对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类局麻药物的分析
（一）基本结构
局麻药的化学结构通常包括三部分：
1. 亲脂性芳香环 2. 中间连接功能基
3. 亲水性胺基 NH2 中间连接功能基 酯键 酰胺键 药物类别 对氨基苯甲酸酯 酰苯胺 典型药物 盐酸普鲁卡因 盐酸利多卡因 药物类别 对氨基苯甲酸酯 基本结构 典型药物及结构 盐酸普鲁卡因 酰苯胺类 盐酸利多卡因
（二）性质
+ 中间连接功能基 + NH2
1. 吸收光谱特性 +
2. 弱碱性 NH2（成盐，与生物碱沉淀剂发生沉淀） 3. 芳伯胺基特性 NH2（重氮化-偶合反应，与芳醛缩合成Schiff碱反应，易氧化变形） 4. 水解特性 酯键及酰胺键
5. 与重金属离子反应特性 酰胺键 （与铜离子或钴离子络合，生成有色的配合物沉淀，该沉淀可溶于有机溶剂而呈色。 （三）鉴别试验
脂肪胺侧链（UV+IR）
1. 化学鉴别法
① 重氮化-偶合反应
原理：分子结构中具有芳伯胺基或潜在芳伯胺基的药物，均可发生重氮化反应，生成的重氮盐可与碱性β-萘酚偶合生成有色的偶氮染料。 直接： 苯佐卡因、
盐酸普鲁卡因、盐酸氯普鲁卡因、 盐酸普鲁卡因胺
（在酸性溶液中与亚硝酸钠作用，生成重氮盐；再与碱性β-萘酚偶合，产生红色偶氮化合物。）
间接： 盐酸丁卡因
（分子中的芳仲胺基，在酸性溶液中可与亚硝酸钠作用，生成乳白色的N-亚硝基化合物沉淀。） ② 水解反应
盐酸普鲁卡因 Ch.P（2010）
【鉴别】取本品约0.1g，加水2ml溶解后，加10％氢氧化钠溶液1ml，即生成白色沉淀；加热，变为油状物；继续加热，产生的蒸气，能使湿润的红色石蕊试纸变为蓝色；热至油状物消失后，放冷，加盐酸酸化，即析出白色沉淀。 苯佐卡因 ChP（2010）
【鉴别】取本品约0.1g，加氢氧化钠试液5m1，煮沸，即有乙醇生成； 加碘试液，加热，即生成黄色沉淀，并发生碘仿的臭气。
③ 与重金属反应
a. 盐酸利多卡因 1）与铜离子反应 2）与钴离子反应
在酸性溶液中与氯化钴试液反应，生成亮绿色细小钴盐沉淀。
3）与汞离子的反应
HNO3
盐酸利多卡因+Hg（NO3）2→→→黄色
△
HNO3
对氨基苯甲酸酯类+Hg（NO3）2→→→红色/橙黄色
△
盐酸利多卡因+硫酸铜 →→→蓝紫色→→→黄色
碳酸钠 氯仿
b. 盐酸普鲁卡胺
羟肟酸铁盐反应
3
盐酸普鲁卡胺+H2O2→→→羟肟酸→→→羟肟酸铁(紫红色→暗棕色
△ FeCl
→棕黑色) 2. 光谱法 UV
盐酸布比卡因 ChP（2010）
【鉴别】取本品，精密称定，按干燥品计算，加0.01mol/L盐酸溶液制成每1ml中含0.40mg的溶液，照分光光度法（附录ⅣA）测定，在263nm与271nm的波长处有最大吸收；其吸收度分别为0.53～0.58与0.43～0.48。
3. 色谱法 （四）含量测定
1. 亚硝酸钠滴定法 基本原理 具芳伯氨基的药物
a. 具游离芳伯氨基的药物可用本法直接测定。
b. 具潜在芳伯氨基的药物，如具酰胺基药物（对乙酰氨基酚等）经水解 芳香族硝基化合物（如无味氯霉素）经还原，也可用本法测定。 Ar-NH2+NaNO2+2HCl→→→ Ar-N≡N +NaCl+H2O Cl- 测定的主要条件
重氮化反应的速度受多种因素的影响，亚硝酸钠滴定液及反应生成的重氮盐也不够稳定，因此在测定中应注意以下主要条件： （1）加入适量KBr加速反应 KBr为催化剂
NO+Cl-
→→→ →→→ →慢 快 快
在盐酸存在下，重氮化反应的机理为 NaNO2+HCl → HNO2+NaCl HNO2+ HCl → NOCl + H2O
含量测定法 容量分析法 光谱法 色谱法 亚硝酸盐滴定法 非水溶液滴定法 紫外分光光度法 高效液相色谱 →→
