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SHARP-2特异的RNA干扰腺病毒载体的构建及功能鉴定

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SHARP-2特异的RNA干扰腺病毒载体的构建及功能鉴定

肖华婴;寿张飞

【期刊名称】《浙江医学》 【年(卷),期】2012(034)003

【摘要】目的 构建转录SHARP-2 基因特异性的小发夹RNA(SHARP-2-shRNA)的重组腺病毒(Rad-hSHARP),并观察其对正常大鼠肾细胞(NRK cell)SHARP-2基因的表达影响.方法 设计带有SHAPR-2特异性干扰序列的PDC316-SHARP-shRNA穿梭质粒与腺病毒骨架质粒pBHGloxdelE13cre 共转染293 细胞,并在293 细胞内进行同源重组,构建Rad-hSHARP.并使用实时定量RT-PCR在NRK细胞中对重组腺病毒干扰效果进行鉴定.结果 成功构建了特异性SHARP-2基因RNA 干扰的腺病毒载体系统,并有效抑制NRK 细胞中SHARP-2 基因的表达.结论 成功构建SHARP-2-shRNA 的Rad-hSHARP,为利用特异性沉默SHARP-2基因的腺病毒载体抑制T细胞增殖活化研究奠定基础. 【总页数】4页(173-176)

【关键词】RNA;干扰;小发夹RNA;SHARP-2;基因;腺病毒载体 【作者】肖华婴;寿张飞

【作者单位】310053,杭州,浙江大学医学院附属第二医院滨江院区肾脏内科;浙江大学医学院附属第一医院肾脏病中心 【正文语种】中文 【中图分类】 【相关文献】

1.抑制小鼠低氧诱导因子-1α基因的小干扰RNA腺病毒载体的构建和功能鉴定

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SHARP-2特异的RNA干扰腺病毒载体的构建及功能鉴定

SHARP-2特异的RNA干扰腺病毒载体的构建及功能鉴定肖华婴;寿张飞【期刊名称】《浙江医学》【年(卷),期】2012(034)003【摘要】目的构建转录SHARP-2基因特异性的小发夹RNA(SHARP-2-shRNA)的重组腺病毒(Rad-hSHARP),并观察其对正常大鼠肾细胞(NRKcell)SHA
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