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第七章 生物化学
二、典型例题
例1 请用最简便的方法，鉴别核糖、葡萄糖、果糖、蔗糖和淀粉。
分析 鉴别核糖、葡萄糖、果糖、蔗糖和淀粉最简便的方法是显色法。首先在这五种糖中各加入适量碘液，只有淀粉变蓝色，其余四糖不变色。然后在除淀粉外的四糖中分别加适量的盐酸和间苯二酚，核糖呈绿色，葡萄糖呈淡红色，果糖呈红色，而蔗糖不变色。这一下可鉴别出核糖和蔗糖。再在葡萄糖和果糖中分别加入几滴清水，由于葡萄糖具有还原性而使溴水褪色，果糖无还原性，不能使溴水褪色，从而就能达到区分这两种糖的目的。
【参考答案】
鉴别核糖、葡萄糖、果糖、蔗糖和淀粉的最简便方法。
例2 根据蛋白质的有关知识回答下列问题：
（1）氨基酸的极性由什么决定？组成蛋白质的20种氨基酸中具有极性的氨基酸有多少种？
（2）组成蛋白质的氨基酸中，哪一种不能参与形成真正的肽键？为什么。
（3）什么是蛋白质的等电点（pI）？为什么说在等电点时蛋白质的溶解度最低？
分析 （1）氨基酸的极性由其侧链基团（R）决定，组成蛋白质的20种氨基酸中具有极性的氨基酸有11种。（2）组成蛋白质的氨基酸中，脯氨酸（Pro）不能参与形成真正的肽镇，因为Pro是亚氨基酸，没有游离的氨基。（3）蛋白质分子所带净电荷为零时，溶液的pH值为该蛋白质的等电点。处于等电点状态的蛋白质分子外层的净电荷被中和，分子之间相互聚集形成较大的颗粒而沉淀下来，故此时蛋白质的溶解度最低。
【参考答案】 见分析过程。
例3 （1）下列氨基酸的混合物在pH 3.9时进行纸电泳，指出哪一些氨基酸朝正极移动，哪一些氨基酸如负极移动？氨基酸混合物的构成为丙氨酸（Ala）、丝氨酸（Ser）、苯丙氨酸（Phe）、亮氨酸（Leu）、精氨酸（Arg）、天门冬氨酸（Asp）和组氨酸（His）。 （2）具有相同电荷的氨基酸，如Gly和Leu在纸电泳时总是稍稍分离，你能作出解释吗？
（3）一个含有Ala、Val、Glu、Lys和Thr的氨基酸混合物，在pH6.0时进行纸电泳，然后用茚三酮显色。请画出电泳后各氨基酸斑点的位置，并标明正极、负极、原点和不分开的氨基酸。
分析 （1）因为 Ala、Ser、Phe和 Leu的等电点在pH 6.0左右，将其放在pH 3.9条件下电泳时，Ala、Ser、Phe和Leu都带有电荷，因此它们均向负极移动。由于His和Arg等电点分别7.6和10.8，在 pH 3.9时虽都带正电荷，向负极移动，但因两者带正电荷数量不同，因此两者能分开。Asp的等电点是3.0，在pH3.9条件下带负电荷，故向正极移动。
（2）在电泳时，如果氨基酸带有相同的电荷，则分子量大的氨基酸比分子量小的氨基酸
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移动慢些，由于Leu的分子量比Gly大，所以Leu比Gly移动慢，因此能达到稍稍分离的目的。
（3）在pH 6.0时，Glu带负电荷朝正极移动，Lys带正电荷负极移动。Val、Ala、Thr的等电点在 pH 6.0附近，移动距离很小，故不能完全分开。电泳后谷氨基酸斑点的位置如下图所示。
【参考答案】 见分析过程。
例4 有一个蛋白质分子在pH7的水溶液中可以折叠成球状，通常是带极性侧链的氨基酸位于分子外部，带非极性侧链的氨基酸位于分子内部。请回答：
（1）在Val、Pro、Phe、Asp、Lys、Ile和His中，哪些位于分子内部，哪些位于分子外部？ （2）为什么在球蛋白内部和外部都能发现Gly和Ala？
（3）Ser、Thr、Asn和Gln都是极性氨基酸，为什么会在分子内部发现？ （4）在球蛋白的分子内部和外部都能找到Gys，为什么？
分析 （1）Val、Pro、Phe、Ile是带有非极性测链的氨基酸，这些氨基酸残基位于分子内部 ；Asp、Lys、His是带有极性侧键的氨基酸，这些氨基酸残基位于分子的外部。
＋
（2）因为Ala和Gly两者的侧链都比较小，疏水性和极性都小；Gly只有一个H与α–碳原子相连，Ala只有—CH3与α–碳原子相连，故它们既可以出现在分子内部，也可以出现在分子外部。
（3）Ser、Thr、Asn、Gln在 pH 7.0时含有不带电荷的极性侧链，参与分子内部的氢键形成，从而减少了它们的极性，故会在分子内部发现。
（4）因为Cys属于不带电荷的极性氨基酸，可位于分子外部，但又由于Cys常常参与链内和链间的二硫键形成，使其极性减弱（少），放在球蛋白分子的内部也能找到Cys。
例5 （1）设一个互补成对的脱氧核苷酸残基的平均分子量为618，试计算分子量为3×107的双链DNA分子的长度。（2）这种DNA1分子占有的体积是多少？（3）这种DNA1分子含有多少螺圈？
