第二十六章 螺旋体及检验
本章内容 一、概述 二、疏螺旋体属 (一)伯氏疏螺旋体 (二)回归热螺旋体 (三)奋森螺旋体 三、钩端螺旋体 四、密螺旋体属 梅毒螺旋体 一、概述
螺旋体是一类细长、柔软、弯曲呈螺旋状,运动活泼的原核细胞型微生物。 基本结构与细菌相似:
原浆柱=细菌菌体,由细胞壁,胞质膜及胞质内容物组成,胞质中含有核质(原始核); 中轴丝=螺旋体的运动器官; 外膜=细菌荚膜相当。
螺旋体革兰染色阴性,但着色较困难。
以二分裂方式繁殖,对抗生素敏感。螺旋体所致疾病主要有性传播疾病和自然疫源性疾病。 螺旋体科有8个属,其中致病性螺旋体主要有3个属:疏螺旋体属,钩端螺旋体属,密螺旋体属。
二、疏螺旋体属 又称包柔螺旋体属。
螺旋稀疏,有3~10个螺旋,不规则呈波纹状,运动活泼。 对人致病的主要有伯氏疏螺旋体、回归热螺旋体和奋森螺旋体。
(一)伯氏疏螺旋体 生物学特性
形态:螺旋稀疏,运动活泼。
染色:G,不易着色。Giemsa染色呈紫红色,Wright染色呈棕红色。 培养特性
营养要求:高,需长链饱和与不饱和脂肪酸、葡萄糖、氨基酸和牛血清蛋白等。 气体环境:微需氧,5%~10%CO2促进生长; 温度环境:适宜温度35℃;
菌落特征:生长慢;液体培养基中需培养2~3周可观察到生长情况。 微生物检验
标本采集:早期取皮损组织、淋巴结抽出液、血液、关节滑膜液、脑脊液和尿液等。 形态学检查:染色镜检;暗视野显微镜观察标本中螺旋体的形态和运动。
第 1 页 共 7 页
-
分离培养:改良的Kelly(BSK)培养基,33~35℃孵育。 抗体检测:间接免疫荧光法、ELISA、免疫印迹技术。 核酸检测:PCR 动物实验 致病性及临床意义 莱姆病的病原体。
自然疫源性传染病。储存宿主主要是野生或驯养的哺乳动物。主要传播媒介是硬蜱,叮咬部位出现移形性红斑。未经治疗者发展至晚期主要表现为慢性关节炎、慢性神经系统或皮肤异常。 (二)回归热螺旋体
回归热是一种由节肢动物传播的、有周期性反复发作的急性传染病。 引起该病的疏螺旋体有两种:回归热螺旋体,以虱为传播媒介,引起流行性回归热;赫姆疏螺旋体,以蜱为传播媒介,引起地方性回归热。 (三)奋森螺旋体
革兰染色阴性,专性厌氧。 常与梭杆菌寄生于人类口腔牙龈部。一般不致病,只有当人体抵抗力显著降低时,这两种菌大量繁殖,协同引起咽峡炎、牙龈炎、溃疡性口腔炎等。
三、钩端螺旋体 生物学特性
形态:细长丝状圆柱形,螺旋盘绕细密而规则;在暗视野显微镜下,似细小珍珠排列成的细链,一端或两端弯曲成钩状。运动活泼,沿长轴作旋转、扭转及菌体伸缩匍匐状运动,因而常使菌体呈C、S、8等字形。
染色:G,不易着色。常用镀银染色法及荧光抗体染色法。Fontana镀银染色法染成深褐色。 -
培养特性 营养要求:较高; 气体环境:需氧;
温度环境:28~30℃;pH7.2~7.4,低于6.5、高于8.4生长不良。 菌落特征:
液体培养基:表面1cm内的部位生长最佳,28℃培养1周左右,呈半透明云雾状混浊。 含有兔血清(如Korthof培养基)和含白蛋白、脂肪酸的培养基:28℃培养2周后形成菌落。 抵抗力
耐冷,不耐热和干燥。对化学消毒剂极敏感。对青霉素、金霉素及庆大霉素极敏感,但对磺胺类药物
第 2 页 共 7 页
耐药。 微生物检验
标本采集:从临床标本、携带者和自然界的水中分离获得。发病1周内血液的阳性率高,1周后尿和脑脊液等的阳性率高。 形态学检查 分离培养
抗体检测:间接免疫荧光法、ELISA、免疫印迹技术。 核酸检测:PCR。 动物实验 致病性及临床意义
钩体病是一种典型的人、畜共患性疾病及自然疫源性疾病。临床常见的有黄疸出血型、流感伤寒型、肺出血型、脑膜脑炎型、肾功能衰竭型、胃肠炎型等。
鼠类和猪是最常见的储存宿主。钩体在感染动物的肾中长期存在,持续随尿排出,污染水源和土壤,人类主要感染途径是接触了疫水。
四、密螺旋体属
螺旋细密,有8~14个规则的螺旋,两端尖。
分致病性和非致病性两大类。对人致病的密螺旋体有苍白密螺旋体和品他密螺旋体两个种。苍白螺旋体又分为3个亚种:苍白亚种、地方亚种和极细亚种,它们分别引起人类梅毒、地方性梅毒和雅司病等。 梅毒螺旋体——生物学特性 形态与结构
