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3.大肠杆菌乳糖操纵子的主要结构和阻遏蛋白的作用机制是什么？ 4.请列举出5种真核生物中存在的RNA并概括它们的功能。
5.假设你需要将一段cDNA克隆到表达载体中并转化到大肠杆菌中。cDNA的两端和载体上均有BamHI的酶切位点，你需要用BamHI切割cDNA和载体然后将它们连接在一起。下面是实验方法要求的具体步骤： a. 用BamHI处理载体DNA，然后用碱性磷酸酶去除5′端的磷酸基； b. b.用BamHI处理cDNA，然后与步骤a中得到的载体DNA混合，加入DNA聚合酶，在适当的条件下使cDNA与载体连接；
c.将步骤b的产物转入大肠杆菌感受态细胞中，培养后均匀涂在含有抗生素的琼脂培养皿上。因为表达载体中含有抗性基因，能表达抵制抗生素的酶，所以只有含有载体的大肠杆菌才可以在含有抗生素的培养皿上生长，而未被转化的细菌则因受到抗生素的抑制而死掉。你还参照实验手册做了下面四组对照： 对照一、在含有抗生素的培养皿上面涂布未被转化的（即不含有载体的）大肠杆菌感受态细胞（cellsalone）。
对照二、用未被酶切的载体直接转化大肠杆菌感受态细胞，将产物涂布在含有抗生素的培养皿上面（vectoralone）。 对照三、用BamHI酶切载体DNA后，不用碱性磷酸酶处理，不需要cDNA，直接加入DNA聚合酶，然后转化、涂板(Omitphosphatase,omitcDNA)。 对照四、除使用碱性磷酸酶外，其它与对照三相同(OmitcDNA)。 你一共做了三次实验，在第一次中所有的平板中都长出很多细菌。在第二次实验中所有的平板中都没有长细菌。在第三次实验中你得到了较好的结果，转化成功，具体克隆数见下表： 请回答下列问题： A.解释第一次实验失败的原因，并说明对照一的目的是什么； B.解释第二次实验失败的原因，并说明对照二的目的是什么； C.对照三和对照四的目的是什么？为什么实验手册上建议用碱性磷酸酶处理载体？ 2008生物化学和分子生物学试题 一、名词解释 1蛋白质变性 2SNP
3抗原与抗原决定簇 4感受态细胞 四、简答题 1组蛋白的特点 2增强子三种可能的作用机制 3基因芯片工作原理 4膜结构对细胞代谢调控的影响 5 6
五、问答题 1血红素是如何调控蛋白质合成的？（生化书下册39章） 2酶活性调节方式 3四种跨膜信号体系传导途径 4细胞凋亡与细胞坏死，检测凋亡的方法 2009年中科院生物化学与分子生物学试题 一.名题解释（5题20分）
绿色荧光蛋白RNA编辑必需脂肪酸组蛋白修饰 二.选择题（20题20分）
GST－PULLDOWN用于蛋白质之间的相互反应 绿色荧光蛋白需要Ca2+ 反向PCR求未知序列
三.判断题（30题30分） 四.简答题（6题30分）
1.鱼藤酮，抗霉素A，CO抑制呼吸链部位 2.泛素化降解3个步骤 3.主动运输的特点 4.蛋白质化学修饰
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5.凯式定氮法的原理，紫外吸收测蛋白质的原理 6.酶活力，比活力
五.论述题（5题50分）
1.试述启动子，增强子，沉默子，绝缘子的概念，功能和它们的相互作用。 2.什么是脂肪动员？为什么人们会得脂肪肝？
3.叙述核酸分子杂交的分子基础及其在分子生物学中的应用。 4.叙述两种或三种用于研究蛋白质相互作用的实验方法及原理。 5.什么是酶的活性部位，怎么解释酶作用的专一性？ 2010中科院生物化学与分子生物学试题 一名词解释（5*4=20） 1核酶 2转录 3RNA干扰 4β-氧化 5光合作用 二选择题（20） 三判断题（30） 四简答题（6*5=30） 1DNA重组的意义 2表观遗传学的概念及研究内容 3给你一个新基因，如何研究它的功能 4戊糖磷酸途径的基本过程和意义 5尿素循环过程及部位 6DNA损伤是如何形成的？生物体如何修复？有何意义？ 