襄荷乙醇提取物的体外抗氧化活性研究

襄荷乙醇提取物的体外抗氧化活性研究

张泽生，王玉本，黄 闯，王 翠

【摘 要】目的：研究襄荷乙醇提取物（extract of Zingiber mioga Rose，EZR）的体外抗氧化作用。方法：用50%乙醇制备襄荷提取物，以VC作为阳性对照，测定EZR的总还原力及清除DPPH自由基的能力，并用荧光化学发光法测定了EZR对活性氧自由基（·、·OH、H2O2）的清除能力。结果：EZR的总还原力为40.17±1.04mg VC/g，在实验浓度范围内，对DPPH·、·OH、O－2·、H2O2的清除率分别达到了70%、64%、77%、71%。结论：EZR具有明显的体外抗氧化活性，但其抗氧化能力小于VC。 【期刊名称】食品工业科技 【年(卷),期】2010(000)012 【总页数】3

【关键词】襄荷，抗氧化活性，清除自由基，体外

襄荷（zingiber mioga Rose）又名阳荷（《黔志》）、山姜、观音花（《浙江中药资源名录》），为姜科姜属多年生草本植物，原产于中国南部，有特殊的芳香，驱虫效果明显，病虫害很少，极少使用农药，是理想的绿色食品。据李时珍《本草纲目》所载，襄荷具有活血调经，镇咳祛痰，消肿解毒，消积健胃等药用功效，是兼药理保健功能为一体的纯天然膳食纤维食品，对便秘、糖尿病等有着特殊功效。近年研究表明我国果蔬及中草药是非常有潜力的天然抗氧化资源，对果蔬抗氧化性研究更是层出不穷。襄荷作为一种绿色健康食品具有很大的开发价值。目前我国对襄荷的研究多集中在栽培、组织培养、快速繁殖和食用资源等方面，对其生物活性方面的研究甚少。本文以乙醇为溶剂从襄荷中提

取大部分生物活性物质，并对其体外抗氧化作用进行研究，以期为襄荷在营养保健及药用方面的开发应用提供理论依据。

襄荷 产自湖北十堰郧县，经鉴定为襄荷果实部分；邻苯三酚、碳酸钠、碳酸氢钠、无水硫酸铜、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、抗坏血酸等 均为分析纯；DPPH·（1.1－二苯基－2－苦肼基自由基） 购于德国Fluka公司；鲁米诺（3－Aminophthalhydrazide，98%）美国ACROS ORGANICS产品。

UV mini－1240紫外/可见分光光度计 日本岛津；荧光化学发光分析仪（Fluoroskan Ascent FL），恒温水浴锅，植物粉碎机，电子天平等。 1.2 实验方法

1 材料与方法

1.1 材料与仪器

1.2.1 襄荷醇提物的制备 将新鲜的襄荷用清水洗净，冷冻干燥后磨成细粉，用50%乙醇以1∶15的料液比在80℃浸提2h，将粗提液抽滤，50℃下减压浓缩，冷冻干燥，得到深棕色粉状物质，即襄荷醇提物，4℃保存备用。

1.2.2 总还原力的测定 标准曲线的制作：参考Lee的方法［1］，将标准样品VC配制成浓度为15、37.5、75、150、300!g/mL的溶液，取1mL样液于试管中，依次加入0.2mol/L的PBS缓冲液（pH6.6）2.5mL和l%六氰合铁酸钾［K3Fe（CN）6］溶液 2.5mL，50℃水浴20min后迅速冷却，加入10%三氯乙酸（TCA）溶液2.5mL，然后以 5000r/min的转速离心 10min，取2.5mL上清液，依次加入2.5mL蒸馏水，1mL 0.1%的三氯化铁溶液，充分混匀，静置10min后，于700nm处测吸光度值，根据吸光值对VC浓度做标准曲线。 样品总还原力的测定：按以上步骤测定EZR的总还原力。结果以每克样品所含

的VC当量表示，记为mg VC/g。

1.2.3 DPPH·清除率的测定 按照文献［2］的方法测定EZR对DPPH·的清除率，以VC做阳性对照。

1.2.4 ·OH清除率的测定［3］ 采用鲁米诺化学发光法测定EZR及阳性对照VC对Fenton型反应产生的·OH的清除作用。具体步骤：向发光池中依次加入2mmol/L的抗坏血酸溶液 40!L，2mmol/L的CuSO4溶液70!L，pH7.8的磷酸缓冲液50!L，不同浓度的供试液20!L，最后加入10mmol/L的鲁米诺溶液15!L，立即启动反应，记录每6s内发光强度的积分，至出现峰值（CP1），以去离子水为空白测CP0。清除率按下式计算：

1.2.5 ·清除率的测定［4］ 采用邻苯三酚—鲁米诺化学发光体系测定EZR及阳性对照VC对O－2·的清除率。具体步骤：向发光池中分别加入不同浓度的供试液50!L，6mmol/L的邻苯三酚溶液100!L，再加入5mmol/L的鲁米诺溶液50!L，立刻启动反应，测定6s内的发光强度CP1，以去离子水为空白测CP0。清除率的计算同1.2.4。

注：邻苯三酚溶液是由10mmol/L的HCl溶液配制，鲁米诺溶液是用 pH=10.16，0.1mmol/L的Na2CO3－NaHCO3缓冲液配制。

1.2.6 H2O2清除率的测定［5］ 采用H2O2－鲁米诺－碳酸缓冲液（pH9.5）体系测定EZR及阳性对照VC对H2O2的清除率。具体步骤：向发光池中分别加入不同浓度的供试液50!L，pH 9.5的碳酸盐缓冲液100!L，1mmol/L鲁米诺溶液50!L，最后加入0.15%的H2O2溶液50!L，立刻启动发光反应，测定12s内的发光强度CP1，用去离子水做空白对照，测其CP0。清除率的计算同1.2.4。