课题1 微生物的实验室培养
一、培养基
1． 培养基的类型及其应用：
物理性质
化学组成
2、琼脂是从红藻中提取的_多糖__________，在配制培养基中用作为____凝固剂_____ __。
3、培养基的化学成分一般含有__水_______________、________无机盐______________、____________碳源_____、________氮源 ________四类营养成分。
培养基成分还需满足微生物生长对__pH_________、_特殊营养物质________、氧气_______等要求。
4、牛肉膏和蛋白胨主要为微生物提供____碳源、氮源、维生素_______ ___________ ___________ 等营养物质。
5、培养乳酸杆菌时需要添加__维生素_________ ，培养霉菌时需要将培养基pH调节为____酸性_______ ___________ ，培养细菌时需要将pH调节为 __中性或微碱性_________ ___________ 。
标准 培养基类型 固体培养基 半固体培养基 液体培养基 合成培养基 配制特点 加入凝固剂较多 主要应用 菌种分离,鉴定,计数 加入凝固剂较少 菌种保存 不加入凝固剂 由已知成分配制而成，培养基成分明确 工业生产，连续培养 菌种分类、鉴定 6、培养基的配制原则：
① 目的 要明确：根据培养的微生物种类、培养的目的等确定培养基的类型和配制量。
② 营养 要协调：培养基中各种营养物质的浓度和比例要适宜。
③ pH 要适宜：细菌培养基pH呈 中性或微碱性 性，霉菌培养基呈酸性。
二、无菌技术
1．获得纯净培养物的关键是 防止外来杂菌的入侵 。 2、 无菌技术包括：
（1）对实验操作空间、操作者的衣着和手进行 清洁和消毒 ； （2）将培养器皿、接种用具和培养基等器具进行 灭菌 ； （3）为避免周围微生物污染，实验操作应在 酒精灯火焰附近___________ _______ 进行；
（4）避免已灭菌处理的材料用具与______周围物品_____ 相接触。 3、比较消毒和灭菌（填表）
4、无菌技术除了防止培养物被污染外，还具有的目的是__有效避免操作者自身被微生物感染和污染环境____________________。
5、消毒方法：
（1）日常生活经常用到的是___煮沸________ 消毒法；
（2）对一些不耐高温的液体，则使用____巴氏_______ 消毒法；温度70-75
比较项 消毒 灭菌 理化因素的作用强度 消灭微生物的数量 芽孢和孢子能否被消灭 较温和 强烈 部分微生物 所有微生物 一般不能 能 煮 30分钟 时间，或者 80°煮C15分钟
（3）对接种室、接种箱或超净工作台首先喷洒 ___石炭酸或煤酚皂_______ _ 等溶液以增强消毒效果，然后使用 _紫外线照射30分钟__________ 进行物理消毒。
（4）实验操作者的双手使用__酒精_________进行消毒； （5）饮水水源用___氯气________进行消毒。 6、灭菌方法：
（1）接种环、接种针、试管口等使用__灼烧_________灭菌法； （2）玻璃器皿、金属用具等使用 干热 灭菌法。
（3）培养基、无菌水等使用 高压蒸汽 灭菌法，所用器械是 _高压蒸汽灭菌锅__________ 。
（4）表面灭菌和空气灭菌等使用__紫外线_________ 灭菌法。
7、对接种环灭菌时要用酒精灯的 __充分燃烧________ 层火焰灼烧可能伸入试管或培养皿的部位。
8、利用干热灭菌箱对玻璃器皿灭菌时物品不能摆得太挤，目的是 避免影响热空气流通 9、物品装入高压蒸汽灭菌锅灭菌后，要首先打开排气阀，煮沸并排除锅内冷空气，其目的是_____让锅内温度迅速升高______ ___________ ；随后关闭排气阀继续加热，气压升至 ________100k___ Pa，温度为__121_°C________ ，并维持 __15-30分钟_________；最后切断热源，使温度自然降温，气压务必降至___零________ 时打开锅盖，其目的是防止____容器内的液体会冲出容器，造成污染_。_____ ___________ 三、大肠杆菌的纯化培养
1、包括： 制备培养基 和 纯化大肠杆菌 两个阶段
2．制备牛肉膏蛋白胨固体培养基 步骤：
2.1 计算 ：
根据配方比例，计算100mL培养基各成分用量。
2024年人教版高中生物选修1专题2微生物培养和应用知识点总结