形态:密螺旋体,菌体纤细,两端尖直,有8~15个呈锐角弯曲而规则的螺旋;在暗视野显微镜下观察,运动活泼,方式有蜿蜒前进,沿纵轴旋转或前后移行。
染色:不易着色,常用Fontana镀银染色法,染成棕褐色,菌体变粗易于查见。
培养特性
不能在人工培养基上生长繁殖。 抗原
特异性抗原:表面特异性抗原具属特异性,无种特异性。 类属抗原:可刺激机体产生沉淀素抗体或补体结合抗体。 抵抗力:
抵抗力极弱。对温度和干燥特别敏感。离体在外环境中1~2h即死亡。对常用化学消毒剂亦敏感。对青霉素、四环素、红霉素、庆大霉素均敏感。 梅毒螺旋体——微生物检验
标本采集:一期梅毒取硬下疳渗出液,二期梅毒取梅毒疹渗出液。 形态学检查:暗视野显微镜 核酸检测:PCR 血清学检测:
1)非密螺旋体抗原试验:多用牛心类脂质作为抗原,测定患者血清中的反应素(抗脂质抗体)。为非第 3 页 共 7 页
特异性试验。 ①性病研究实验室试验(VDRL);②快速血浆反应素试验(RPR);③不加热血清反应素试验(USR)。 2)密螺旋体抗原试验:特异性试验。 ①荧光密螺旋体抗体吸附试验(FTA-ABS);②抗梅毒螺旋体抗体的微量血凝试验(MHA-TP);③ELISA;④免疫印迹试验。
梅毒螺旋体——致病性及临床意义
梅毒是由梅毒螺旋体引起的慢性传染病。可分为后天性梅毒(性接触或输血)和先天性梅毒(母婴胎盘)两种。
性耳聋等。
病原体 特征 ①沙眼衣原体 ·能通过细菌滤器 ①沙眼、泌尿生殖道感染 ②非典型肺炎 ③呼吸道感染 ②鹦鹉热·细胞内专性寄生 衣原体 ·有独特发育周期 ③肺炎衣·细胞壁缺乏肽聚糖 原体 ①斑疹伤寒立克次体 ②恙虫病·大多专性细胞内寄生 立克次体 ·对多种抗生素敏感 ③贝纳柯-·G,不易着色;吉姆萨染色、克斯体 Macchiavello染色、Gimenez染色 ④埃立克体 ⑤汉赛巴通体 ①放线菌属 ②诺卡菌属 ①肺炎支原体 原体 原体 ④穿通支·无细胞壁 生物 -
先天性梅毒可引起胎儿的全身性感染,导致流产和死胎。若能出生,也会出现锯齿形牙、鞍鼻和神经
所致疾病 传播途径 ①接触传播 ②人禽共患空气传播 ③空气传播 ①地方性斑疹伤寒 ②恙虫病 ③Q热 ④埃立克体病 ⑤人类杆菌性血管瘤-杆菌性紫癜和猫爪病 ①啮齿类动物储存宿主,传播媒介鼠蚤或鼠虱 ②恙螨幼虫叮咬 ③不借助于节肢动物传播 ·分枝状生长G杆菌 ·抗酸染色阴性或弱阳性 ·脓性分泌物中含有硫黄颗粒 +①软组织化脓性感染,放线菌病、瘘管 ①内源性感染 ②原发性、化脓性肺②外源性感染 部感染、足分枝菌病。 ①原发性非典型肺炎 ②生殖道及新生儿感染 ③泌尿生殖道及新生儿感染 ④加速AIDS进程 ①飞沫传播 ②性行为传播和垂直传播 ③接触传播 ②解脲脲·人工培养基上生长繁殖的最小原核微③人型支·G不易着色,吉姆萨染色淡紫色 ·“荷包蛋”样菌落 第 4 页 共 7 页
原体 ①伯氏疏螺旋体 ②回归热螺旋体 ③钩端螺旋体 ④梅毒螺旋体
莱姆病的传播媒介是 A.蚊 B.蜱 C.鼠蚤 D.人虱 E.恙螨
『正确答案』B
『答案解析』莱姆病的传播媒介是蜱。
钩端螺旋体属的特点是 A.螺旋疏而规则 B.螺旋疏而不规则
C.螺旋密而规则且一端或两端成钩 D.螺旋密而不规则且一端或两端成钩 E.螺旋疏且一端或两端成钩
『正确答案』C
『答案解析』钩端螺旋体属螺旋密而规则且一端或两端成钩。
关于钩体的染色性,下列哪项是正确的 A.革兰阳性 B.抗酸阳性 C.镀银棕褐色 D.墨汁不着色 E.Giemsa红色
『正确答案』C
『答案解析』钩体镀银染色呈棕褐色。
钩端螺旋体的培养特性中,哪一项是错误的 A.生长缓慢
B.常用Korthof培养基 C.培养基中需加血清 D.最适生长温度为37℃ E.最适pH7.2~7.6
『正确答案』D
『答案解析』钩端螺旋体最适生长温度为28℃。
第 5 页 共 7 页
①储存宿主哺乳动物,传播媒介是硬蜱 ·螺旋状,运动活泼 ·G不易着色;Giemsa染色、Wright染色、镀银染色法及荧光抗体染色法 -①莱姆病 ②回归热 ③钩体病 ④梅毒 ②节肢动物传播 ③鼠类和猪是储存宿主。接触被排泄物污染的疫水传染 ④人是唯一宿主,性接触传播后垂直传播