2020届高考生物查漏补缺之选考题题型专练（四）
1、钙依赖蛋白激酶(CDPK)在植物的信号传导和提高植物抗性方面发挥着重要作用,科学家通过将CDPK基因导入拟南芥中,来获得具有抗性的新品种。下图为某种质粒表达载体和含CDPK基因的DNA片段示意图,图中标记了限制酶的切割位点。回答下列问题。
(1)基因工程中所用的目的基因可以人工合成,也可以从基因文库中获得。基因文库包括 ，为了使CDPK基因插入质粒中,应选取 两种限制性核酸内切酶分别切割质粒和含目的基因的DNA片段。
(2)将获取的CDPK基因进行PCR扩增,目前在PCR反应中使用Taq酶而不使用大肠杆菌DNA聚合酶主要原因是 。
(3)图中所示的质粒为Ti质粒，操作过程中需要把CDFK基因插入到质粒的T-DNA片段中,T-DNA片段在转化中的作用是 。为了检测CDPK基因是否导入成功,可以用 作探针检测CDPK基因是否导入拟南芥细胞,导入成功的标志是 。
(4)为研究CDPK基因表达载体对拟南芥的遗传转化的影响,将转化后的拟南芥植株生长成熟后,采集其种子,播种于含 的MS培养基中进行抗性筛选。 2、为生产具有特定性能的α-淀粉酶,研究人员从某种海洋细菌中克隆了α-淀粉酶基因(1 656个碱基对),利用基因工程大量制备淀粉酶,实验流程如图。请回答下列问题:
1.利用PCR技术扩增α-淀粉酶基因前,需先获得细菌的__________。
2.为了便于扩增的DNA片段与表达载体连接,需在引物的__________端加上限制性酶切位点,且常在两条引物上设计加入不同的限制性酶切位点,主要目的是__________。
3.进行扩增时,反应的温度和时间需根据具体情况进行设定,下列选项中__________的设定与引物有关,__________的设定与扩增片段的长度有关。(填序号)
①变性温度 ②退火温度 ③延伸温度 ④变性时间 ⑤退火时间 ⑥延伸时间 4.如图表示筛选获得的工程菌中编码α-淀粉酶的mRNA的部分碱基序列:
图中虚线框内mRNA片段包含__________个密码子,如虚线框后的序列未知,预测虚线框后的第一个密码子最多有__________种。
5.获得工程菌表达的α-淀粉酶后,为探究影响酶活性的因素,以浓度为1%的可溶性淀粉为底物测定酶活性,结果如表所示: 缓50 mmol/L 冲Na2HPO4-KH2PO4 液 10.pH 6.0 6.5 7.0 7.5 7.5 8.0 8.5 9.0 9.0 9.5 0 酶相25.4 40.2 49.8 63.2 70.1 95.5 99.5 85.3 68.1 63.7 41.5 5 20.8 10.Tris-HCI Gly-NaOH 50 mmol/L 50 mmol/L 对活性% 根据上述实验结果,初步判断该α-淀粉酶活性最高的条件为__________。
3、甲、乙两名同学分别以某种植物的绿色叶片和白色花瓣为材料，利用植物组织培养技术繁殖该植物。回答下列问题:
(1)以该植物的绿色叶片和白色花瓣作为外植体，在一定条件下进行组织培养，均能获得试管苗,其原理是 。
(2)甲、乙同学在诱导愈伤组织所用的培养基中，均加入一定量的蔗糖，蔗糖水解后可得到 。若要用细胞作为材料进行培养获得幼苗，该细胞应具备的条件是 (填“具有完整的细胞核”“具有叶绿体”或“已转入抗性基因”)。
(3)图中A、B、C所示的是不同的培养结果，该不同结果的出现主要是由于培养基中两种激素用量的不同造成的,这两种激素是 。A中的愈伤组织是叶肉细胞经 形成的。
(4)若该种植物是一种杂合体的名贵花卉，要快速获得与原植株基因型和表现型都相同的该种花卉，可用组织培养方法繁殖,在培养时， (填“能”或“不能”)采用经减数分裂得到的花粉粒作为外植体，原因是 。
4、细胞融合技术有着广泛应用。下图为细胞融合的简略过程，据图回答相关问题。
（1）若a、b分别是基因型为yyRr和YYrr两个玉米品种的花粉，且这两对基因分别位于两对同源染色体上。科学家分别将它们的花粉除去细胞壁，然后诱导其融合，再把这些融合细胞进行培养，培育出了玉米新品种。这两个品种的花粉可用化学诱导剂___________诱导融合，这些融合细胞经过脱分化形成_________，再经培养可以得到不同于亲本表现型的玉
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