北京唯尚立德生物科技有限公司 基因沉默细胞系构建订单表
客户信息（必填） 单位 Email 邮寄地址： 需要沉默的基因（必填） 物种 （必填） 目的基因名称 （必填） Gene symbol或直接给出NCBI Genebank号 在目的细胞系里的本底表达量 （必填） shRNA序列□客户提供靶序列： 来源（必填） □客户提供shRNA序列： □客户提供参考文献（请发送） □唯尚立德设计合成 客户是否需要构建阴性对照细胞系 姓名 职位 课题组 电话 课题组负责人 手机 负责人电话 （阴性对照细胞系：使用相应的空载体或者插入随机序列而构建的慢病毒载体包装病毒、侵染目的细胞、流式或者抗性筛选获得） □不需要 □需要，使用空载体作对照 □需要，使用随机序列载体作对照 细胞信息（必填） 注意：甲方提供所需细胞系，甲方应确保细胞生长状态良好，适合后续实验；甲方需对提供所有资料的准确性、真实性及其质量负责。请认真对待。 细胞名称 培养基品牌、名称、添加剂 血清品牌、种类及使用浓度 培养温度和二氧化碳比例，贴壁或悬浮 消化条件（胰酶浓度和消化时间） 细胞培养条件
北京唯尚立德生物科技有限公司 传代密度和频率 添加特殊因子名称及浓度（无则不填） 推荐转染条件 培养瓶运输 推荐使用25cm2培养瓶，准备1-2瓶细胞：融合度大于70%，灌满培养基，拧紧瓶盖，封口膜封好，放入泡沫盒内。使用报纸、棉花等填充，起到保温、减震的作用。胶带封好泡沫盒。 细胞要求：冻存管装入1.5-1.8ml，细胞数量需达到至少1×106。推荐以25cm2培养瓶培养细胞至对数生长期，每瓶冻为一管，以保证细胞数量。 泡沫盒：体积至少300× 300× 300mm，壁的厚度约为50mm，内部空间为200× 200× 200mm，这样大的空间需放入5kg干冰。 干冰选择：选择高密度的颗粒状干冰，尽量不要用粉末状干冰 干冰用量：2KG/天，如北京到苏州大约3-4天，建议10KG 操作要领：迅速转移、严密包裹 先在泡沫盒铺一层干冰，用塑料袋装一袋干冰，将冻存管迅速埋入其中，迅速转移到已铺有干冰的泡沫盒正中，再铺上剩下的干冰装满，胶带封严泡沫盒。 注意： 1、使用干冰（-78℃）置于塑料泡沫盒中，处理得当，可以保存7-8天。一旦出现融解，细胞活力将急剧下降。 2、以最快的速度将细胞从液氮转入干冰中，否则细胞将以10～20℃／min的速度升温。绝对不能让温度高于－50℃。 3、泡沫盒不能有裂缝 细胞运输注意 冻存管运输 1、pWSLV-sh01: (pWSLV-U6-shRNA-CMV-GFP) (原08) 2、pWSLV-sh02: (pWSLV-U6-shRNA) （原09） 3、pWSLV-sh03: （原NC） shRNA表达载体选择 4、pWSLV-sh04: （原RFPpuro） 5、pWSLV-sh05:
北京唯尚立德生物科技有限公司 6、pWSLV-sh06: 7、pWSLV-sh07: 8、pWSLV-sh08: 9、pWSLV-sh09: 10、pWSLV-sh10: 11、pWSLV-sh11: 请把选择的载体编号填写在括号中（ ） 稳定沉默细胞株获得 （可多选） 单克隆筛选鉴定（可多选） 稳定沉默细胞株沉默效率验证 （可多选） 客户签字： 销售签字：
日期： 日期：
注：订单填好后，请直接发至 XXXXXXX(邮箱) 电话：XXXXX
北京客户邮寄地址：北京海淀区上地开拓路5号中关村生物医药园B302，燕新梁收，010-62963369 京外客户邮寄地址：江苏苏州市工业园区东平街199号，张函槊收，13401083138
□混合克隆，流式分选 □混合克隆，抗生素筛选 □需要单克隆筛选，详选下面 □荧光信号鉴定 □Real-time PCR鉴定 □转染报告基因鉴定 □Western Blot鉴定 □使用野生型细胞作对照 □使用野生型细胞瞬时转染空载体作对照 □使用野生型细胞瞬时转染随机序列载体作对照 □使用野生型细胞侵染空载体慢病毒毒液作对照 □使用野生型细胞侵染随机序列载体慢病毒毒液作对照
基因沉默细胞系构建订单表Ver2 - 唯尚立德