五问答题（5*10=50） 1逆转座子的类型和特点 2组蛋白修饰 3真核生物基因表达调控 4酶的别构调节和化学修饰不同点，调节作用方式 5蛋白质与DNA相互作用的方式主要有哪些？详述其中一种的原理和步骤 生物化学考研习题集与题解 试题解答 中科院1999年生物化学A卷 一、是非题：20题，每题1分，共20分。答“是”写“＋”，答“非”写“一”，写在题后的（）中。 题 目：1.单克隆和多克隆抗体的差别在于制备方式的不同（） 考查点： 单克隆抗体的概念。 答 案： 非，制备方式不同，其根本的区别是反应性质不同。 相关内容： 单克隆抗体的制备过程。 题 目：2．气体分子，如NO，是可以作为信号分子在生物体内行使功能的（） 考查点： 信号及信号转导。 答 案： 是，+ 相关内容： 信号转导的分类。
题 目：3．二硫键和蛋白质的三级结构密切有关，因此没有二硫键的蛋白质就只有一级和二级结构（） 考查点： 蛋白质的结构层次。 答 案： 非，—
相关内容： 结构域，单体蛋白（由几个独立的肽段以S-S连接的小分子蛋白）。 题 目：4．所有信号肽的位置均在新生肽的N端（） 考查点： 信号肽学说。 答 案： 非，—
相关内容： 蛋白质修饰及转运。
题 目：5．对于可逆性抑制剂的抑制作用，抑制50％时的抑制剂浓度等于其抑制解离常数Ki （）
考查点： 可逆抑制（竞争性抑制、非竞争性抑制）。 答 案： 非，—
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相关内容： 抑制反应的米氏方程。特点。
题 目：6．在酶的催化反应中，HIS残基的咪唑基既可以起碱催化作用，也可以其酸催化作用（） 考查点： 酶催化的高效性。
课本内容： HIS残基的咪唑基，其解离常数为6。在中性条件下一半以酸性形式存在，另一半以碱性形式存在。即咪唑基既可作为质子供体，又可作为质子受体在催化中发挥作用。因此咪唑基是一个最有效最活泼的一个催化功能基团。 答 案： 是，+
相关内容： 酶催化的特点。
题 目：7．蛋白激酶对蛋白质磷酸化的部位除了Ser、Thr和Tyr外，还有His，Cys，Asp等 （ ）
考查点： 磷酸化的部位。要有-OH基团。 答 案： 非，—
相关内容： 磷酸化的概念。
题 目：8．维生素B1的化学名称为硫胺素，它的磷酸酯为脱羧辅酶（） 考查点： 维生素B1。 课本内容： 维生素B1，又称为硫胺素，广泛分布于植物中，特别是种子外皮和胚芽，与ATP作用转变为焦磷酸硫胺素（TPP），是催化丙酮酸和α-酮戊二酸脱羧的辅酶。 答 案： 是，+ 相关内容： 维生素B1的结构。 题 目：9．线粒体内膜与外膜的结构完全不同，它们是完全分开互不接触的两种膜（） 考查点： 线粒体的膜结构。 课本内容： 研究结果说明，拥有“导肽”的线粒体蛋白质运送时，可能通过内膜与外膜的接触点一步插入的。
答 案： 非，— 相关内容： 内膜与外膜的结构组成。 题 目：10．细胞色素氧化酶与细胞色素b－c1复合物的三维空间结构已经得到阐明（） 考查点： 生物化学研究进展。 答 案： 非，— 相关内容： 细胞色素氧化酶与细胞色素的作用、结构。 题 目：11．氧化磷酸化也是可逆的（） 考查点： 氧化磷酸化的概念。 课本内容： 氧化磷酸化作用是将生物氧化过程中释放出来的能量（自由能）转移而使ADP形成高能ATP的作用。全过程的方程式为：NADH+H++3ADP+3Pi+1/2O2→NAD++4H2O+3ATP 答 案： 是，+ 相关内容： 氧化磷酸化的分类。 题 目：12．嗜盐菌视紫红蛋白与视网膜视紫红蛋白不同，前者经光照后导致跨膜质子梯度，后者经光照后导致跨膜钠离子流动（） 考查点： 视紫红蛋白。 答 案： 是，+ 相关内容： 质子势能。 题 目：13．端粒酶（telomerase）是一种反转录酶（） 考查点： 端粒酶的性质。
课本内容： 每条染色体末端进化形成了端粒DNA序列及能够识别和结合端粒序列的蛋白质，这一种核糖核蛋白由RNA和蛋白质组成，称为端粒酶。具有逆转录酶的性质，其中RNA是富含G序列的模板，因此可以弯过来作为引物复制5’末端。 答 案： 是，+
