美洛昔康改善慢性应激大鼠抑郁行为的机制初探

美洛昔康改善慢性应激大鼠抑郁行为的机制初探

匡胜男，罗 映，田小燕，张 璐，杨 洋，杨俊卿

【摘 要】摘要：目的 初步探讨美洛昔康对慢性应激大鼠抑郁行为的影响及其机制。方法 采用42 d慢性温和不可预知的刺激方法建立大鼠抑郁模型，美洛昔康(1、3 mg·kg-1)和舍曲林(5 mg·kg-1)在造模开始21d后灌胃给药，每天1次，连续21d。旷场实验和强迫游泳实验检测大鼠行为学变化，酶联免疫吸附法检测大鼠皮层PGE2、TNF-α含量变化，高效液相色谱法(HPLC)分析大鼠皮层NE、DA、DOPAC、5-HIAA的含量变化，免疫组化法检测皮层5-HT1AR的表达变化。结果 与正常组比较，慢性应激大鼠在旷场实验中水平和垂直运动减少(P<0.01)，强迫游泳实验中静止不动时间延长(P<0.01)，皮层中PGE2、TNF-α含量增加(P<0.01)，NE、DA、DOPAC、5-HIAA的含量明显减少(P<0.01)，同时5-HT1AR(P<0.05)的表达减少。与模型组相比，美洛昔康能明显改善CUMS大鼠的抑郁行为，降低大鼠皮层PGE2与TNF-α含量(P<0.01)的同时增加NE、DA、DOPAC和5-HIAA含量(P<0.05或P<0.01)，上调 5-HT1AR的表达(P<0.01)。结论 美洛昔康能明显改善CUMS诱导的大鼠抑郁行为，其机制可能与其改善皮层炎症反应损伤，重建单胺递质系统平衡有关。

【期刊名称】中国药理学通报 【年(卷),期】2016(000)002 【总页数】6

【关键词】抑郁； CUMS；美洛昔康；炎症反应；细胞因子；5-HT1AR；NE；DA；DOPAC；5-HIAA

中国图书分类号：R-332；R322.81；R392.12；R749.420.5；R971.4 抑郁症是以明显而持久的心境低落为主要临床特征的心境障碍疾病。随着现代社会生活与工作的压力越来越大，抑郁症的发病率逐渐提高，预计到2020年，抑郁症将会成为继心脑血管疾病后的第二大致残性疾病[1]。目前临床的治疗手段远不能达到有效治愈的目标，多达65%的抑郁患者遭受反复发作的痛苦[2]。因此，深入探讨抑郁症的发病机制，寻找更加有效的预防策略及治疗方案成为目前关注的焦点。

严重或持久的应激对健康十分不利，尤其是慢性应激是诱发抑郁症的重要因素[3]。应激所致抑郁的发生机制非常复杂，其中免疫炎症抑郁假说提出内部炎性状态以及各种生理、心理性外部刺激等，在激活机体的免疫系统之后，提高炎症反应及氧化应激水平，从而参与调控抑郁症的发生发展过程[4]，这为抑郁症病因学提供了新方向，也开启了炎症因子拮抗剂和抗炎剂在抑郁症治疗中的实验与应用，其中环氧酶2(cyclooxygenase-2，COX-2)抑制剂备受关注。COX-2是介导炎症反应的关键酶，在炎症因子和有丝分裂原刺激下催化花生四烯酸(arachidonic acid，AA)生成前列腺素类(prostaglandins，PGs)产物，PGs通过各自特殊的G蛋白偶联受体发挥不同生物学效应[5]。迄今为止的研究指出，选择性COX-2抑制剂在抑郁症治疗中具有较高的反应率和缓解率[6]，而在和其他抑郁症治疗药物的联合运用中具有协同作用[7]。我们的前期实验[8]也发现，选择性COX-2抑制剂美洛昔康对慢性应激诱导的抑郁行为有明显的改善作用，然而，其具体机制还不明确。应激促发免疫炎症反应，使患者出现抑郁症状，动物表现出抑郁样行为，这不仅与免疫炎症诱导的细胞因子和炎症介质释放增加影响神经形成和HPA轴活化有关，还与其引起单胺类神经递质如

多巴胺(dopamine，DA)、去甲肾上腺素(norepinephrin，NE)、5-羟色胺(5-hydroxytryptamine，5-HT)等释放关系密切[9]。那么，美洛昔康改善应激大鼠抑郁行为的机制是否与皮层神经递质系统相关呢？目前还尚未见研究报道。 为此本研究采用慢性温和不可预知性应激(chronic unpredictable mild stress，CUMS)大鼠抑郁模型，在观察美洛昔康对大鼠抑郁行为改变的基础上，进一步观察其对大鼠皮层组织中PGE2、TNF-α含量，单胺类神经递质及其代谢产物NE、DA、3，4-二羟基苯乙酸(3，4-dihydroxyphenylacetic acid，DOPAC)、5-羟吲哚乙酸(5-hydroxyindoleacetic acid，5-HIAA)含量以及5-羟色胺1A 受体(5-hydroxytryptamine 1A receptor， 5-HT1AR)蛋白表达的影响，拟从炎症反应/单胺递质系统平衡方面初步探讨美洛昔康的抗抑郁作用机制。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 动物 选取清洁级♂SD大鼠50只，2月龄，体质量180~220 g，购于重庆医科大学实验动物中心，动物生产许可证编号：SCXK(渝)2012-0001。在标准的实验环境下：温度(22±2)℃，湿度(50±10)%，明暗交替各12 h。正常饮食饮水，饲养7 d以适应实验环境。

1.1.2 主要药品与试剂 美洛昔康(昆山龙灯瑞迪制药有限公司)，PGE2与TNF-α ELISA 试剂盒(武汉华美生物工程有限公司)，山羊抗大鼠多克隆5-HT1A抗体(CST，美国)，SP试剂盒与DAB染色试剂盒(北京中杉金桥生物技术有限公司)，NE、DA、DOPAC与5-HIAA标准品[西格玛奥德里奇(上海)贸易有限公司]。

1.1.3 主要仪器 无盖木制方箱，自制大鼠强迫游泳仪，-80℃超低温冰箱