玉环县疾病预防控制中心作业指导书 标题：试剂配制 琼脂 17g 0.01%结晶紫溶液 5mL
文件编号：YJKZ/ZYW6-001 版号：第 2 版，共 26 页 第 16 页 蒸馏水 1000mL pH8.7 4.21.2 制法
除结晶紫和琼脂外，其他按上述成分配好，校正pH。加入琼脂，加热溶解。再加入结晶紫溶液，分装烧瓶，每瓶100mL。
4.22 3.5%氯化钠三糖铁琼脂（可按成品试剂上的说明操作） 4.22.1 成分
三糖铁琼脂 1000mL 氯化钠 30g 4.22.2 制法
按4.10配制三糖铁琼脂，再加入氯化钠30g，分装试管，121℃高压灭菌15min。放置高层斜面备用。
4.23 嗜盐性试验培养基 4.23.1 成分
蛋白胨 2g
氯化钠 按不同量加 蒸馏水 100mL pH7.7 4.23.2 制法
配制2%蛋白胨水，校正pH，共配制5瓶，每瓶100mL。每瓶分别加入不同量的氯化钠：(1)不加；(2)3g；(3)7g；(4)9g；(5)11g。待溶解后分装试管。121℃高压灭菌15min。 4.24 3.5%氯化钠生化试验培养基（可按成品试剂上的说明操作） 4.24.1 成分及制法
根据所需糖的种类按3.8配制。只是将氯化钠含量改为3.5%，pH为7.7 4.25 7.5%氯化钠肉汤（可按成品试剂上的说明操作） 4.25.1 成分
蛋白胨 10g 牛肉膏 3g 氯化钠 75g 蒸馏水 1000mL pH7.4 4.25.2 制法
将上述成分加热溶解，校正pH，分装试管，121℃高压灭菌15min。
4.26 血琼脂（可按成品试剂上的说明操作） 4.26.1 成分
pH7.4～7.6豆粉琼脂 100mL 脱纤维羊血(或兔血) 5～10mL 4.26.2 制法
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玉环县疾病预防控制中心作业指导书 标题：试剂配制 文件编号：YJKZ/ZYW6-001 版号：第 2 版，共 26 页 第 17 页 加热溶化琼脂，冷至50℃，以灭菌手续加入脱纤维羊血，摇匀，倾注平板。亦可分装灭菌试管，置成斜面。亦可用其他营养丰富的基础培养基配制血琼脂。 4.27 Baird－Parker氏培养基（可按成品试剂上的说明操作） 4.27.1 成分
胰蛋白胨 10g 牛肉膏 5g 酵母膏 1g 丙酮酸钠 10g 甘氨酸 12g 氯化锂(LiCl·6H2O) 5g 琼脂 20g 蒸馏水 950mL PH7.5
4.27.2 增菌剂的配法
30%卵黄盐水50mL与除菌过滤的1%亚蹄酸钾溶液10mL混合，保存于冰箱内。 4.27.3 制法
将各成分加到蒸馏水中，加热煮沸至完全溶解。冷至25℃，校正pH。分装每瓶95mL，121℃高压灭菌15min。临用时加热溶化琼脂，冷至50℃，每95mL加入预热至50℃的卵黄亚蹄酸钾增菌剂5mL，摇匀后倾注平板。培养基应是致密不透明的。使用前在冰箱储存不得超过48h。
4.28 3.8%柠檬酸钠溶液 4.28.1 成分
柠檬酸钠 3.8g 蒸馏水 100mL 4.28.2 制法
取柠檬酸钠3.8g，加蒸馏水到100mL，溶解后过滤，装瓶，121℃高压灭菌15min。 注：兔(人)血浆制备：取3.8%柠檬酸钠溶液一份加兔(或人)全血四份，混好静置之，则血球下降，即可得血浆进行试验。
4.29 葡萄糖肉汤 4.29.1 成分
牛肉膏 5g 氯化钠 5g 蛋白胨 10g 葡萄糖 10g 蒸馏水 1000mL pH7.2～7.4 4.29.2 制法
将上述成分溶于蒸馏水中，调pH，加热溶解，分装试管， 121℃高压灭菌15min 后备用。
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玉环县疾病预防控制中心作业指导书 标题：试剂配制 文件编号：YJKZ/ZYW6-001 版号：第 2 版，共 26 页 第 18 页 4.30 甘露醇卵黄多粘菌素琼脂（可按成品试剂上的说明操作） 4.30.1 成分
蛋白胨 10g 牛肉膏 1g 甘露醇 10g 氯化钠 10g 琼脂 15g 蒸馏水 1000mL 0.2%酚红溶液 13mL 50%卵黄液 50mL
多粘菌素B 100 国际单位/mL pH7.4 4.30.2 制法
将前面五种成分加入于蒸馏水中，加热溶解，校正pH，加入酚红溶液。分装烧瓶，每瓶100mL，121℃高压灭菌15min。临用时加热溶化琼脂，冷至50℃，每瓶加入50%卵黄液5mL及多粘菌素B10000国际单位，混匀后倾注平板。
4.31 硝酸盐蛋白胨水培养基（可按成品试剂上的说明操作） 4.31.1 成分