题 目：14．转录不需要引物，而反转录必需有引物（） 考查点： 转录与反转录
课本内容： 反转录酶催化的DNA合成反应要求有模板和引物，以四种脱氧核苷三磷酸作为底物，此外，还需要适当的阳离子（Mg2+、Mn2+）和还原剂（以保护酶蛋白中的巯基）DNA链的延长方向为5’→3’。
RNA聚合酶需要以四种核苷三磷酸作为底物，并需要适当的DNA作为模板，Mg2+能促进聚合反应，RNA链的延长方向为5’→3’，反应是可逆的，但焦磷酸的水解可推动反应趋向聚合。 答 案： 是，+
相关内容： DNA的复制过程。
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题 目：IS．DNA复制时，前导链合成方向是5’→3’，后随链则是3’→5’生成（） 考查点： 前导链与滞后链。
课本内容： 以复制叉向前移动的方向为标准，一条模板链是3’→5’走向，在其上DNA能以5’→3’方向连续合成，称前导链。另一条模板链是5’→3’走向，在其上DNA合成也是以5’→3’方向，但与复制叉移动的方向正好相反，所以，随着复制叉移动形成许多不连续的片段，最后连成一条完整的DNA链，称滞后链。 答 案： 非，—
相关内容： 冈崎片段的概念及其大小变化。
题 目：16．人基因组的碱基对数目为2．9X10^9，是自然界中最大的（） 考查点： 基因组的概念。
课本内容： 哺乳动物（包括人类）的C值均为109数量级（人为2.9X109），人们很难置信两栖类动物的基因组的和功能会比哺乳动物更复杂。 答 案： 非，—
相关内容： C值概念与C值矛盾。
题 目：17．细胞器DNA的复制并不限于S期，可在细胞周期的各期中进行（） 考查点： 细胞器的增殖。 答 案： 非，— 题 目：18．基因转录的终止信号应位于被转录的序列以外的下游区（） 考查点： 转录的终止。 课本内容： 在转录过程中，RNA聚合酶沿着模板链向前移动，它只能感受正在转录的序列，而不能感受到未转录的序列，即终止信号应位于已经转录的序列中。所有原核生物的终止子在终止之前居民点有一个回文结构，其产生的RNA可形成茎环构成发荚结构，该结构可使聚合酶减慢移动或暂时停止RNA的合成。 答 案： 非，— 相关内容： 转录全过程与转录因子。 题 目：19．真核生物细胞核内的不均一RNA（hnRNA）分子量虽然不均一，但其半衰期长，比胞质成熟mRNA更为稳定（） 考查点： hnRNA的概念，特性。 课本内容： 真核生物mRNA的原初转录产物是分子量极大的前体，在核内加工过程中形成分子大小不等的中间物称hnRNA。 hnRNA的碱基组成与总的DNA的组成类似，因此，又称为类似DNA的RNA（D-RNA），它们在核内迅速合成又迅速降解，其半衰期短，比胞质成熟mRNA更不稳定。 不同细胞类型的hnRNA半衰期不同，一般在几分钟至1小时左右，而胞质成熟mRNA的半衰期一般在1——10小时，神经细胞的mRNA的半衰期最长，可达数年。 答 案： 非，— 相关内容： 真核mRNA前体（hnRNA）的加工。 题 目：20．DNA复制是在起始阶段进行控制的，一旦复制开始，它即进行下去，直到整个复制子完成复制（）
考查点： DNA复制的调控。 课本内容： 基因组能独立进行复制的单位称复制子（replicon）。每个复制子都含控制复制起始的起点（origin），可能还会有终止复制的终点（termionus）。复制是在其实阶段进行控制的，一旦开始，它即继续下去，直至整个复制子完成复制。 答 案： 是，+ 相关内容： 转录、翻译的调控。
二、选择题：25题，每题回分，共25分。请将选择答案的号码填人（）中。 题 目：1．生长调节素（omtomedin）是：（）
（1）胰岛素 （2）生长激素 （3）胰岛素样生长激素1和H （4）表皮生长因子 考查点： 生长调节素的概念。 课本内容： 答 案：
题 目：2．生物体内氨的转运主要通过：（）
