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第六章 1微生物的代谢实验

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与分解代谢有关的生化实验(一)

1、了解各生化实验的原理

2、能配制相应的培养基,选用合适的指示剂 3、能准确判断结果,并进行表示 1、糖类发酵实验

2、甲基红试验(MR试验)

3、枸橼酸盐利用试验 4、吲哚试验(靛基质试验)

接种方法及结果判断

各实验原理

讲授为主

实验报告

强调微生物实验操作的注意事项

复习:相关理论知识

引入:不同种类的微生物能产生不同的酶类,因此,不同的微生物能够利用的营养物质是不同的。即使是针对相同的营养物质,不同的微生物有不同的利用方法(导致最终产物不同)。

人为的设计一些培养基和检测方法,可以比较方便的了解微生物的生理过程。

实验一 与分解代谢有关的生化试验 1、 糖类发酵实验

①培养基:葡萄糖发酵管、乳糖发酵管等 ②指示剂:溴甲酚紫 有机酸 气体 接种、培养

④方法:糖发酵管 观察结果 35℃,18~24h 葡萄糖发酵管配方: 牛肉膏 3g 蛋白胨 10g NaCl 5g 葡萄糖 5g 溴甲酚紫溶液 0.1ml 蒸馏水 1000ml

③原理:糖类 有机酸,pH ,指示剂由紫变黄

⑤结果判断和表示方法

? 黄色/无气体 —— A 或 + ? 黄色/有气体 —— AG 或 ⊕ ? 紫色 —— N 或 - 2、 甲基红试验(MR试验)

①培养基:葡萄糖蛋白胨水培养基(葡胨水) ②指示剂:甲基红

③原理:糖类 丙酮酸 有机酸,pH , 指示剂变色:由黄到红 ④结果判断和表示方法: 红色———————— +

3. 枸橼酸盐利用试验 枸橼酸盐培养基配方:

枸橼酸钠 2g NaCl 5g

橙黄色——————— -

磷酸二氢铵 1g MgSO4 0.2g 磷酸氢二钾 1g 溴麝香草酚兰溶液 3ml 琼脂 20g 蒸馏水 1000ml ①培养基:枸橼酸盐培养基 ②指示剂:溴麝香草酚蓝(BTB)

③原理:枸橼酸盐 碳酸盐,pH 指示剂变色,绿色 蓝色 ④结果判断和表示方法:

培养基颜色变蓝———————— + 培养基颜色不变(绿)————— —

4、吲哚试验(靛基质试验) 蛋白胨水培养基配方: 胰蛋白胨 20g NaCl 5g

蒸馏水 1000ml ①培养基:蛋白胨水培养基 ②指示剂:靛基质试剂 ③原理:

色氨酸 吲哚 + 靛基质试剂 ④结果判断和表示方法: 变红———————— + 颜色不变————— —

第六章 1微生物的代谢实验

与分解代谢有关的生化实验(一)1、了解各生化实验的原理2、能配制相应的培养基,选用合适的指示剂3、能准确判断结果,并进行表示1、糖类发酵实验2、甲基红试验(MR试验)3、枸橼酸盐利用试验4、吲哚试验(靛基质试验)
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