液相色谱仪日常维护办法
一、介
绍
怎样确定和解决故障
解决HPLC存在的故障应该从判断故障所在开始。本手册将从五个方面帮助您快速找到故障所在。
压力异常漏液
谱图问题进样阀问题
其它由气味、现象和声音可以判断的问题。
将问题解决后，请将方法记录下来，以备将来参考。前期维护
许多液相色谱的故障通过日常维护一般都是可以避免的。例如：定期的更换柱塞杆密封可以避免柱塞杆密封的磨损以及由此产生的相关的故障。第七部分列出了很多液相色谱的常见故障以及预防措施及建议。针对特定品牌的液相色谱，这些建议需要灵活运用，这样它就可以成为实验室日常维护工作中的一部分。
其它参考资料
※参考仪器的操作手册和用户服务手册。其内容包括详细的图解、维修步骤以及需要更换的零部件的部件号。
※与有丰富维修经验的实验室工作人员联系，从他们那里得到帮助。
※与仪器厂商直接联系。大部分的仪器生产商为用户提供免费的技术支持。※Phenomenex拥有经验丰富的技术顾问，可以帮助您解决所遇到的问题。欢迎您来电或传真垂询。
※Phenomenex还提供与HPLC故障排除有关的计算机培训软件、音像资料及一套完整的HPLC用户手册。
※以下参考文献，也可以帮助您解决一些问题：
J.W.DolanandL.R.Snyder,TroubleshootingLCSystems,HumanaPress,NJ(1989).PhonomenexOrderNo.:AA0-1717
L.R.SnyderandJ.J.Kirkland,IntroductiontoMordernLiquid
Chromatography,2nded.,Wiley,NY(1979).PhenomenexOrderNo.:AA0-1700
D.J.Runser,MaintainingandTroubleshootingHPLCSystemsAUser’sGuide,Wiley,NY(1981)J.W.Dolan,“Troubleshooting”,LC/GCMagazine.Thisisamonthlydiscussion.
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二、压力异常
操作压力的变化往往是故障的征兆。从下表中找出所观察到的现象，并在右侧的列表中参考相应的解决方法。A、没有压力显示，没有流动相流动
原因解决方法
电源问题接通电源，开机保险丝被烧坏更换保险丝控制器设定不正确或设定失败a、采取恰当的设定
b、修理或更换控制器
柱塞杆折断更换柱塞杆泵头内有空气溶剂脱气、启动泵抽出空气流动相不足a、补充流动相
b、更换入口滤头
单向阀损坏更换单向阀漏液拧紧或更换手紧接头B、流动相流动正常，但没有压力显示
原因解决方法
仪表损坏更换仪表压力传感器损坏更换压力传感器C、压力持续偏高
原因解决方法
流速设定过高调整流速设定柱前筛板堵塞a、在允许情况下反冲色谱柱
b、更换筛板c、更换色谱柱
流动相使用不当或缓冲盐的结晶沉a、使用恰当的流动相淀b、冲洗色谱柱色谱柱选择不当选择恰当的色谱柱进样阀损坏清洗或更换进样阀柱温过低提高温度控制器失常修理或更换控制器保护柱阻塞清洗或更换保护柱在线过滤器阻塞清洗或更换在线过滤器D、压力持续偏低
原因解决方法
流速设定过低调整流速系统漏液确定漏液位置并维修色谱柱选择不当选择恰当的色谱柱柱温过高降低温度控制器失常维修或更换控制器E、压力不断上升
原因解决方法
见列表C见列表CF、压力降为零
原因解决方法
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见列表A、B
G、压力不断下降，但不回零
原因
见列表DH、压力波动
原因
泵中有气体单向阀损坏泵密封损坏脱气不充分系统漏液
使用梯度洗脱
见列表A、B
解决方法
见列表D
解决方法
a、溶剂脱气
b、从泵中除去气体更换单向阀更换泵密封a、溶剂脱气
改变脱气方法(使用在线脱气法等)
确定漏液位置并维修
由于流动相粘度的变化引起的压力波动
三、漏液