蛋白胨 10g 酵母浸膏 3g 硝酸钾 2g 亚硝酸钠 0.5g 蒸馏水 1000mL 4.31.2 制法
将蛋白胨与酵母浸膏加到蒸馏水中,加热溶解，校正pH7.2。煮沸过滤后补足液量,加入硝酸钾和亚硝酸钠溶解均匀,分装到加有小倒管的试管中， 115℃高压灭菌20min。 4.32 明胶培养基（可按成品试剂上的说明操作） 4.32.1 成分
蛋白胨 5g 牛肉膏 3g 明胶 120g 蒸馏水 1000mL 4.32.2 制法
将上述成分混合，置流动蒸气灭菌器内，加热溶解，校正pH至7.0～7.2，用绒布过滤。分装试管，121℃灭菌15min，备用。
4.33 孟加拉红培养基(虎红培养基)（可按成品试剂上的说明操作） 4.33.1 成分
蛋白胨 5g 葡萄糖 10g 磷酸二氢钾 1g
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玉环县疾病预防控制中心作业指导书 标题：试剂配制 文件编号：YJKZ/ZYW6-001 版号：第 2 版，共 26 页 第 19 页 硫酸镁(MgSO4·7H2O) 0.5g 琼脂 20g 1/3000孟加拉红溶液 100mL 蒸馏水 1000mL 氯霉素 0.1g 4.33.2 制法
上述各成分加入蒸馏水中溶解后，再加孟加拉红溶液。另用少量乙醇溶解氯霉素，加入培养基中，分装后，121℃灭菌20min。 4.33.3 用途 分离霉菌及酵母。 4.34 煌绿肉汤增菌液 4.34.1 成分
肉浸液肉汤(或牛肉膏汤) 1000mL 磷酸氢二钾 1g 2%煌绿溶液 0.5～10mL 4.34.2 制法
4.34.2.1 将肉浸液肉汤加入磷酸氢二钾(原已有磷酸氢二钾者可不加)，校正pH，分装烧瓶，每瓶100mL，121℃高压灭菌20min。 4.34.2.2 2%煌绿水溶液于临用前配制。
4.34.2.3 按比例［见GB 4789.19—94《食品卫生微生物学检验蛋与蛋制品检验》］于肉汤内加入煌绿溶液，摇匀，备用。
注：①加入煌绿溶液时，肉汤温度不宜过高，一般以放冷为宜。 ②煌绿的纯度不应低于93%。
4.35 （T-M）培养基（按成品试剂上的说明操作）
用途：淋球菌培养
4.36 SF（按成品试剂上的说明操作） 用途：沙门菌增菌
4.37 乳糖蛋白胨培养液（可按成品试剂上的说明操作） 4.37.1成份
蛋白胨 10g 牛肉膏 3g 乳糖 5g 氯化钠 5g 溴甲酚紫乙醇溶液（16g/L） 1ml 蒸馏水 1000ml 4.37.2制法
将蛋白胨、牛肉膏、乳糖及氯化钠溶于蒸馏水中，调整pH为7.2～7.4，再加入1ml溴甲酚紫乙醇溶液（16g/L），充分混匀，分装于装有倒管的试管中，115℃高压灭菌20min，储存于冷暗处备用。
4.38亮绿乳糖培养液（BGB）（可按成品试剂上的说明操作）
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玉环县疾病预防控制中心作业指导书 标题：试剂配制 4.38.1成分
文件编号：YJKZ/ZYW6-001 版号：第 2 版，共 26 页 第 20 页 蛋白胨 10g 乳糖 10g 牛胆盐 2g 亮绿 0.0133g 蒸馏水 1000ml 4.38.2制法
除亮绿外,将其他成分溶于蒸馏水中,调pH到7.2,加入亮绿,混匀,分装到带有倒管的试管中,每管10ml,115℃20min灭菌。
4.39 SCDLP液体培养基（可按成品试剂上的说明操作） 4.39.1成分
酪蛋白胨 17g 大豆蛋白胨 3g 氯化钠 5g 磷酸氢二钾 2.5g 葡萄糖 2.5g 卵磷脂 1g 吐温80 7g 蒸馏水 1000ml 4.39.2制法
将各种成分混合(如无酪蛋白胨和大豆蛋白胨可用日本多价胨代替),加热溶解,调pH至7.2～7.3,分装,121℃灭菌20min,摇匀,避免吐温80沉于底部冷至25℃后使用。
4.40十六烷三甲基溴化铵培养液（可按成品试剂上的说明操作） 4.40.1成分
牛肉膏 3g 蛋白胨 10g 氯化钠 5g 十六烷三甲基溴铵 0.3g 琼脂 20g 蒸馏水 1000ml 4.40.2制法
除琼脂外,上述各成分混合加热溶解,调pH至7.4～7.6,然后加入琼脂,115℃灭菌20min,冷至55℃左右,倾注平皿。
4.41绿脓菌素测定用培养基斜面（可按成品试剂上的说明操作） 4.41.1成分
蛋白胨 20g 氯化镁 1.4g 硫酸钾 10g 琼脂 18g 甘油(化学纯) 10g
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