IGF-Ⅱ基因RNAi慢病毒载体构建与稳定转染细胞株建立

IGF－Ⅱ基因RNAi慢病毒载体构建与稳定转染细胞株建立

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杨翠英 罗佐杰

【摘 要】【摘要】目的 构建人的IGF－Ⅱ基因RNA干扰慢病毒载体并建立人肾上腺皮质瘤细胞株SW－13稳定转染细胞株。方法 根据人的IGF－Ⅱ基因序列，设计3条针对IGF－Ⅱ－shRNA序列，分别构建pLLU2G－shIGF－Ⅱ3个慢病毒载体。筛选出最有效沉默靶基因的shRNA后，将携带目的序列的慢病毒载体转染到293FT细胞中，感染人肾上腺皮质瘤细胞株SW－13，建立稳定转染细胞株。结果 设计的针对IGF－Ⅱ的序列中第3条的抑制效果最好，下调80%。以此目的序列构建稳定转染细胞株，对IGF－ⅡmRNA抑制率达95%。结论 成功构建表达人肾上腺皮质瘤IGF－Ⅱ－shRNA的慢病毒载体，它能有效沉默IGF－Ⅱ基因在人肾上腺皮质瘤细胞株SW－13中的表达并建立稳定转染细胞株。

【期刊名称】广西医学 【年(卷),期】2012(034)006 【总页数】4

【关键词】【关键词】IGF－Ⅱ;RNAi;SW－13;shRNA;慢病毒载体;转染细胞 肾上腺皮质癌(adrenal cortical carcinoma，ACC)是一种罕见且恶性程度极高的恶性肿瘤。目前对ACC的分子发病机制了解甚少。近年来有研究发现IGF－Ⅱ基因在ACC中存在过度表达，IGF－Ⅱ基因结构的异常及其过度表达在ACC尤其是恶性肿瘤的发病中起重要作用，与ACC恶性表型有关，其过度表达在ACC中被认为是最具特征的分子变更。最新的研究发现包括过度表达IGF－Ⅱ