通常可以通过拧紧或更换管路接头来解决漏液的问题。但值得注意的是过份拧紧会导致金属接头的漏液和塑料接头的磨损。如果通过稍微拧紧接头不能解决漏液的问题，就必须将接头取下，检查是否损坏(例如，卡套损坏、密封表面有杂质)；损坏的接头应该更换掉。A、接头处漏液
原因解决方法
接头松动拧紧接头磨损更换接头过紧a、拧松，再重新拧紧
b、更换
接头被污染a、拆下清洗
b、更换
部件不匹配使用同一品牌的配件B、泵漏液
原因解决方法
单向阀松动a、拧紧单向阀(不必拧的过紧)
b、更换单向阀
接头松动拧紧接头(不必拧的过紧)混合器密封损坏a、更换混合器密封
b、更换混合器
泵密封损坏维修或更换泵密封件压力传感器损坏维修或更换压力传感器脉冲阻尼器损坏更换脉冲阻尼器比例阀损坏a、检查隔膜，如果漏液立即更换
b、检查手紧接头，损坏的立即更换
放空阀的损坏a、拧紧放空阀
b、更换放空阀
C、进样阀漏液
原因解决方法
转子密封损坏重新安装或更换进样阀
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定量环阻塞
进样口密封松动
进样针头尺寸不合适废液管中产生虹吸废液管阻塞D、色谱柱漏液
原因
尾端接头松动卡套内有填料筛板厚度不合适筛板选择指导
物质粒径
3-4u5-20u
E、检测器漏液
原因
流通池垫片损坏流通池窗破碎手紧接头漏液废液管阻塞流通池阻塞
更换定量环调整
使用恰当的进样针
保持废液管高于废液液面更换或疏通废液管
解决方法
拧紧接头
拆下、清洗卡套、重新安装使用合适的筛板(参考下表)
筛板孔径
0.5u2u
解决方法
a、避免过大的背景压力(压力降)b、更换垫片更换窗口拧紧或更换更换废液管
重新安装或更换
四、谱图问题
液相色谱系统的许多问题都能在谱图上反映出来。其中有一些问题可以通过改变设备参数得到解决；而其他的问题必须通过修改操作程序来解决。对于色谱柱和流动相的正确选择是得到好的色谱图的关键。A、峰拖尾
原因解决方法
筛板阻塞a、反冲色谱柱
b、更换进口筛板c、更换色谱柱
色谱柱塌陷填充色谱柱干扰峰a、使用更长的色谱柱
b、改变流动相或更换色谱柱
流动相PH选择错误调整PH值。对于碱性化合物，低PH
值更有利于得到对称峰
样品与填料表面的溶化点发生反应a、加入离子对试剂或碱性挥发性修饰图剂
b、更改色谱柱
B、峰前延
原因解决方法
柱温低升高柱温样品溶剂选择不恰当使用流动相作为样品溶剂样品过载降低样品含量色谱柱损坏见A1、A2
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C、峰分叉
原因
保护柱或分析柱污染图
解决方法
取下保护柱再进行分析。如果必要更换保护柱。如果分析柱阻塞，拆下来清洗。如果问题仍然存在，可能是柱子被强保留物质污染，运用适当的再生措施。如果问题仍然存在，入口可能被阻塞，更换筛板或更换色谱柱。改变样品溶剂。如果可能采取流动相作为样品溶剂。
解决方法
减少样品载量
解决方法
a、减少进样体积
b、运用低极性样品溶剂
解决方法
a、调整系统连接(使用更短、内径更小的管路)
b、使用小体积的流通池
解决方法
a、加入三乙胺(或碱性样品)b、加入乙酸(或酸性样品)
c、加入盐或缓冲剂(或离子化样品)d、更换一支柱子
a、加入三乙胺(或碱性样品)b、加入乙酸(或酸性样品)
c、加入水(或多官能团化合物)d、试用另一种方法
加入三乙胺(或碱性样品)
解决方法
a、使用浓度50-100mM的缓冲液
b、使用Pka等于流动相PH值的缓冲液
解决方法
正常
a、增加运行时间或梯度斜率b、提高流速
a、检查流动相是否纯净
b、使用流动相作为样品溶剂c、减少进样体积5
样品溶剂不溶于流动相D、峰变形
原因
样品过载
E、早出的峰变形
原因
样品溶剂选择不恰当
F、早出的峰拖尾程度大于晚出的峰
原因
柱外效应
G、K’增加时，脱尾更严重
原因
二级保留效应，反相模式
二级保留效应，正相模式
二级保留效应，离子对
H、酸性或碱性化合物的峰拖尾
原因
缓冲不合适
I、额外的峰
原因
样品中有其他组份前一次进样的洗脱峰空位或鬼峰
液相色谱仪日常维护方法(pdf 10页)
