酶的研究与应用 蛋白质的提取和分离练习题
一 、酶的研究与应用
1．（2015春?沭阳县期中）如下是制备固定化酵母细胞的实验步骤，请回答：
酵母细胞的活化→配制CaCl2溶液→配制海藻酸钠溶液→海藻酸钠溶液与酵母细胞混合→固定化酵母细胞 （1）在缺水状态下，微生物处于休眠状态．活化就是让处于休眠状态的微生物重新恢复 正常的生活 状态，一般是将干酵母放在 蒸馏水 中进行活化．活化前应选择足够大的容器，因为酵母细胞活化时 体积会增大 ．
（2）影响实验成败的关键步骤是 配制海藻酸钠溶液 ．
（3）如果海藻酸钠浓度过低，形成的凝胶珠所包埋的酵母细胞数目 少 ．
（4）观察形成凝胶珠的颜色和形状，如果形成的凝胶珠不是圆形或椭圆形，说明 海藻酸钠浓度偏高，制作失败 ．
（5）固定化细胞技术一般采用包埋法固定化，原因是 细胞个体大，不易从包埋材料中漏出 ．
（6）该实验中CaCl2溶液的作用是 使胶体聚沉 ． （7）将海藻酸钠与酵母细胞混合时要等海藻酸钠 冷却至室温 ，再加入活化的酵母细胞． 2．（2015春?雨城区校级月考）工业生产果汁时，常常利用果胶酶破除果肉细胞壁以提高出果汁率。为研究温度对果胶酶活性的影响，某学生设计了如下实验：
①将果胶酶与苹果泥分装于不同试管，在10C水浴中恒温处理10min（如图A）。
②将步骤①处理后的果胶酶和苹果泥混合，再次在10℃水浴恒温处理10min（如图B）。 ③将步骤②处理后的混合物过滤，收集滤液，测量果汁量（如图C）。 ④在不同温度条件下重复以上实验步骤，并记录果汁量，结果如下表： 温度/℃ 出汁量/moL 10 8 20 13 30 15 40 25 50 15 60 12 70 11 80 10 0
根据上述实验，请分析并回答下列问题： （1）果胶酶能破除细胞壁，是因为果胶酶可以促进细胞壁中的 果胶 水解。
（2）实验结果表明，在上述8组实验中，当温度为 40℃ 时果汁量最多，此时果胶酶的活性 最高 。当温度再升高时，果汁量降低，说明 酶活性降低 。
（3）实验步骤①的目的是 避免果汁和果胶酶混合时影响混合物温度，从而影响果胶酶活性 。实验操作中，如果不经过步骤①的处理，直接将果胶酶和苹果泥混合，是否可以？请解释原因。 3．（2018?未央区校级模拟）果胶酶能分解果胶等物质，可以用来澄清果蔬饮料，在食品加工业中有着广泛的应用．回答下列问题：
（1）果胶酶是分解果胶的酶的总称，包括 多聚半乳糖醛酸酶 、果胶分解酶和 果胶酯酶 ．食品工业中之所以使用果胶酶澄清果蔬饮料，是因为果胶酶能破坏植物的 细胞壁 结构．
（2）微生物是生产果胶酶的优良生物资源．分离和筛选能产生果胶酶的微生物，使用的培养基应该以 果胶 为唯一碳源；为了纯化该生物，需要在 固体 （填“固体”或“液体”）培养基上接种菌种，最常用的接种方法有 平板划线法或稀释涂布平板法 ．
1
酶的研究与应用 蛋白质的提取和分离练习题
（3）在榨汁果汁前，要将果胶酶和果泥混匀保温，目的是提高出汁率；过滤后要用果胶酶处理果汁，目的是 使果汁变澄清 ．
（4）根据下表实验结果， 不能（填“能”或“不能”）确定40℃就是果胶酶的最适温度． 10 8 20 13 30 15 40 25 50 15 60 12 70 11 80 10 4．（2013?成都二模）果胶酶主要用于果胶的分解，在果汁的生产等方面被广泛应用． （1）霉菌发酵生产的果胶酶是食品加工业中使用量最大的酶制剂．某科研小组为了筛 选出果胶酶的高产菌株，进行了相关实验．
第一步：取样．如果你是该小组的成员，你最好从果园中的 土壤或腐烂的水果 中去取样分离产果胶酶的菌株． 第二步：制备培养基．筛选果胶酶高产菌株的培养基，主要营养成分有：水、果胶、硝酸 钾、高碘酸（果胶的降解产物可以溶于高碘酸而在培养基上形成透明圈）等．在该配方中，硝酸钾是微生物需要的 氮源和无机盐．为了便于分离纯化目的菌株，培养基中除了加入上述物质外，还必须加入 琼脂 ．培养基灭菌采用的最适方法是高压蒸汽灭菌 法．
0
