指 。
20．当外界因素（介质的pH＞pI、电场电压、介质中离子强度、温度等）确定后，决定蛋白质在电场中泳动速度快慢的主要因素是 和 。 二、选择填空题
1．侧链含有咪唑基的氨基酸是（ ）
A、甲硫氨酸 B、半胱氨酸 C、精氨酸 D、组氨酸 2．PH为8时，荷正电的氨基酸为（ ）
A、Glu B、Lys C、Ser D、Asn 3．精氨酸的Pk1=2.17、Pk2=9.04（a-NH3）Pk3=12.48（胍基）PI=（ ） A、1/2(2.17+9.04) B、1/2(2.17+12.48)
C、1/2(9.04+12,48) D、1/3（2.17+9。04+12。48） 4．谷氨酸的Pk1=2.19(a-COOH)、pk2=9.67(a-NH3)、pk3=4.25(g-COOH) pl=（ ） A、1/2（2.19+9。67） B、1/2（9.67+4.25） C、1/2(2.19+4.25) D、1/3(2.17+9.04+9.67) 5．氨基酸不具有的化学反应是（ ）
A、肼反应 B、异硫氰酸苯酯反应 C、茚三酮反应 D、双缩脲反应 6．当层析系统为正丁醇∶冰醋酸∶水=4∶1∶5时，用纸层析法分离苯丙氨酸（F）、丙氨酸（A）和苏氨酸（T）时则它们的Rf值之间关系应为：（ ）
A、F＞A＞T B、F＞T＞A C、A＞F＞T D、T＞A＞F 7．氨基酸与亚硝酸反应所释放的N2气中，氨基酸的贡献是（ ）
A、25% B、50% C、80% D、100% 8．寡肽或多肽测序时下列试剂中最好的是（ ）
A、2，4-二硝基氟苯 B、肼 C、异硫氰酸苯酸 D、丹酰氯 9．下列叙述中不属于蛋白质一般结构内容的是（ ） A、多肽链中氨基酸残基的种类、数目、排列次序 B、多肽链中氨基酸残基的键链方式 C、多肽链中主肽链的空间走向，如a-螺旋
D、胰岛分子中A链与B链间含有两条二硫键，分别是A7-S-S-B7，A20-S-S-B19 10．下列叙述中哪项有误（ ）
A、蛋白质多肽链中氨基酸残基的种类、数目、排列次序在决定它的二级结构、三级结构乃至四级结构中起重要作用
B、主肽链的折叠单位～肽平面之间相关一个Ca碳原子
C、蛋白质变性过程中空间结构和一级结构被破坏，因而丧失了原有生物活性 D、维持蛋白质三维结构的次级键有氢键、盐键、二硫键、疏水力和范德华力 11．蛋白质变性过程中与下列哪项无关（ ）
A、理化因素致使氢键破坏 B、疏水作用破坏
C、蛋白质空间结构破坏 D、蛋白质一级结构破坏，分子量变小 12．加入下列试剂不会导致蛋白质变性的是（ ）
A、尿素（脲） B、盐酸胍 C、十二烷基磺酸SDS D、硫酸铵 13．血红蛋白的氧合动力学曲线呈S形，这是由于（ ） A、氧可氧化Fe（Ⅱ），使之变为Fe（Ⅲ）
B、第一个亚基氧合后构象变化，引起其余亚基氧合能力增强
C、这是变构效应的显著特点，它有利于血红蛋白质执行输氧功能的发挥 D、亚基空间构象靠次级键维持，而亚基之间靠次级键缔合，构象易变 14．下列因素中主要影响蛋白质a-螺旋形成的是（ ）
A、碱性氨基酸的相近排列 B、酸性氨基酸的相近排列 C、脯氨酸的存在 D、甘氨酸的存在 15．蛋白质中多肽链形成a-螺旋时，主要靠哪种次级键维持（ ）
A、疏水键 B、肽键 C、氢键 D、二硫键
16．关于蛋白质结构的叙述，哪项不恰当（ ）
A、胰岛素分子是由两条肽链构成，所以它是多亚基蛋白，具有四级结构 B、蛋白质基本结构（一级结构）中本身包含有高级结构的信息，所以在生物 体系中，它具有特定的三维结构
