体细胞 B．工具酶、目的基因、载体、受体细胞 C．模板DNA、mRNA、质粒、受体细胞
D．重组DNA、RNA聚合酶、限制酶、DNA连接酶
解析：基因工程的基本工具是限制酶、DNA连接酶和载体，前两者统称为工具酶；在实际操作中，载体上插入目的基因形成重组载体，然后导入受体细胞。
答案：B
2．在已知某目的基因的一段核苷酸序列的情况下，要在短时间内大量获取该目的基因，最简便的方法是( )
A．化学合成法 C．cDNA文库法
B．基因组文库法 D．利用PCR技术扩增
解析：利用PCR技术扩增目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，根据这一序列合成引物，进而在一定条件下利用DNA双链复制的原理，将目的基因的核苷酸序列不断地加以复制。通过这一技术，可以在短时间内大量扩增目的基因。
答案：D
3．将目的基因导入玉米茎尖分生区细胞和小鼠受精卵，应分别采用的方法是( )
A．显微注射技术 农杆菌转化法
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B．基因枪法 花粉管通道法 C．农杆菌转化法 显微注射技术 D．基因枪法 显微注射技术
解析：玉米是单子叶植物，对单子叶植物来说，常用的方法是基因枪法；对于动物细胞来说，常用的方法是显微注射技术。
答案：D
4．检测转基因生物染色体DNA上是否插入了目的基因的常用方法是( ) A．DNA分子杂交技术
B．荧光分子标记技术
C．放射性同位素标记技术 D．显微注射技术
解析：检测目的基因常采用DNA分子杂交技术，即在含有目的基因的DNA片段上用放射性同位素等进行标记，以此作为探针，并使探针与基因组DNA杂交，若显示出杂交带，则表明目的基因已插入染色体DNA中。
答案：A
5．下图为基因表达载体的模式图，有关说法错误的是( )
A．构建基因表达载体需要用到限制酶和DNA连接酶 B．任何基因表达载体的构建都是一样的，没有差别
C．图中启动子位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位 D．抗生素抗性基因的作用是作为标记基因，用于鉴别受体细胞中是否导入了目的基因
解析：构建基因表达载体需要用到限制酶和DNA连接酶，A正确；不同基因表达载体上的酶切位点和标记基因都有可能不同，B错误；启动子位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，C正确；抗生素抗性基因的作用就是作为
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标记基因，用于检测受体细胞中是否导入了目的基因，D正确。
答案：B
6．(2016·海南卷)基因工程又称为DNA重组技术，回答相关问题： (1)在基因工程中，获取目的基因主要有两大途径，即________和从________中分离。
(2)利用某植物的成熟叶片为材料，同时构建cDNA文库和基因组文库，两个文库相比，cDNA文库中含有的基因数目比基因组文库中的少，其原因是_______________________________________
_______________________________________________________ _____________________________________________________。
(3)在基因表达载体中，启动子是________聚合酶识别并结合的部位。若采用原核生物作为基因表达载体的受体细胞，最常用的原核生物是________。
(4)将目的基因通过基因枪法导入植物细胞时，常用的携带目的基因的金属颗粒有________和________颗粒。
解析：本题主要考查目的基因的获取方法、基因表达载体的构建方法、目的基因导入植物细胞的方法。
(1)在基因工程中，获取目的基因主要有两大途径，既可在核苷酸序列已知的情况下人工合成，也可用限制酶对生物材料的DNA切割，再选取。
(2)cDNA文库是由mRNA反转录获得的，其中只含有叶细胞已转录(或已表达)的基因，而基因组文库中含有该植物的全部基因。
(3)在基因表达载体中，启动子是RNA聚合酶识别并结合的部位。若采用原核生物作为基因表达载体的受体细胞，最常用的原核生物是大肠杆菌。
(4)将目的基因通过基因枪法导入植物细胞时，常用的携带目的基因的金属颗粒有金粉和钨粉颗粒。
答案：(1)人工合成 生物材料
(2)cDNA文库中只含有叶细胞已转录(或已表达)的基因，而基因组文库中含有该植物的全部基因
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(3)RNA 大肠杆菌(或细菌) (4)金粉 钨粉
A级 基础巩固
1．下列不属于获取目的基因的方法是( ) A．利用DNA连接酶复制目的基因 B．反转录法
C．从基因文库中获取目的基因 D．利用PCR技术扩增目的基因
解析：对目的基因(DNA片段)进行复制需利用DNA聚合酶而不是DNA连接酶。
答案：A
2．下列关于基因表达载体构建的相关叙述，不正确的是( ) A．需要限制酶和DNA连接酶 B．必须在细胞内进行
C．抗生素抗性基因可作为标记基因 D．启动子位于目的基因的首端
解析：基因表达载体的构建是指目的基因与载体结合，在此过程中需用同一种限制酶切割目的基因与载体，用DNA连接酶将互补的末端连接起来；基因表达载体的构建是在细胞外进行的；基因表达载体包括启动子(位于基因首端使转录开始)、终止子、目的基因和标记基因。
答案：B
3．下列不可能作为基因工程受体细胞的是( ) A．动物的受精卵细胞 C．大肠杆菌细胞
B．人的神经细胞 D．酵母菌细胞
解析：动植物的受精卵细胞均可作为基因工程的受体细胞，以培育成转基因
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动植物；大肠杆菌细胞和酵母菌细胞是人们最常利用的受体细胞，它们具有很强的繁殖能力，是生产某些药品的良好实验材料。人的神经细胞高度分化，已失去分裂能力，不能作为基因工程的受体细胞。
答案：B
4．基因工程的正确操作步骤是( )
①目的基因与运载体相结合 ②将目的基因导入受体细胞 ③检测目的基因的表达 ④提取目的基因
A．③④②① C．④①②③
B．②④①③ D．③④①②
解析：基因工程的基本操作步骤主要包括四步： (1)目的基因的获取，即④提取目的基因。
(2)基因表达载体的构建，即①使目的基因与运载体结合。 (3)将目的基因导入受体细胞，即②。
(4)目的基因的检测与表达，即③检测目的基因的表达。 答案：C
5．某研究所的研究人员将生长激素基因通过质粒介导进入大肠杆菌细胞内，来表达产生生长激素。已知质粒中存在两个抗性基因：A是抗链霉素基因，B是抗氨苄青霉素基因，且目的基因要插入到基因B中，而大肠杆菌不带有任何抗性基因。下列叙述正确的是( )
A．导入大肠杆菌的质粒一定为重组质粒 B．RNA聚合酶是构建该重组质粒必需的工具酶
C．可用含氨苄青霉素的培养基检测大肠杆菌中是否导入了重组质粒 D．在含氨苄青霉素培养基中不能生长，但在含链霉素培养基中能生长的可能是符合生产要求的大肠杆菌
解析：导入大肠杆菌的质粒可能为重组质粒，也可能为普通质粒，A项错误；构建基因表达载体过程中需要限制酶和DNA连接酶，不需要RNA聚合酶，B项
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2019秋金版学案生物选修3（人教版）练习：专题11.2基因工程的基本操作程序含解析
