DNA甲基化检测丨如何定量检测某DNA的甲基化水平?
关于DNA甲基化检测,有很多有趣有意思的资料,那么接下来就聊一聊DNA甲基化检测吧~
DNA甲基化检测是什么意思呢?它是指利用各种方法对肿瘤细胞DNA甲基化程度进行测定。在恶性肿瘤的发展中,甲基化的状态并不是一成不变,肿瘤细胞内全基因组的低甲基化程度与疾病进展、肿瘤大小和恶性程度都有密切的关系,DNA甲基化检测对肿瘤恶性程度的判断有重要意义。
所以DNA甲基化检测的临床意义,简言之就是可用于肿瘤的预测。
如何定量检测某DNA的甲基化水平呢?
1、DNA 5mC甲基化水平检测
以DNA甲基化5mC定量检测试剂盒(P-1026)为例,利用抗体结合和ELISA原理方式,定量分析DNA中5-mc。它可以直接检测哺乳动物,植物,真菌细菌,病毒,细胞,组织,血清/血浆以及其它体液中的总DNA样本的5-mc的甲基化程度。
2、DNA 5hmC甲基化水平检测
以BisulPlus Loci 5mC & 5hmC Detection PCR Kit(P-1067)为例,可鉴定并检测5hmC和5mC。此试剂盒操作简便,只需三步:
第一步:重亚硫酸盐转化待测DNA,未甲基化C转化为U,PCR扩增后转化为T,5mC不变,5hmC被转化为5-亚甲基磺酸胞嘧啶(CMS)
第二步: APOBEC脱氨酶催化亚硫酸盐转化后的DNA,将5mC转化为T,而CMS不变,PCR扩增后仍为C。
第三步:通过qPCR分析比较处理和未处理的DNA序列,实现对DNA 5mC&5hmC甲基化的定量和定位检测。
关于DNA甲基化检测,就介绍DNA 5mC甲基化水平检测和DNA 5hmC甲基化水平检测以上两种啦,欢迎讨论并提出意见~
文章来源:艾美捷科技