C、非级性氨基酸侧链的疏水性基团，避开水相，相互聚集的倾向，对多肽链 在二级结构基础上按一定方式进一步折叠起着重要作用
D、亚基间的空间排布是四级结构的内容，亚基间是非共价缔合的 17．有关亚基的描述，哪一项不恰当（ ） A、每种亚基都有各自的三维结构
B、亚基内除肽键外还可能会有其它共价键存在 C、一个亚基（单位）只含有一条多肽链 D、亚基单位独立存在时具备原有生物活性
18．关于可溶性蛋白质三级结构的叙述，哪一项不恰当（ ） A、疏水性氨基酸残基尽可能包裹在分子内部 B、亲水性氨基酸残基尽可能位于分子内部
C、羧基、氨基、胍基等可解离基团多位于分子表面
D、苯丙氨酸、亮氨酸、异亮氨酸等残基尽可能位于分子内部 19．蛋白质三级结构形成的驱动力是（ ）
A、范德华力 B、疏水作用力 C、氢键 D、离子键 20．引起蛋白质变性原因主要是（ ）
A、三维结构破坏 B、肽键破坏 C、胶体稳定性因素被破坏 D、亚基的解聚 21．以下蛋白质中属寡聚蛋白的是（ ）
A、胰岛素 B、Rnase C、血红蛋白 D、肌红蛋白
22．下列测定蛋白质分子量的方法中，哪一种不常用（ ）
A、SDS-PAGE法 B、渗透压法 C、超离心法 D、凝胶过滤（分子筛）法
23．分子结构式为HS－CH2－CH－COO的氨基酸为（ ）
A、丝氨酸 B、苏氨酸 C、半胱氨酸 D、赖氨酸
－
24．下列氨基酸中为酪氨酸的是（ ）
25．变构效应是多亚基功能蛋白、寡聚酶及多酶复合体的作用特征，下列动力学曲线中哪种一般是别构酶（蛋白质）所表现的：（ ）
18．为什么鸡蛋清可用作铅中毒或汞中毒的解毒剂？
六、计算题
1．测得一种蛋白质分子中Trp残基占分子量的0.29%，计算该蛋白质的最低分子量（注：Trp的分子量为204Da）。
2．一种蛋白质按其重量含有1.65%亮氨酸和2.48%异亮氨酸，计算该蛋白质最低分子量。（注：两种氨基酸的分子量都是131Da）。
3．某种氨基酸a－COOHpK＝2.4，a－NH3pK＝9.6，w－NH3pK＝10.6，计算该种氨基酸的等电点（pI）。 4．某种四肽a－COOHpK＝2.4，a－NH3pK＝9.8，侧链－NH3pK＝10.6侧链－COOHpK＝4.2，试计算此种多肽的等电点（pI）是多少？
5．有一种多肽，其侧链上羧基30个（pK＝4.3），嘧唑基有10个（pK＝7），e－N＋H3（pK＝10），设C末端a－羧基pK＝3.5，N－末端氨基pK＝9.5，计算此多肽的pI。
6．已知氨基酸平均分子量为120Da。有一种多肽的分子量是15120Da，如果此多肽完全以a－螺旋形式存在，试计算此a－螺旋的长度和圈数。 答 案：
一、填空 1. 20 非极性 极性 疏水 亲水 赖 精 天 冬 2.色 苯丙 酪 3. －OH －SH －COOH N NH 4.氨基 紫红 亮黄 5.肽 氢键 二硫键 疏水作用（键） 范德华力 二硫键 6. 谷 缬 极 非极 7.异硫氰酸苯酯 从N-端依次对氨基酸进行分析鉴定 8. a-螺旋 b-折叠 b转角 无规卷曲 氢 氨基酸种类 数目排列次序 中断 9. 分子表面的水化膜 同性电荷斥力 10.溶解度最低 电场中无电泳行为 11.空间结构 二硫 氢 复性 12.正电 负电 13.谷 天冬 赖 精 细
15. b a c
二、选择填空 1.D 2.B 3.C 4.C 5.D 6.A 7.B 8.C 9.C 10.C 11.D 12.D 13.B 14.C 15.C 16.A 17.C 18.B 19.B 20.A 22.B 23.C 24.B 25.B 26.D 三、判断