分析 （1）依题意，一个互补成对的脱氧核苷酸残基的平均分子量约为618，该DNA分子量为3×107，则该DNA分子含有3×107 / 618＝48544对核苷酸，又根据DNA双螺旋模型可知，每对核苷酸在双螺旋中上升的高度为0.34nm，所以该DNA的长度＝48544×0.34nm＝
－
16504.9nm＝1.65049×103厘米。
－－
（2）该分子可以看成是一个长1.65049×103厘米，直径为2×107厘米的圆柱体，由公
－－－
式V（体积）＝лr2l＝3.14×(2×107 / 2)2×1.65049×104＝5.18×1017（厘米3）。
（3）已知DNA的双螺旋结构中，每一螺圈有10对核苷酸，所以48544对核苷酸约等于4854个螺圈。
【参考答案】 见分析过程。
例6 称取25mg蛋白酶粉配制成25ml酶溶液，从中取出0.1ml酶液，以酪蛋白为底物用Folin一酶比色法测定酶活力，结果表明每小时产出1500mg酪氨酸。另取2ml酶液，用凯氏定氮法测得蛋白氮为0.02mg，若以每分钟产生1mg酪氨酸的酸量为一个活力单位计算，试根据上述数据求出：
（1）1ml酶液中所含的蛋白质量及酶的活力单位；
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（2）酶的比活力；
（3）1g酶制剂的总蛋白含量及酶的总活力。
分析 （1）由题意可知，2ml酶液中含氮0.2毫克，则1ml酶液中含氮0.1g。因为蛋白质的平均含氮量为16％，所以0.1氮相当于蛋白质的量为0.1 / 16%＝0.625（毫克），即1毫升酶液中所含的蛋白质量为0.625g。又知0.1ml酶液每小时产生1500mg酪氨酸。根据定义：每分钟产生1mg酪氨酸的酶量为1个活力单位（或一个酶单位u）。因此，1毫升酶液所含的酶单位为1500×10 / 60＝250（u）。
（2）酶比活力是指每毫克酶蛋白所具有的酶活力，一般用单位／毫克蛋白表示。 0.625毫克酶蛋白含有250酶单位，那么，1毫克酶蛋白含有的酶单位数为：250×1 / 0.625＝400（酶单位／毫克酶蛋白）
（3）由题意可知每毫升醇含1毫克蛋白酶粉（酶制剂）。由（1）得到每毫升酶制剂含0.625毫克酶蛋白，所以每克酶制剂含0.625克酶蛋白。又因为总活力＝比活力×酶蛋白总量，即总活力＝400×625＝2.5×105（酶单位）
【参考答案】 见分析过程。
例7 已知一条DNA编码链的顺序是：
5’AGGCAAGACAAAGAAAGGCAAGACAAAG*AA3’。试问： （1）该编码链转录的mRNA顺序应当是什么？
（2）根据这条mRNA链翻译出的蛋白质含有几种氨基酸残基？
（3）如果编码链中带*号的碱基缺失，翻译的多肽分子中有几种氨基酸残基发生变化？ （4）如果编码链中带*号的碱基突变为C，翻译的多肽分子中有几种氨基酸残基发生变化？
分析 本题涉及基因控制蛋白质合成的过程及基因突变的有关基础知识。解答本题首先应通过DNA的编码链，求出mRNA链，然后再根据mRNA上每相邻的三个碱基为一个氨基酸的密码子，借助氨基酸密码表查出与之相对应的氨基酸种类，从而进一步确定组成蛋白质的氨基酸种类和数量。
（1）由DNA编码链（模板链）转录的mRNA为：UUCUUUGUCUUGCCUUUCUUUGUCUUGCCU。（2）借助密码表，上述mRNA能翻译成由10个氨基酸残基组成的一条多肽链，该多肽链只含有3种氨基酸残基即Phe、Val和Leu。故该蛋白质的一级结构为 Phe－Phe－Val－Leu－Leu－Phe－Phe－Val－Leu一Leu。
（2）缺失后的DNA片段转录成的mRNA为：UUUUUGUCUUGCCUUUCUUUGUCUUGCCU。该mRNA能翻译成4种氨基酸残基组成的9肽。因为UUU（Phe）、UUG（Leu）、UCU（Ser）、UGC（Cys），则该蛋白质的一级结构为：Phe－Leu－Ser－Cys—Leu－Ser—Leu—Ser—Cys。（4）突变后，多肽分子中除N端的Phe变为Leu外，其他的氨基酸残基不发生变化。
【参考答案】 见分析过程。
例8 三羧酸循环（TCA）发生在
A 线粒体 B 叶绿体 C 细胞质 D 细胞核
分析 三羧酸循环是葡萄糖的有氧分解过程，是糖酵解的继续。糖酵解过程是在细胞质的基质（或胞液）中进行的，糖酵解的产物丙酮酸在有氧的条件下进入线粒体内转变为乙酸CoA参与三羧酸循环，因此三羧酸循环的过程发生在线粒体内。
【参考答案】 A。
例9 对于变性过程的描述，下列说法中正确的是
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高中生物奥林匹克竞赛教程：生物化学(中)