HNO2+HBr NOBr H2O （1）K1 HNO2+HCl NOCl+ H2O （1）K2 K1 ≈ 300 K2
∴加入KBr，可增大被测溶液中NO+的浓度，能加快重氮化反应速度。 （2）加过量盐酸加速反应 在不同酸中重氮化反应的速度为： HBr ＞ HCl ＞ H2SO4 ＞ HNO3 ① 重氮化反应速度加快； ② 重氮盐在酸性溶液中稳定；
③ 防止生成偶氮氨基化合物，而影响测定结果 盐酸 1 : 2.5～6；
（3）室温条件下滴定 10～30℃
通常温度高，重氮化反应速度快；但温度太高，可使亚硝酸逸失，并可使重氮盐分解：
一般温度每升高10℃，重氮化反应速度加快2.5倍，但重氮盐分解的速度亦相应地加速2倍；所以滴定一般在低温下进行。 由于低温时反应太慢，经试验，可在室温下进行。 （4）滴定速度：先快后慢
重氮化反应为分子反应，反应速度较慢，滴定不宜过快。
为了避免滴定过程中亚硝酸挥发和分解，滴定时将滴定管尖端插入液面下约2/3处，一次将大部分亚硝酸钠滴定液在搅拌条件下迅速加入，使其尽快反应。
然后将滴定管尖端提出液面，用少量水淋洗尖端，再缓缓滴定。尤其是在近终点时，因尚未反应的芳伯氨基药物的浓度极稀，须在最后一滴加入后，搅拌1～5分钟，再确定终点是否真正到达。这样可以缩短滴定时间，也不影响结果。
滴定管尖端插入液面下2/3处，滴定液一次大部分放下，近终点时方改为慢速滴定。 指示终点的方法
电位法、永停滴定法、外指示剂法、内指示剂法等。
（1）永停滴定法【ChP（2010）BP（2010）】 （附录ⅦA）
用作重氮化法的终点指示时，调节R1使加于电极上的电压约为50mV。
取供试品适量，精密称定，置烧杯中，除另有规定外，可加水40ml与盐酸溶液（1→2）15ml，而后置电磁搅拌器上，搅拌使溶解，再加溴化钾2g，插入铂—铂电极后，将滴定管的尖端插入液面下约2/3处，用亚硝酸钠滴定液（0.1mol/L或0.05mol/L）迅速滴定，随滴随搅拌，至近终点时，将滴定管的尖端提出液面，用少量水淋洗尖端，洗液并入溶液中，继续缓缓滴定，至电流计指针突然偏转，并不再回复，即为滴定终点。 原理：
用两个相同的铂电极，在两个电极之间加一低电压（约为50MV），并串联一微电流计。
电极浸在被滴定液中，用亚硝酸钠滴定时，终点前，线路上无电流或仅有很小的电流流过微电流计，所以指针为零；当到终点时，由于有微量亚硝酸存在，在电极上有氧化还原反应，线路上有电流通过，电流计指针突然偏转，不再回零，即滴定终点。 阴极：
HNO2+ H++ e →NO +H2O 阳极：
NO + H2O →HNO2+ H+ + e
2NaNO2+2KI+4HCl→2NO+I2+2KCl+2NaCl+2H2O 外指示剂法的缺点：
由于滴定的溶液是强酸性，KI遇光能被空气氧化析出碘，所以，在没有达到终点时，就有可能呈现蓝色，而造成误判。
由于经常蘸取溶液进行试验，可造成滴定液的损失而带来误差。 方法难掌握。
（3）内指示剂法 中性红 不可逆指示剂 内指示剂法：
内指示剂法指示终点，操作简便，但生成重氮盐一般都带有颜色，干扰指示剂颜色变化的观察，尤其是颜色很深时，更是这样。 在重氮化滴定法中，内指示剂法应用不是很广泛。 （4）电位法 USP（32） .测定方法
盐酸普鲁卡因 ChP（2010）
取本品约0.6g，精密称定，照永停滴定法（附录ⅦA），在15～25℃，用亚硝酸钠滴定液（0.1mol/L）滴定。每1ml亚硝酸钠滴定液（0.1mol/L）相当于27.28mg的C13H20N2O2·HCl。 2. 非水溶液滴定法 脂烃胺侧链，具弱碱性
（2）外指示剂法 KI-淀粉糊剂或试纸
第八章对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类局麻药物的分析
