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细菌基因组DNA快速提取试剂盒
目录号:DN11 目录编号 DN1101 DN1102 DN1103 DN1111 DN1112 DN1113
包装单位 50次 100次 200次
50次(带蛋白酶K) 100次(带蛋白酶K) 200次(带蛋白酶K)
?
适用范围:
适用于快速提取各种细菌基因组DNA ?
试剂盒组成、储存、稳定性:
保存
室温 室温 室温 室温 室温 室温 -20℃ 室温 室温
试剂盒组成
平衡液 缓冲液RB 结合液CB 抑制物去除液IR 漂洗液WB 洗脱缓冲液EB 蛋白酶K粉 (可选)20mg/ml 吸附柱AC 收集管(2ml)
50次
5 ml 30 ml 11 ml 25 ml
100次
10 ml 60ml 20 ml 50 ml
200次
20 ml 120 ml 40ml 100 ml
15 ml 25 ml 2x25 ml 第一次使用前按说明加指定量乙醇 15 ml 20mg 50个 50个
20 ml 2×20mg 100个 100个
40 ml 4×20mg 200个 200个
本试剂盒在室温储存12个月不影响使用效果。
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储存事项: 1.
结合液CB或者抑制物去除液IR低温时可能出现析出和沉淀,可以在37℃水浴几分钟帮助重新溶解,恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。 2.
为避免降低活性,方便运输,提供蛋白酶K为冻干粉状,收到后,可短暂离心后,加入1毫升灭菌水溶解,因为反复冻融可能会降低酶活性,因此溶解后立即按照每次使用量(20微升)分装冻存,-20℃保存。 3.
避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化,各溶液使用后应及时盖紧盖子。 ?
产品介绍:
独特的结合液/蛋白酶K迅速裂解细胞和灭活细胞内核酸酶,然后基因组DNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜, 再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤,抑制物去除液和漂洗液将细胞代谢物,蛋白等杂质去除, 最后低盐的洗脱缓冲液将纯净基因组DNA从硅基质膜上洗脱。 ? 1.
产品特点:
离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异极小,可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。 2. 3. 4.
不需要使用有毒的苯酚等试剂,也不需要乙醇沉淀等步骤。 快速,简捷,单个样品操作一般可在30分钟内完成。
多次柱漂洗确保高纯度,OD260/OD280典型的比值达1.7~1.9,长度可达30kb -50kb,可直接用于PCR,Southern-blot和各种酶切反应。
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? 1.
注意事项
所有的离心步骤均在室温完成,使用转速可以达到13,000rpm的传统台式离心机,如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
2. 3. 4. 5.
开始实验前根据需要将水浴预热到37℃或者70℃备用。 需要自备异丙醇。
需自备0.5M EDTA、Triton X-100和Lysozyme(溶菌酶)(用于革兰氏阳性菌)。 结合液CB 和抑制物去除液IR中含有刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套,避免沾染皮肤,眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。
6. 洗脱液EB不含有螯合剂EDTA,不影响下游酶切、连接等反应。也可以使用水洗脱,但应该确保批pH大于7.5, pH过低影响洗脱效率。用水洗脱DNA应该保存在-20℃。DNA如果需要长期保存,可以用TE缓冲液洗脱(10mM Tris-HCl, 1mM EDTA,pH 8.0),但是EDTA可能影响下游酶切反应,使用时可以适当稀释。
? 1.
关于平衡液的使用
介绍:核酸吸附硅胶膜柱子长期放置过程中会同空气中的电荷/尘埃发生反应而影响其核酸的结合能力。硅胶柱经平衡液预处理后可大大减少柱子中硅胶膜的憎水基团,提高核酸的结合能力。从而提高硅胶柱子回收效率或者产量。平衡液是强碱性溶液,若不小心碰到,请用大量自来水清洗。用完后需盖紧瓶盖,以免接触空气。室温保存。在保存过程中可能有沉淀生成,请加热至37℃使沉淀完全消失。
2. 使用方法:取一个新的硅胶膜吸附柱子装在收集管中,吸取100μl的平衡液至柱子中。13000 rpm离心1分钟,倒掉收集管中废液,将吸附柱子重新放回收集管。此时平衡液预处理柱子完毕。接后续的操作步骤。
? 操作步骤:(实验前请先阅读注意事项)
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细菌基因组DNA快速提取试剂盒操作方法及步骤说明书
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