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过表达大鼠TIPE2基因重组腺病毒载体的构建

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过表达大鼠TIPE2基因重组腺病毒载体的构建

张有斌;余云生;沈振亚;周东明;

【期刊名称】《中国组织工程研究》 【年(卷),期】2014(018)011

【摘要】背景:TIPE2抗炎蛋白,通过对T细胞受体(TCR)和T细胞TOLL样受体信号途径实行负向调节,从而对适应性免疫和固有免疫起到负性调控作用,有效地维持机体内环境的稳定。目的:使用人工合成腺病毒载体构建能过表达大鼠TIPE2基因的重组腺病毒。方法:利用RT-PCR的方法,从大鼠淋巴细胞中扩增出大鼠TIPE2基因,克隆到穿梭质粒pShuttle-clontech的表达框中,然后将包含TIPE2的完整表达框,进一步亚克隆到黑猩猩来源的腺病毒包装载体AdC68,转染HEK 293A细胞,包装出重组腺病毒。并以其感染HEK293A细胞,采用western blotting方法检测TIPE2基因的表达水平。结果与结论:PCR扩增、酶切鉴定和测序结果表明,所获取的cDNA为TIPE2的蛋白编码基因,western blotting结果表明,重组腺病毒能可高效表达TIPE2基因。说明成功完成AdC68-TIPE2重组腺病毒的构建,该腺病毒载体,能稳定表达大鼠TIPE2基因。 【总页数】6页(P.1743-1748)

【关键词】组织构建;组织工程;器官移植;重组腺病毒Adc68;TIPE2基因;基因表达;转染;T细胞

【作者】张有斌;余云生;沈振亚;周东明; 【作者单位】;;;; 【正文语种】英文

过表达大鼠TIPE2基因重组腺病毒载体的构建

过表达大鼠TIPE2基因重组腺病毒载体的构建张有斌;余云生;沈振亚;周东明;【期刊名称】《中国组织工程研究》【年(卷),期】2014(018)011【摘要】背景:TIPE2抗炎蛋白,通过对T细胞受体(TCR)和T细胞TOLL样受体信号途径实行负向调节,从而对适应性免疫和固有免疫起到负性调控作用,有效地维持机体内环境的稳定。目的:
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