白芍总甙对免疫系统的影响
扬州医学院药理学教研室 王兴旺 陈敏珠* 徐叔云*
摘要 白芍总甙(TGP)对羊红细胞免疫的小鼠脾淋巴细胞体外诱生溶血素(IgM)抗体和刀豆素A诱导小鼠脾淋巴细胞体外增殖反应均呈现低浓度(<0.4μg/ml)促进和高浓度(>0.4μg/ml)抑制的双向调节作用。TGP(5mg/kg,ip)可明显促进辐照加输注受训胸腺细胞体内诱导抗原特异性Th细胞。以上结果提示,TGP对免疫系统的影响有明显的浓度与机能依赖性特征。
主题词 免疫性;抗体;淋巴细胞
白芍是毛茛科植物芍药(paeonia lactiflora pall,栽培种)的干燥根。据《别录》记载:白芍“通顺血脉,缓中,散恶血,逐贼血……,”可治“时行寒热,中恶腹痛”,因而广泛用于各种方剂。白芍总甙(total glucosides of paeony,TGP)的主要成分为芍药甙(paeoniflorin)。已有的研究表明,TGP可使环磷酰胺增高或降低的细胞或体液免疫恢复正常[1],这一作用与其调整Th/TS细胞比值有关[2]。TGP可明显促进特异性TS细胞的诱生,并拮抗环磷酰胺对TS细胞的选择性抑制作用[3]。本文通过体内、外实验,进一步观察TGP对免疫系统的影响。
材料与方法
1.动物
C57BL/6J小鼠,安徽医科大学动物科提供,雄性,8-12周龄。
2.药品与试剂
TGP,安徽医科大学临床药理研究所植化室提取。体内实验,临用前以3%乙醇生理盐水配制;体外实验,临用前按1:1(g:ml)以无水乙醇溶解,再用培养液配制成所需浓度。刀豆素A(Con A),美国Sigma公司产品。Hepes,中国科学院上海生物化学研究所产品,批号8412166。RPMI1640培养基,
3H-TdR,中国科学院上海原子核研究所产品。美国Gibco公司产品。抗L3T4(针对小鼠Th/i细胞)和抗
Lyt-2(针对小鼠TS/c细胞)单克隆抗体和FITC-兔抗大鼠IgG,北京医科大学免疫室提供。
3.体外抗体诱生 采用培养板法[4]。
4.T淋巴细胞体外增殖反应 采用3H-TdR参入法[5]。
5.T淋巴细胞亚群计数 采用单克隆抗体间接免疫荧光法[2]。
6.特异性Th细胞的体内诱导与功能检测 采用辐照加输注受训胸腺细胞法和过继性转移系统[6]。实验分为供体鼠和受体鼠。用800R60Co照射供体鼠。照射后24小时内给该供体鼠静脉注射同系小鼠胸腺细胞1×108/鼠和羊红细胞2×106/鼠。第8天将供体鼠脾细胞4×107/鼠经静脉过继转移给同系受体鼠,该受体鼠同时腹腔注射10%羊红细胞0.2ml/鼠致敏。致敏后第5天用定量溶血分光光度法[7]测定受体鼠脾细胞溶血素(IgM)含量,用间接免疫荧光法检测受体鼠T淋巴细胞亚群数目。
7.数据处理 计量资料采用t检验,计数资料采用u检验,所有数据均以x±SD表示。
实验结果
1. 对小鼠脾淋巴细胞体外诱生抗体的影响
实验分为溶媒对照组和TGP组。图1结果表明,TGP(0.1-0.4μg/ml)可浓度依赖性地增加小鼠脾淋巴细胞体外产生IgM/0.4μg/ml达峰值,其后随浓度(0.4-3.2μg/ml)增高,IgM含量呈浓度依赖性地降低,量效曲线呈钟罩形趋势。提示TGP对小鼠脾淋巴细胞体外诱生抗体有低浓度促进和高浓度抑制的双向调节作用。
表1 白芍总甙对特异性Th细胞数的影响
供 体 鼠
组别
n
正常组 溶媒组 用药组
8 8 8
剂量(mg/kg)
-2-+7 -2-+7 时间天
n 6 6 6
L3L4+(%) 87.6±3.5* 92.6±2.8 97.3±1.1*
受 体 鼠
Lyt-2+(%) 80.9±1.4 78.5±2.1 76.8±3.2
