HPLC法同时测定不同栽培区域滁菊中8种成分含量

HPLC法同时测定不同栽培区域滁菊中8种成分含量

孙婷婷， 魏雅平， 程 红， 冯 慧， 王 祥， 褚天亮， 叶明君， 俞 浩*

【摘 要】目的：建立同时测定不同栽培区域滁菊中绿原酸、木犀草苷、异绿原酸A、异绿原酸C、黄芩苷、槲皮素、木犀草素、芹菜素等8种成分含量的方法。方法：采用ZORBAX Eclipse Plus C18色谱柱(4.6 mm×250 mm，5 μm)；流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液，梯度洗脱，流速0.8 mL/min，紫外检测波长为327 nm，检测不同区域滁菊中8种成分含量。结果：不同栽培区域滁菊中氯原酸等8种成分的线性关系良好，平均回收率在94.57%～100.01%之间，RSD均小于3%。结论：该方法具有良好的灵敏度、重现性和回收率，可用于滁菊中8种成分的同时测定。 【期刊名称】安徽科技学院学报 【年(卷),期】2019(033)001 【总页数】7

【关键词】HPLC；滁菊；不同栽培区域；同时测定 【文献来源】

https://www.zhangqiaokeyan.com/academic-journal-cn_journal-anhui-science-

technology-university_thesis/0201270204325.html

基金项目：安徽省大学生创新创业训练项目(2018S10879078)；国家级大学生创新创业训练项目(201810879075)。 开放科学(资源服务)标识码(OSID)：

滁菊(Dendranthema morifolium (Ramat) Tzvel. cv. Chuju)为菊科植物菊的干燥头状花序，滁菊因栽培历史悠久、品质优良而驰名全国，其药用价值位列四大白菊之首，为著名道地药材[1]。当前，滁菊产业已成为滁州市地方支柱产

业，对带动当地农民增收致富有重大意义。现代研究表明，滁菊富含黄酮[2]、酚酸[3]、挥发油[4]、氨基酸和微量元素等多种成分[5]，具有抗氧化[6]、抗病毒[7]、镇痛[8]、降压[9]、保护大鼠脑缺血再灌注损伤[10]等多种功能。本试验利用HPLC法同时测定不同栽培区域中滁菊中绿原酸[11]、木犀草苷[12]、异绿原酸A、异绿原酸C[13]、黄芩苷[14]、槲皮素[15]、木犀草素[16]、芹菜素[17]等8 种成分的浓度，以期为滁菊药材的质量控制提供依据。

1 材料与方法

1.1 供试材料

高效液相色谱仪(日本岛津有限公司)；AP-01P真空泵(天津奥特赛恩斯仪器有限公司)；SHZ-DⅢ循环水真空泵(郑州英峪予华仪器有限公司)；CP225D准微量天平(德国赛多利斯公司)；DHG-9101-2SA型电热恒温鼓风干燥箱(上海三发科学仪器有限公司)；TZ520130204离心机(湖南易达京华仪器有限公司)。 滁菊药材样品分别采自滁州市全椒县复兴乡复兴村、周岗乡大庄村、滁州市南谯区城郊乡城西村中郢、南谯区施集镇明张村、南谯区大柳镇广卫村、中国滁州菊花博览园，及安徽科技学院中药科技园等7个不同栽培区域中。绿原酸(含量≥98%，批号：wkq16052705),黄芩苷(含量≥98%，批号：wkq16070503),木犀草素(含量≥98%，批号：wkq16051201)均购于四川省维克奇生物科技有限公司；槲皮素(含量≥98.5%，批号：J1226035)购于上海阿拉丁生化科技股份有限公司；芹菜素(含量≥98.20%，批号：15032610)，购于中国食品药品检定研究院；异绿原酸A(含量≥98%，批号：Y24N8Y49009),木犀草苷(HPLC≥98%，批号：Y05D8H49919),异绿原酸C(含量≥98%，批号：P25J6F1794)购于上海源叶生物科技有限公司。甲醇购于安徽天地高纯溶剂有

限公司；乙腈(色谱纯)购于西格玛奥德里奇(上海)贸易有限公司；其他试剂均为分析纯；试验用水为超纯水。 1.2 试验方法

1.2.1 色谱条件 色谱柱：ZORBAX Eclipse Plus C18色谱柱(4.6 mm×250 mm，5 μm)；流动相：乙腈(A)-0.1%磷酸溶液(B)，梯度洗脱(表1)；流速：0.8 mL/min；检测波长327 nm；柱温30 ℃；进样量10 μL。

1.2.2 混合标准品溶液的制备 精密称定绿原酸、木犀草苷、异绿原酸A、异绿原酸C、黄芩苷、槲皮素、木犀草素、芹菜素标准品各1.0 mg，经70%甲醇溶解后，定容于10 mL容量瓶中，超声20 min，得出0.10 mg/mL的标准品储备液。分别吸取不同体积的溶液制成混合标准品溶液，于4 ℃冰箱保存。各标准品浓度见表2。

1.2.3 滁菊检测样品溶液的制备 取不同栽培区域滁菊，干燥后粉碎，过一号筛，得滁菊粗粉。精密称定滁菊粗粉0.25 g，置具塞锥形瓶中，加入70%甲醇25 mL，称定重量。超声处理(功率300 W，频率45 kHz)40 min，静置冷却后再称定重量，用70%甲醇补足减失的重量，摇匀，过滤，置4 ℃冰箱保存待测。检测时用0.45 μm微孔滤膜滤过。 1.3 测定项目及分析方法

1.3.1 线性关系考察 取1.2.2节下配制的混合标准品溶液，分别进样3、6、9、12、15 μL，按1.2.1节下方法测定，以峰面积(Y)为纵坐标，标准品质量(X)为横坐标，绘制各标准品标准曲线。

1.3.2 专属性考察 分别取1.2.2节下混合标准品溶液和1.2.3节下滁菊样品溶液10 μL进样，测定标准品溶液各成分保留时间、滁菊样品溶液中绿原酸、木犀