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金莲花种子无菌播种及离体培养技术
作者：胡海英 李瑜
来源：《江苏农业科学》2016年第07期
摘要：通过金莲花种子无菌播种、离体培养技术的研究，初步建立金莲花离体培养的技术体系和方法，为其种质资源的保护和利用提供前期的技术基础。以金莲花种子为外植体，筛选出适宜金莲花无菌播种发芽、离体培养的培养基配方。结果表明：金莲花种子用100 mg/L GA3冷浸4 d效果最佳，其发芽率为92.67%；用无毒级杀菌消毒剂爱力克配制成 2 500 mg/L，与75%乙醇配合消毒20 min效果最佳；适宜金莲花种子无菌播种培养基配方为MS+0.1 mg/L TDZ+0.5 mg/L IBA；适宜金莲花试管苗丛生芽增殖的培养基配方为1/2MS+ 0.05 mg/L TDZ+0.5 mg/L KT+05 mg/L IBA+100 mg/L PVP+40 mg/L维生素C；适宜金莲花试管苗壮苗生长的培养基为1/2MS+0.5 mg/L NAA +40 mg/L 维生素C+100 mg/L PVP+0.5%活性炭。 关键词：金莲花；种子；无菌播种；组织培养
中图分类号： S567.23+9.043 文献标志码： A 文章编号：1002-1302（2016）07-0230-03 金莲花（Trollius chinensis Bunge.）别称旱荷、旱莲花、寒荷、陆地莲等，为毛茛科金莲花属，属于一年生或多年生草本植物，喜冷凉湿润环境，多生长在海拔1 800 m以上的高山草甸或疏林地带。金莲花在我国分布较为广泛，其主产地在河北塞罕坝上周边地区的沿坝地带，在宁夏主要零星分布于六盘山等地区。金莲花植株秀丽、花色金黄，是优良的花坛、花镜和盆花材料[1-3]；同时，金银花花朵有极高的药用价值，可入药或制茶[2-6]。目前，国内有关金莲花的研究多集中于金莲花药理成分提取、分离、鉴定和医药制剂与质量控制方面[7]，如刘丽娟等对长瓣金莲花[8]、黄文哲等对短瓣金莲花[9]的茎叶化学成分进行了研究，叶绍明等通过研究建立了关于金莲花有效成分的提取工艺体系[10]。在金莲花的人工栽培、养护管理方面，陈智卿等进行了一系列较为详尽的研究，认为通过实生播种进行金莲花种苗培育，其幼苗死亡率高达70%～80%，且幼苗期栽培管理较难，难以达到迅速培育优质种苗的目的[1-2，11]；由于金莲花的休眠特性，使其自然繁殖系数低，幼苗死亡率高。在金莲花组织培养的研究方面，国内有零星相关报道，杨玉芳等以山西金莲花种子为材料建立了金莲花离体培养体系，但是金莲花除菌环节较困难，污染严重，繁殖系数低[12]。因此，解决金莲花发育迟缓、无菌苗生长缓慢、继代不稳定等问题仍是当前重要的研究工作。本研究在药用植物组织培养研究的基础上，通过不同种类、不同浓度细胞分裂素、生长素的搭配使用，选择适宜的种子无菌播种、增殖培养的培养基配方，初步建立金莲花离体培养技术和方法，以期为金莲花种质资源保护与利用提供前期的试验支持。 1 材料与方法 1.1 材料与处理
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