分离纯化的原理及方法

1、分离纯化的原理及方法：1、根据分子大小和形状不同（凝胶过滤法。透析和超滤法、密度和梯度离心法）2、根据分子的带电性质分离（离子交换法、电泳法）3、根据分子极性大小及溶解不同进行分离（等电沉淀法、盐析法）4、根据配体特异性进行分离（亲和层析法）5、根据物质的吸附性进行分离（吸附层析法）

2、盐析用盐及条件选择：1、硫酸铵、氯化钠、硫酸钠2、盐析条件控制：ph值常被控制在被沉淀物等电点附近、温度一般控制在室温，特殊酶类在4摄氏度下、盐浓度常根据被分离物选择饱和度不同的盐。盐析法的优点：对设备要求低 安全 应用范围广、不会发生变性 3、在萃取中常用（分配系数表示平衡的两个共存相溶质浓度的关系。对互不混溶的两液相系统分配系数常为k=c1|c2

4、胃蛋白酶和胃膜素的制备：性质：淡黄色粉末 、肉类特殊气味，易溶于水吸湿性强、呈酸性、难溶于有机溶剂。用途：临床上用于消化不良、食欲不振的治疗 （自溶、过滤） （脱脂、去杂质） （浓缩、干燥） 猪胃黏膜-h2o、hcl---自溶液--三氯甲烷或乙醚------上清液---------成品 45·c--48·c 24-28h 40·c

工艺过程：a 自溶、过滤：在夹锅内预先加水100l及盐酸，加热至50·c，在搅拌加入200kg猪胃黏膜，快速搅拌使酸度均匀、保持45-48·c，消化3-4h用纱布过滤除去未消化的组织蛋白，收集滤液b 脱脂、去杂质：将滤液降温至30·c以下，静置24-28h使杂质沉淀，分出弃去，得脱脂酶液c 浓缩、干燥：取脱脂酶液，在40·c以下浓缩至原体积1/4左右，真空干燥，球磨，即得胃蛋白酶。

D-甘露醇：性质：白色针状结晶、无臭、略有甜味、不潮解、易溶于水、溶于热乙醇不溶于有机溶剂。

生化药物：是运用生理学的理论、方法。直接从生物体分离或用微生物合成或用现代生物技

术制备的一类用于预防治疗、诊断疾病的药物