黄芪多糖联合二甲双胍对衰老2型糖尿病模型小鼠肝脏糖
脂代谢的影响
李丹丹1，刘佳佳1，吴玉泓1，李海龙1，2，王勇1，陈彻1，王晶1，2 【摘 要】摘要：目的 观察黄芪多糖联合二甲双胍对衰老2型糖尿病模型小鼠肝脏糖脂代谢的影响，探讨其作用机制。方法 采用高糖高脂饲料联合链脲佐菌素诱导自然衰老小鼠制作衰老2型糖尿病小鼠模型。实验小鼠分为衰老对照组、衰老糖尿病模型组、二甲双胍治疗组、黄芪多糖＋二甲双胍治疗组，各给药组给予相应药物灌胃，连续60 d。测定小鼠体质量、摄食、饮水、空腹血糖变化，HE染色观察小鼠肝组织形态学，糖原染色和油红O染色观察肝组织糖脂代谢，透射电子显微镜观察小鼠肝组织细胞超微形态。结果 与衰老对照组比较，衰老糖尿病模型组空腹血糖明显升高、体质量减轻、摄食和饮水明显增加（P＜0.05）。与衰老糖尿病模型组比较，各给药组空腹血糖明显降低、体质量增加、摄食和饮水明显减少（P＜0.05）。HE染色显示，与衰老对照组比较，衰老糖尿病模型组肝组织病变、坏死严重，各给药组较模型组明显改善，其中黄芪多糖＋二甲双胍治疗组肝组织结构改善最明显。糖原染色与油红O染色显示，衰老对照组糖原、脂滴含量较少，衰老糖尿病模型组糖原、脂滴含量明显增多；与衰老糖尿病模型组比较，各给药组小鼠肝组织糖原和脂滴含量均显著减少（P＜0.05），且黄芪多糖＋二甲双胍治疗组效果更明显。透射电镜观察显示，衰老糖尿病模型组较衰老对照组肝组织细胞线粒体、内质网损伤严重，各治疗组较模型组明显缓解，且黄芪多糖＋二甲双胍治疗组效果更明显。结论 黄芪多糖＋二甲双胍可通过对肝组织细胞线粒体及内质网的保护作用，改善衰老2型糖尿病小鼠模型的肝脏糖脂代谢。
【期刊名称】中国中医药信息杂志 【年(卷),期】2019(026)002 【总页数】5
【关键词】衰老2型糖尿病；二甲双胍；黄芪多糖；肝脏；糖脂代谢；小鼠 随着年龄增长，机体常伴随一系列生理和病理改变。其中2型糖尿病已成为老年人死亡的主要病因。目前治疗糖尿病的常用药物为二甲双胍，但临床发现，该药在治疗中存在单纯用药疗效不佳，可能引起消化不良和低血糖等不良反应[1]。中医认为2型糖尿病因“脾虚肝郁、气血两虚”所致，其中“脾虚肝郁”影响更大[2]。黄芪具有补气健脾、抗衰老的功效，研究发现黄芪多糖具有调节免疫、提高胰岛素分泌、减缓胰岛素抵抗的作用[3-5]。本研究采用黄芪多糖联合二甲双胍作用于衰老2型糖尿病小鼠模型，从肝脏糖脂代谢入手，探讨黄芪多糖对衰老糖尿病的治疗机制，为其临床应用提供依据。
1 实验材料
1.1 动物
雄性5月龄SPF级昆明种小鼠50只，甘肃中医药大学科研实验动物中心，动物合格证号SCXK（甘）2015-0002。饲养于温度20～25 ℃、相对湿度40%～70%环境，每日光照12 h，自由摄食饮水。 1.2 药物
黄芪多糖，上海索莱宝生物科技有限公司，批号608B031；盐酸二甲双胍片，上海源叶生物科技有限公司，批号S24O8G46081。 1.3 主要试剂与仪器
链脲佐菌素（STZ），美国Sigma公司；多聚甲醛，中国Biosharp公司；25%
戊二醛溶液，美国Sigma公司；HE染色试剂盒、PAS染色试剂盒、油红O染液，中国索莱宝公司。美国罗氏活力型血糖仪、罗氏血糖试纸，德国Roche公司；光学显微镜，日本Olympus公司；透射电子显微镜，日本JEOL公司。 1.4 造模及分组
将50只小鼠随机分为衰老对照组12只，衰老糖尿病造模组38只。衰老对照组给予普通饲料喂养。衰老糖尿病造模参照文献[6]，采用腹腔注射STZ制作糖尿病模型，先用高糖高脂饲料连续喂养小鼠4周，然后每只小鼠连续3 d腹腔注射70 mg/kg STZ，以连续2次空腹血糖≥16.7 mmol/L为造模成功。造模4周后，衰老对照组小鼠死亡1只；衰老糖尿病模型造模成功33只，将其随机分为衰老糖尿病模型组、二甲双胍治疗组和黄芪多糖＋二甲双胍治疗组，每组11只。 1.5 给药
二甲双胍用去离子水配制成100 g/L水溶液，按10 mL/（kg·d）灌胃二甲双胍治疗组小鼠；黄芪多糖配制成300 g/L水溶液，与100 g/L二甲双胍等体积混合，按10 mL/（kg·d）灌胃黄芪多糖＋二甲双胍治疗组小鼠；衰老对照组和衰老糖尿病模型组小鼠给予等量生理盐水灌胃。每日1次，连续60 d。其中衰老糖尿病模型组有小鼠死亡，为便于统计分析，治疗后以每组8只小鼠进行分析。
1.6 一般状况测定
小鼠适应性喂养1周，每周测定小鼠体质量、摄食、饮水、空腹血糖（每次测量前禁食12 h）。 1.7 肝组织形态观察
黄芪多糖联合二甲双胍对衰老2型糖尿病模型小鼠肝脏糖脂代谢的影响
