复星长征体外诊断试剂
标准操作规程
试剂名称：天冬氨酸氨基转移酶测定试剂盒（速率法）
上海复星长征医学科学有限公司
目 录
1 试剂盒概况 2 方法学原理 3 试剂主要组分 4 样本准备 5 试剂准备 6 校准要求 7 质量控制 8 计算方法 9 参数设定 10 参考范围 11 试剂性能概要 12 超出可报告范围的处理 13 方法的局限性 14 其他必须说明的内容 15 参考文献
1 试剂盒概况
1．1 货号：1.02.1001/1.02.1002/1.02.1003/1.02.1005。 1．2 包装规格：试剂1（R1）：4×50mL；试剂2（R2）：2×50mL 试剂1（R1）：4×50mL；试剂2（R2）：4×25mL 。 1．3 医疗器械注册证编号/产品技术要求编号：
沪械注准20162400309/沪械注准20162400309
2 方法学原理
本试剂方法学原理以IFCC推荐的方法为基础。
样本中的天冬氨酸氨基转移酶AST催化L-天冬氨酸和α-氧代戊二酸氨基转换，生成草酰乙酸和L-谷氨酸；在NADH和苹果酸脱氢酶（MDH）存在下，草酰乙酸被还原为L-苹果酸，NADH被氧化为NAD+，从而使340nm处的光吸收值下降。通过监测340nm处光吸收值下降的速率，可以测定AST活力。样本中内源性丙酮酸的干扰可由试剂中LDH快速、完全地消除。 AST
L-天冬氨酸 + α-氧代戊二酸 草酰乙酸 + L-谷氨酸 MDH
草酰乙酸 + NADH ＋H+ L-苹果酸 + NAD+
LDH
样本中丙酮酸 + NADH ＋H+ L-乳酸 + NAD+ 式中：NADH = 还原性辅酶I NAD+ = 氧化性辅酶I 3 试剂主要组分 3．1 试剂1（R1）
乳酸脱氢酶（LDH） NADH
L-天冬氨酸 Tris缓冲液 3．2 试剂2（R2）
苹果酸脱氢酶（MDH） α-氧代戊二酸 Tris缓冲液 EDTA 3．3 储存条件
3．3 . 1在2～8℃避光、密封的储存条件下，试剂盒自生产之日起效期12个月。 3．3 . 2 试剂启用后，在2～10℃避光的条件下可稳定30 天。 4 样本准备
4．1 样本要求：血清样本应不溶血，避光保存。不建议采用血浆样本。 4．2 样本稳定性要求：天冬氨酸氨基转移酶（AST）在4℃可稳定7天，在室温中可稳定3天。 5 试剂准备
试剂为液体双试剂形式，无须特别准备，可直接上机使用。 6 校准要求
＞1635 U/L
＞1365 U/L
0.26 mmol/L
300 mmol/L 88 mmol/L
36 mmol/L 88 mmol/L 5.0 mmol/L
6．1 校准品：使用与试剂配套使用的复星长征临床化学校准血清（货号：4490050/4590050）对测定进行校准。 6．2 校准间隔
6．2．1 试剂批号变更时，使用与试剂配套使用的复星长征临床化学校准血清对测定进行校准后再对临床病人样本进行测定。
6．2．2 室内质量控制出现问题时使用与试剂配套使用的复星长征临床化学校准血清对测定进行校准并确认问题得到解决后方可对临床病人样本进行测定。 7 质量控制
使用与校准品和试剂配套使用的复星长征临床化学控制血清水平I/II（货号：4000050/4030050；4100050/4130050）进行日常室内质量控制。 8 计算方法
AST浓度(U/L)??A/min（样本）?校准液浓度(U/L）
?A/min（校准液）9 参数设定
按生化分析仪操作要求结合长征试剂说明书输入测定参数，并按校准、质量控制、样本测定的顺序进行常规测定。 10 参考范围
37℃ 5 - 34U/L （0.1 – 0.6μkat）
新生儿和婴儿的AST水平大约是成人的两倍，六个月以后降至成人水平。 引用的参考值范围代表本方法的期望值，仅供参考。建议各实验室验证这一参考值范围或建立自己的参考值范围。 11 试剂性能概要 11．1 不精确度
05 AST
