车间空气设备设施和人员微生物检测方法

车间空气设备设施与人员微生物检测方法

车间空气、设备、设施与人员微生物检测方法

1、 目的:

检测生产车间空气、操作人员手部、与食品有直接接触面的机械设备的微生物指标,达到规定的卫生标准,以控制食品成品的质量。

2、 参照标准:

中华人民共与国国家标准《一次性使用卫生用品卫生标准》GB15979－2002

中华人民共与国国家标准《公共场所卫生检验方法 第三部分:空气微生物》GB/T 18204、3－2013

3、采样与检测方法:

培养基与检测用具的准备: 生理盐水(10ml一管,9ml两管)

培养基:营养琼脂、乳糖胆盐发酵培养基

用具:棉签、平皿(直径90mm),小试管、无菌取样袋,吸管(1ml、10ml)、剪刀、消毒棉球、酒精灯 3、1空气的采样与测试方法 3、1、1样品采集: (1)取样频率:

a)正常生产状态的采样,每周一次。

b)全厂统一放长假后,车间生产前,进行采样。

c)产品检验结果超内控标准时,应及时对车间进行采样,如有检验不合格点,整改后再进行采样检验。 (2)采样方法

室内面积不超过50 m2的设置3个采样点,50 m2以上的设置5个采样点。

采样点安均匀布点原则布置,室内3个采样点的设置在室内对角线四等分的3个等分点上,5个采样点的按梅花布点。

采样点距离地面高度1、2~1、5m,距离墙壁不少于1m。

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采样点应避开通风口、通风道等。

采样时,将含平板计数琼脂培养基的平板(直径9 cm)置采样点(约桌面高度),打开平皿盖,使平板在空气中暴露15 min。采样后必须尽快对样品进行相应指标的检测,送检时间不得超过6h,若样品保存于0～4℃条件时,送检时间不得超过24h。 3、1、2菌落培养:

(2)将已采集样品的培养基在6 h内送实验室,并做空白对照,细菌总数于

37℃±1℃培养48h观察结果,计数平板上细菌菌落数。

(3)菌落计算:

a) 记录平均菌落数,用“个/皿”来报告结果。用肉眼直接计数,标记或在

菌落计数器上点计,然后用5～10倍放大镜检查,不可遗漏。 空气细菌落菌数(cfu/m3)=50000*N/AT 式中: A——平板面积,cm2;

T——平板暴露时间,min; N——平均菌落数,cfu/平皿。 50000--------系数

有个前提条件就是5分钟在100CM2面积上沉降的细菌数相当于10L空气所含的细菌数,用直径90mm的平板,暴露5min,最终结果就是平板平均菌落数乘以157

空气的沉降菌指标与平皿的大小与沉降的时间有关

目前食品行业经常引用的标准就是GB15979-2002《一次性使用卫生用品卫生标准》,其规定生产环境卫生指标指标为﹕ a)装配与包装车间空气中细菌菌落总数应<2500cfu/m3 b)工作台表面细菌菌落总数应<20 cfu/cm2,

c)工人手表面细菌菌落总数应<300 cfu/只手,并不得检出致病菌。

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3、2工作台(机械器具)表面与工人手表面采样与测试方法: 3、2、1样品采集: (1)取样频率:

a)正常生产状态的采样,每周一次。

b)全厂统一放长假后,车间生产前,进行采样。

c)产品检验结果超内控标准时,应及时对车间进行采样,如有检验不合格点,整改后再进行采样检验。 (2) 采样方法:

a) 工作台(机械器具):用浸有灭菌生理盐水的棉签在被检物体表面(取与

食品直接接触或有一定影响的表面)取25cm2 的面积,在其内涂抹10次,然后剪去手接触部分棉棒,将棉签放入含10mL灭菌生理盐水的采样管内送检。

b) 工人手:被检人五指并拢,用浸湿生理盐水的棉签在右手指曲面,从指尖

到指端来回涂擦10次,然后剪去手接触部分棉棒,将棉签放入含10mL灭菌生理盐水的采样管内送检。 (3)采样注意事项:

擦拭时棉签要随时转动,保证擦拭的准确性。对每个擦拭点应详细记录所在分场的具体位置、擦拭时间及所擦拭环节的消毒时间 3、2、2 细菌·大肠菌群的检测培养:

样液稀释:将放有棉棒的试管充分振摇。此液为1:10稀释液。如污染严重,可十倍递增稀释,吸取1ml 1:10样液加9ml无菌生理盐水中,混匀,此液为1:100稀释液。 3、2、2、1 细菌总数:

(1)以无菌操作,选择1～2个稀释度各取1ml样液分别注入到无菌平皿内,每

个稀释度做两个平皿(平行样),将已融化冷至45℃左右的平板计数琼脂培养基倾入平皿,每皿约15~20ml,充分混合。

(2)待琼脂凝固后,将平皿翻转,置36℃±1℃ 培养48 h后计数。 (3)结果报告:报告每cm2食品接触面中或每只手的菌落数