题 1.× 2.√ 3.√ 4.× 5.√ 6.× 7.× 8.× 9.× 10.√ 11.× 12.√ 13.× 14.√ 15.√ 16.× 17.√ 18.√ 19.√ 20.× 21.× 22.√ 六、计算题
1.解：Trp残基MW/蛋白质MW＝0.29%，蛋白质MW＝64138Da。 2.解：异亮氨酸/亮氨酸＝2.48%/1.65%＝1.5/1＝3/2
所以，在此蛋白质中的亮氨酸至少有2个，异亮氨酸至少有3个。由此推理出： 1.65%＝2×（131－18）/蛋白质MW 答案：蛋白质MW＝13697Da。
3.答案：pI＝10.1 4.答案：pI＝7.0
5.解：要计算多肽的等电点，首先应该找到静电荷为零的分子状态。在此多肽中最多可以带有（30＋1）个单位负电荷，而正电荷最多只有（15＋10＋1）个，相差了5个电荷。要想让正负电荷数相等，只能让30个羧基（侧链－COOHpK＝4.3）少带5个负电荷（a－COOHpK＝3.5，它比侧链－COOH易于解离，难于接受质子），即在30个侧链－COOH中有25个处于解离状态（－COO－），5个不解离（－COOH）。因此：
＋
＋
＋
＋
pH＝pKa＋lg（[碱]/[酸]）＝4.3＋lg（25/5）＝5.0。
6.解：答案：肽链长度＝43.92(nm)；该蛋白质（或多肽）分子量＝14640Da
26．关于二级结构叙述哪一项不正确（ ）
A、右手a-螺旋比左手a-螺旋稳定，因为左手a-螺旋中L-构型氨基酸残基侧链 空间位阻大，不稳定；
B、一条多肽链或某多肽片断能否形成a-螺旋，以及形成的螺旋是否稳定与它 的氨基酸组成和排列顺序有极大关系；
C、多聚的异亮氨基酸R基空间位阻大，因而不能形成a-螺旋；
D、b-折叠在蛋白质中反平行式较平行式稳定，所以蛋白质中只有反平行式。 27．根据下表选出正确答案：
样品液中蛋白质的组分 A B C D 蛋白质的pI 6.2 4.5 7.8 8.3 蛋白质分子量MW(KD) 40 30 60 80 ①pH8.6条件下电泳一定时间，最靠近阳极的组分一般是（ ）； ②SephadexG100柱层析时，最先洗脱出来的组分应该是（ ）。 28．前胰岛素原信号肽的主要特征是富含下列哪类氨基酸残基（ ） A、碱性氨基酸残基 B、酸性氨基酸残基 C、羟基氨基酸残基 D、亲水性氨基酸残基 29．蛋白质三维结构的构象特征主要取决于（ ）
A、氨基酸的组成、顺序和数目 B、氢键、盐键、范德华力和疏水力 C、温度、pH和离子强度等环境条件 D、肽链间或肽链内的二硫键
30．双缩脲法测定禾谷类作物样品中的蛋白质含量时，加入少量的四氯化碳（CCl4)其主要作用是（ ）
A、促进双缩脲反应 B、消除色素类对比色的干扰 C、促进难溶性物质沉淀 D、保持反应物颜色的稳定 31．醋酸纤维薄膜电泳时，下列说法不正确的一项是（ ）
A、点样前醋酸纤维薄膜必须用纯水浸泡一定的时间，使处于湿润状态 B、以血清为样品，pH8.6条件下，点样的一端应置于电泳槽的阴极一端 C、电泳过程中保持恒定的电压（90～110V）可使蛋白质组分有效分离 D、点样量太多时,蛋白质组分相互粘联,指印谱带会严重拖尾，结果不易分析 三、是非判断（用“对”、“错”表示，并填入括号中）
1．胰岛素分子中含有两条多肽链，所以每个胰岛素分子是由两个亚基构成（ ）
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