DNA测序仪原理及应用 - 图文

DNA测序仪的原理及应用

上海交通大学分析测试中心

侯敬丽

内容

?DNA测序原理

?CEQ8000 DNA测序仪?基因测序系统的应用

引

–基因组DNA: 染色体

–质粒DNA: 细菌细胞

–线粒体DNA:胞浆–人工染色体DNA: BAC YAC–

cDNA

双脱氧链末端终止法

1977年，Sanger等人发展建立起来的一种DNA测序方法。基本原理：

双脱氧链末端终止法通过使用链终止剂—类似于正常dNTP的2’,3’-双脱氧核苷三磷酸(ddNTP)，将延伸的DNA链特异性地终止。其反应体系也包括单链模板、引物、4种dNTP和DNA聚合酶。共分四组，每组按一定比例加入一种(ddNTP)，它能随机渗入合成的DNA链，一旦渗入合成即终止，于是各种不同大小片段的末端核苷酸必定为该种核苷酸，可以从放射自显影带上直接阅读DNA的核苷酸序列。

双脱氧链末端终止法测序基本原理示意