第三步：培养及筛选．培养基上接种后，在30C恒温箱中培养48h，挑选出 周围形成透明圈最大 的菌落作为生产果胶酶的菌种．从筛选出的微生物中分离提取的果胶酶通常需要检测 酶的活性 ，以确定其应用价值．
（2）在利用筛选出的霉菌进行生产时，科研人员发现影响果胶酶生产的因素很多，并且 它们之间还可能相互影响．他们首先研究了温度对酶产量的影响，实验结果如图甲，然后又 分别研究了碳源、氮源浓度（各五个水平）对生产的影响，得到图乙和丙． ①科研人员在研究碳源浓度对酶产量的影响时，应设定的培养温度是 30℃ ，如果将温度控制在5．C，能否到的图乙所示图象： 不能 ，原因是温度太低导致酶的活性过低 ． ②在生产中他们根据上述研究结果，将各个变量都设定为最适条件，却发现酶的产量不 是最高的，要想继续探究最佳的培养条件，他们该如何进一步进行实验： 将各种影响因素的不同水平逐一组合，依次实验
．
5．（2010?浙江）“生物技术实践”模块 请在标有序号的空白处填空，并将序号及相应答案写在答题纸上。某同学进行苹果汁制作实验，工艺如图所示。
（1）图中用KMnO4的溶液浸泡苹果的目的是① 消毒 。黑曲霉提取液中含有的 ② 果胶酶 可水解果胶，从而使果汁澄清。固定化柱中填充的石英砂通过 ③ 吸附 方式将酶固定化，酶被固定在用蒸馏水洗涤固定化柱是为了除去 ④ 未被固定的酶等 。
（2）实验中，操作流程A和B的先后顺序为 ⑤ AB 。在苹果汁澄清过程中，应关闭的流
2
酶的研究与应用 蛋白质的提取和分离练习题
速调节阀是 ⑥ 阀1 。要测定从固定化柱流出的苹果汁中式否还有果胶，可取一定量的果汁与等量的 ⑦ 乙醇 混合，如果出现 ⑧ 浑浊 现象，说明果胶还没有被完全水解。为使果胶完全水解，应将流速调 ⑨ 慢 。
（3）试验后，将洗涤过的固定化柱在低温环境中保存若干天，该固定化柱仍可用于苹果汁制作实验，说明固定化酶可被⑩ 重复 使用。 6．（2014?南通二模）为了探究啤酒酵母固定化的最佳条件，科研人员研究了氯化钙浓度对固定化酵母发酵性能的影响，结果如图．请回答：
（1）与利用游离酵母生产啤酒相比，利用固定化酵母的优点有 可多次使用、便于产物分离、提高产品质量等 ．
（2）本实验结果表明，随氯化钙浓度中增大，凝胶珠机械强度增大，完整率 增加 ． （3）结合发酵性能分析，制备凝胶珠适宜的氯化钙浓度为 2.0mol/L ．当氯化钙浓度过高时，发酵液中的糖度升高，酒精度下降，发酵受到影响，原因是 凝胶珠机械强度过大，通透性降低，影响糖进入颗粒内部 ． （4）用海藻酸钠作载体包埋酵母细胞，溶解海藻酸钠时最好采用 小火间断加热 的方法，以防发生焦糊．溶化好的海藻酸钠溶液应 冷却至室温 后，再与已活化的酵母细胞充分混合．若海藻酸钠浓度过低，会导致 酵母细胞从颗粒中漏出 ，固定效果大大降低． 16．（2014春?盐城期末）为了进一步增强洗衣粉对血渍、奶渍、油污、土豆泥等衣物上常见污垢的去除能力，洗衣粉中常常会添加各种酶类．请回答有关问题：
（1）根据衣物上常见的污垢，加酶洗衣粉中添加的酶类有碱性蛋白酶、 （碱性）脂肪酶、淀粉酶、纤维素酶 ． （2）碱性蛋白酶能将血渍、奶渍等含有的大分子蛋白质水解成可溶性的 多肽（氨基酸） ． （3）图为加酶洗衣粉的包装袋上的产品说明，根据你所学习的有关知识，解释注意事项③的原因： 酶的催化受温度影响，30～50℃是洗衣粉中的酶适宜温度范围 （4）下面是添加脂肪酶的加酶洗衣粉和普通洗衣粉洗涤效果的有关探究实验，请据表回答： 脸盆编号 1 2 3 4 洗涤物 （等量） 油污布 油污布 油污布 油污布 洗涤 温度 45℃ 45℃ 5℃ 5℃ 洗衣粉 （等量） 加酶 普通 加酶 普通 水量 2L 2L 2L 2L 洗净所需 时间 4min 7min 9min 8min ①该实验设计体现了 单一变量、对照原则 原则． ②若1号实验组，洗净所需时间接近7分钟，请分析最可能的原因 洗衣粉中酶变性或失效 ．
（5）添加蛋白酶的加酶洗衣粉不适宜洗涤下列哪些衣料 ②④
①棉织品 ②毛织品 ③腈纶织品 ④蚕丝织品 ⑤涤纶织品 ⑥锦纶织品．
二、血红蛋白的提取和分离
3
酶的研究与应用+蛋白质的提取和分离练习题(教师)
