植物营养学实验报告
——植物体内N、P、K元素的含量测定 梁希07-2班 第一小组
组员:于明含、陆桂红、江河、赵晨辰、周韦君、张铮、冯海燕、高宇婷
1、植物组织样品的采集 1 采集时间 1 采集地点 1 采集的植株部位 2
2、植物组织样品的制备与保存 2 3、植物氮磷钾的测定 3
3.1 植物样品的消煮(H2SO4—H2O2法) 3 3.2 植物全氮的测定 3 3.3植物全磷测定 4
3.4 植物全钾的测定(火焰光度法) 5 4、结果与分析 6 5、实验总结 6
1、植物组织样品的采集
时间: 2011年5月8日中午12点 地点: 北京林业大学校园内:
阴生玉簪——主楼背面楼下 阳生玉簪——生物楼前 阴生鸢尾——科研楼南侧 阳生鸢尾——银杏道旁
采集植株部位:植株选定后还要决定取样的部位和组织器官,重要
的原则是所选部位的组织器官要具有最大的指示意义,也就是说,植株在该生育期对该养分的丰欠最敏感的组织器官。为保证最大的指示意义,同时保存草本的再生能力,我们选择地上茎叶进行实验分析。
采集方法:
(1)植物组织样品多用于诊断分析,采集植物组织样品首先要选定植株。样株必须有充分的代表性。
(2)在各采样小区内按植物分布路线多点采集,组成平均样品。 (3)我们组研究的是不同草本(鸢尾和玉簪)在不同生长条件(阴生或阳生)下,植物地上茎叶中N、P、K含量的差异,因此分别选择于主楼背面楼下采集阴生玉簪;生物楼前采集阳生玉簪;科研楼南侧
采集阴生鸢尾;银杏大道旁采集阳生鸢尾。在每个采集点也象采集土样一样按照一定路线多点采集,组成平均样品,分装信封,贴标签。
图一 主楼后玉簪取样示意图
?? ?? ?? ?? ?? 主楼
如图,将玉簪分布带按5m为一个区间分为数个小区域,从每个小区域内随机抽取1株采摘。 2、植物组织样品的制备与保存
采得的样品一般说是需要洗涤的,否则可能引起泥土、施肥喷药等显著的污染,这对微量营养元素如铁、锰等的分析尤为重要。洗涤方法一般可用湿布仔细擦净表面沾污物。我们采集的样品叶片大,便于洗,因此,我们进行了清水洗涤。
将采得的鲜样立即进行干燥,以减少化学和生物的变化。分析用的植物鲜样要分两步干燥,通常先将鲜样在80—90℃烘箱中烘15—30分钟,然后,降温至60—70℃,逐尽水分。时间须视鲜样水分含量而定,大约12—24小时。
干燥后的样品可用研钵或带刀片的磨样机粉碎,并全部过0.5mm的筛。磨样和过筛都必须考虑到样品沾污的可能性。样品过筛后须充分混匀,保存于磨口广口瓶中,内外各贴放样品标签。
3、植物氮磷钾的测定
3.1 植物样品的消煮(H2SO4—H2O2法) 原理及方法:
植物中的氮磷大多数以有机态存在,钾以离子态存在。样品经浓H2SO4和氧化剂H2O2消煮,有机物被氧化分解,有机氮和磷转化成铵盐和磷酸盐,钾也全部释出。消煮液经定容后,可用于氮、磷、钾等元素的定量。本实验采用H2O2作为加速消煮剂,不仅操作手续简单快速,对氮磷钾的定量没有干扰,而且具有能满足一般生产和科研工作所要求的准确度,但要注意遵照操作规程的要求操作,防止有机氮被氧化成N2或氮的氧化物而损失。 试剂
1. 硫酸(比重1.84) 2. 30% H2O2 操作步骤:
分别称取四个植物样品(0.5 mm)0.3~0.5g(准确至0.0002g)装入100ml开氏瓶,其底部分别标记为“鸢阳”和“鸢阴”、“玉阳”和
“玉阴”,分别加浓硫酸5 ml,摇匀(最好放置过夜),在消煮炉上先小火加热,待H2SO4发白烟后再升高温度,当溶液呈均匀的棕黑色时取下,稍冷后加6滴H2O2,再加热至微沸,消煮约7—10分钟,稍冷后重复加H2O2再消煮,如此重复数次,每次添加的H2O2应逐次减少,消煮至溶液呈无色或清亮后,再加热约10分钟,除去剩余的H2O2,取下冷却后,用水将消煮液无损转移入100ml容量瓶中,冷却至室温后定容。用无磷钾的干燥滤纸过滤,或放置澄清后吸取清液测定氮、磷、钾。
3.2 植物全氮的测定 方法原理:
植物样品经开氏消煮、定容后,吸取部分消煮液碱化,使铵盐转变成氨,经蒸馏和扩散,用H3BO3吸收,直接用标准酸滴定,以甲基红—溴甲酚绿混合指示剂指示终点。 试剂
(1)40%(m/v)NaOH溶液 (2)2%H3BO3—指示剂溶液
(3)取标准溶液〔C(HCl或1/2H2SO4)=0.01mol/L〕 (4)碱性溶液 操作步骤
蒸馏法:吸取定容后的消煮液5.00ml开氏管,放入凯氏定氮仪中蒸馏,待反应完全,得到原始数据