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细菌基因组DNA快速提取试剂盒
目录号：DN11 目录编号 DN1101 DN1102 DN1103 DN1111 DN1112 DN1113
包装单位 50次 100次 200次
50次(带蛋白酶K) 100次(带蛋白酶K) 200次(带蛋白酶K)
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适用范围：
适用于快速提取各种细菌基因组DNA ?
试剂盒组成、储存、稳定性：
保存
室温 室温 室温 室温 室温 室温 -20℃ 室温 室温
试剂盒组成
平衡液 缓冲液RB 结合液CB 抑制物去除液IR 漂洗液WB 洗脱缓冲液EB 蛋白酶K粉 （可选）20mg/ml 吸附柱AC 收集管（2ml）
50次
5 ml 30 ml 11 ml 25 ml
100次
10 ml 60ml 20 ml 50 ml
200次
20 ml 120 ml 40ml 100 ml
15 ml 25 ml 2x25 ml 第一次使用前按说明加指定量乙醇 15 ml 20mg 50个 50个
20 ml 2×20mg 100个 100个
40 ml 4×20mg 200个 200个
本试剂盒在室温储存12个月不影响使用效果。
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储存事项: 1.
结合液CB或者抑制物去除液IR低温时可能出现析出和沉淀，可以在37℃水浴几分钟帮助重新溶解，恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。 2.
为避免降低活性，方便运输，提供蛋白酶K为冻干粉状，收到后，可短暂离心后，加入1毫升灭菌水溶解，因为反复冻融可能会降低酶活性，因此溶解后立即按照每次使用量(20微升)分装冻存，－20℃保存。 3.
避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。 ?
产品介绍：
独特的结合液/蛋白酶K迅速裂解细胞和灭活细胞内核酸酶，然后基因组DNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜， 再通过一系列快速的漂洗－离心的步骤，抑制物去除液和漂洗液将细胞代谢物，蛋白等杂质去除， 最后低盐的洗脱缓冲液将纯净基因组DNA从硅基质膜上洗脱。 ? 1.
产品特点：
离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜，柱与柱之间吸附量差异极小，可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。 2. 3. 4.
不需要使用有毒的苯酚等试剂，也不需要乙醇沉淀等步骤。 快速，简捷，单个样品操作一般可在30分钟内完成。
多次柱漂洗确保高纯度，OD260/OD280典型的比值达1.7～1.9，长度可达30kb -50kb，可直接用于PCR，Southern-blot和各种酶切反应。
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? 1.
注意事项
所有的离心步骤均在室温完成，使用转速可以达到13,000rpm的传统台式离心机，如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
2. 3. 4. 5.
开始实验前根据需要将水浴预热到37℃或者70℃备用。 需要自备异丙醇。
需自备0.5M EDTA、Triton X-100和Lysozyme（溶菌酶）(用于革兰氏阳性菌)。 结合液CB 和抑制物去除液IR中含有刺激性化合物，操作时要戴乳胶手套，避免沾染皮肤，眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时，要用大量清水或者生理盐水冲洗。
6. 洗脱液EB不含有螯合剂EDTA，不影响下游酶切、连接等反应。也可以使用水洗脱，但应该确保批pH大于7.5， pH过低影响洗脱效率。用水洗脱DNA应该保存在－20℃。DNA如果需要长期保存，可以用TE缓冲液洗脱（10mM Tris-HCl， 1mM EDTA，pH 8.0），但是EDTA可能影响下游酶切反应，使用时可以适当稀释。
? 1.
关于平衡液的使用
介绍：核酸吸附硅胶膜柱子长期放置过程中会同空气中的电荷/尘埃发生反应而影响其核酸的结合能力。硅胶柱经平衡液预处理后可大大减少柱子中硅胶膜的憎水基团，提高核酸的结合能力。从而提高硅胶柱子回收效率或者产量。平衡液是强碱性溶液，若不小心碰到，请用大量自来水清洗。用完后需盖紧瓶盖，以免接触空气。室温保存。在保存过程中可能有沉淀生成，请加热至37℃使沉淀完全消失。
2. 使用方法：取一个新的硅胶膜吸附柱子装在收集管中，吸取100μl的平衡液至柱子中。13000 rpm离心1分钟，倒掉收集管中废液，将吸附柱子重新放回收集管。此时平衡液预处理柱子完毕。接后续的操作步骤。
? 操作步骤：（实验前请先阅读注意事项）
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细菌基因组DNA快速提取试剂盒操作方法及步骤说明书