（1）尿素循环 （2）谷氨酰胺 （3）尿酸 考查点： 氨的转运、尿素循环。
课本内容： 谷氨酰胺是中性的无毒物质，容易透过细胞膜。是氨的主要转运形式。 答 案： （2）谷氨酰胺
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题 目：3．识别信号肽的是一种信号识别颗粒，它是：（）
（1）糖蛋白 （2）信号肽酶 （3）脂蛋白 （4）核蛋白
考查点： 信号肽引导的蛋白质转运。
课本内容： 信号识别颗粒（SRP）是一种核糖核酸蛋白复合体，它能识别正在合成并将通过内质网膜的蛋白质的自由核糖体，它与这类核糖体的信号肽结合后，肽链合成暂时终止，SRP对于正在合成的其它蛋白质无影响。
答 案： （4）核蛋白
题 目：4．微管蛋白的异二聚体上的结合位点是：（）
（1）GTP （2）ATP （3）cAMP （4）ADP 考查点： 微管蛋白的成分、结构。
课本内容： α-微管蛋白和β-微管蛋白形成的微管蛋白异二聚体，是微管装配的基本单位，微管蛋白异二聚体含有GTP的两个结合位点，二价阳离子亦能结合于微管蛋白二聚体上。 答 案： （1）GTP 题 目：5．基因剔除（knockout）的方法主要是用来阐明：（） （1）基因的结构 （2）基因的调控 （3）基因的表达 （4）基因的功能
考查点： 基因剔除的概念 答 案： （4）基因的功能 相关内容： 基因的研究方法分类。 题 目：6．胰凝乳蛋白酶的活性中心中构成一个电荷中继网的三个氨基酸残基是：（） （1）HIS，Arg，Glu （2）Ser，Lys，Asp （4）Ser，Arg，Glu 考查点： 胰凝乳蛋白酶的结构。 课本内容： 胰凝乳蛋白酶（chymotrypsin）是研究得最早最彻底的一个酶，它的活性中心由Ser105、His57、Asp102组成，分子量为25000。 答 案： （3）Ser，His，Asp 题 目：7．MWC模型和KNF模型的一个区别是：（） （1）MWC模型可以解释正协同性，而KNF模型不能 （2）MWC模型可以解释负协同性，而KNF模型不能 （3）MWC模型不能解释正协同性，而KNF模型能 （4）MWC模型不能解释负协同性，而KNF模型能 考查点： 别构酶调节酶活性的机理。 课本内容： 序变模型（KNF模型）主张酶分子中的亚基结合小分子物质（底物或调节物）后，亚基的构象逐个变化。因此，亚基有各种可能的构象状态。当底物（或正调节物）浓度上升，升到可与其中一个亚基牢固地结合时，这时，剩下的亚基就会改变构象，形成一个有活性的四聚体，给出S形动力学曲线。 在序变模型中，既有正调节物分子的作用，又有负调节物分子的作用，第二种分子与酶的结合，可能比第一种分子与酶的结合更紧密些，也可能更松散些。这取决于第一种分子结合所引起的形变。 齐变模型（MWC模型）主张别构酶所有的亚基或者全部是坚固紧密的，不利于结合底物的“T”状态，或者全部是松散的，利于结合底物的“R”状态。这两种状态间的转变对每个亚基都是同步的，齐步发生的，“T”状态中的亚基的排列是对称的，变为R状态后，蛋白亚基的排列仍然是对称的。 正调节物（如底物）与负调节物的浓度比例决定别构酶究竟处于何种状态。当无小分子调节物存在时，平衡趋向于“T”状态；当有少量底物时，平衡即向R状态移动，当构象转变为“R”状态后，又进一步增加了对底物的亲和性，给出了S形动力学曲线。
目前认为，齐变模型不适用于负协调效应。
答 案： （4）MWC模型不能解释负协同性，而KNF模型能 题 目：8．琥珀酸脱氢酶所需的辅酶（基）是：（）
（1）CoA （2）FAD （3）NAD+ （4）NADP+ 考查点： TCA循环。
课本内容： 琥珀酸脱氢酶是TCA循环中唯一结合在线粒体内膜上并直接与呼吸链联系的酶。此酶为含铁的黄素蛋白酶，除含FAD辅基外，还含有酸不稳定的硫原子和非血红素铁，也称铁硫蛋白。 答 案： （2）FAD
题 目：9．对于一个遵守米氏方程的酶，当活性达到最大反应速度的99％时，底物浓度是其Km值的倍数为：（）
历年各高校生物化学考研真题
