纤溶酶原激活物抑制剂-1反义RNA对主动脉内皮细胞部
分功能的影响
富路;梅宇;李晖
【期刊名称】《中华老年医学杂志》 【年(卷),期】2001(020)005
【摘要】目的探讨纤溶酶原激活物抑制剂-1(plasminogen activator inhibitor-1, PAI-1)反义RNA对离体培养的主动脉内皮细胞(endothelial cell, EC) PAI-1表达的作用及对血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的影响. 方法聚合酶链反应(PCR)扩增PAI-1第2外显子,将PCR产物纯化克隆后连入真核细胞表达载体pcDNA3.1(-),构建PAI-1反义RNA重组质粒.将pcDNA3.1-反义PAI-1重组质粒转染EC中.通过免疫组化、免疫印迹法(Westernblot)、双抗体夹心法(ELISA)检测细胞中PAI-1表达的改变, 通过免疫荧光技术观察细胞中PAI-1表达量的变化对VEGF的影响. 结果转染后第3天,细胞中PAI-1含量为0.017 ng/ml,细胞浆内代表VEGF的绿色荧光最弱, 表明VEGF的表达也减少; 第5天,PAI-1含量为0.093 ng/ml,细胞浆内绿色荧光物质略增加; 第7天,PAI-1含量为 0.143 ng/ml, 接近正常值,VEGF的荧光染色接近于正常水平. 结论反义PAI-1 RNA能有效阻断EC中PAI-1的蛋白合成,同时抑制细胞中VEGF的表达. 【总页数】5页(361-365)
【关键词】纤溶酶原激活物抑制剂;反义RNA;内皮细胞生长因子 【作者】富路;梅宇;李晖
【作者单位】哈尔滨医科大学附属第一医院心内科,;哈尔滨医科大学附属第一医