L3L4+/Lyt-2+ 1.08±0.02* 1.18±0.04 1.27±0.09*
溶血素(OD) 0.46±0.12* 0.66±0.14 0.92±0.15*
注:*P<0.05(与溶媒组比较)
图1TGP对小鼠脾淋巴细胞体外诱生抗SRBC抗体的影响(n=8, x±SD)*P<0.05(与溶媒组比较)
2. 对刀豆素A诱导的小鼠脾淋巴细胞体外增殖反应的影响
实验随机分为溶媒对照组和用药组。图2结果表明,TGP(0.05-0.4μg/ml)可浓度依赖性地促进刀豆素A体外诱生脾淋巴细胞增殖反应,但其后随浓度(0.4-1.6μg/ml)增高而减弱,量效曲线亦呈钟罩形。提示TGP对小鼠脾淋巴细胞增殖反应亦呈现浓度依赖性双向调节作用。
图2TGP对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响 (n=8,x±SD)*P<0.05(与溶媒组比较)
3. 对体内诱生小鼠特异性Th细胞的作用
表1结果表明,TGP(5mg/kg,ip)组受体鼠脾细胞溶血素水平明显高于溶媒对照组,L3T4+细胞数目亦明显增加,从而使L3T4+/Lyt-2+细胞比值明显增高。提示,TGP对特异性Th细胞的诱生有明显促进作用。 讨论
TGP对羊红细胞体外诱生小鼠脾淋巴细胞产生IgM抗体和刀豆素A体外诱导小鼠脾淋巴细胞增殖反应呈现低浓度促进和高浓度抑制的双向调节作用。表明TGP对免疫系统调控作用有明显的浓度依赖性特征,提示在TGP临床应用中应特别注意给药剂量对药物作用的影响,否则就有可能适得其反。
本文用800R60Co全身照身小鼠,照射后24小时内将低剂量羊红细胞与同系小鼠胸腺细胞混合,使胸腺细胞受训,并经静脉一起注入受照鼠,可重建以Th细胞为主的T细胞系统。TGP可使上述方法诱导的L3T4+细胞数目进一步增多,从而使L3T4+/Lyt-2+细胞比值明显增高。提示TGP可增加特
异性Th细胞数目并提高其活性。TGP的这一作用可能与其恢复环磷胺降低的细胞或体液免疫功能有关,确切机理有待深入探讨。
参考文献
1.魏文树,等。白芍总甙对免疫应答的调控作用。中国药理学通报 1987;3:148
2.王兴旺,等。白芍总甙调节小鼠免疫功能的机理。中国药理学通报 1990;6:363
3.王兴旺,等。白芍总甙对小鼠抑制性T细胞的作用。中国免疫学杂志 1990;6:243
4.王兴旺,等。培养权法体外诱生抗体。上海免学杂志 1981;(印刷中)。
5.Thorpe PE,et al.Microplete culture of mouse lymph node cells. J Immunol Methods 1974;5:387.
6.Schreier MH.B-cell precusor specific to sheep erythrocytes. J Exp Med 1978;148:1612
7.Simpson NA,et al.Spectrophotometric determinaton of lymphocyte mediated sheep red blocd cell hemolysis in vitro. J Immunol Methods 1978;21:159
白芍总甙对免疫系统的影响
![](/skin/haowen/images/icon_star.png)
![](/skin/haowen/images/icon_star.png)
![](/skin/haowen/images/icon_star.png)
![](/skin/haowen/images/icon_star.png)