《生物分离工程》复习题一（第1~3章）
一、选择题
1、下列物质不属于凝聚剂的有（C）。
A、明矾 B、石灰 C、聚丙烯类 D、硫酸亚铁 2、发酵液的预处理方法不包括（C）
A. 加热 B絮凝 C.离心 D. 调pH
3、其他条件均相同时，优先选用哪种固液分离手段（B）
A. 离心分离 B过滤 C. 沉降 D.超滤 4、那种细胞破碎方法适用工业生产（A）
A. 高压匀浆 B超声波破碎 C. 渗透压冲击法 D. 酶解法 5、为加快过滤效果通常使用（C）
A.电解质 B高分子聚合物 C.惰性助滤剂 D.活性助滤剂 6、不能用于固液分离的手段为（C）
A.离心 B过滤 C.超滤 D.双水相萃取 7、下列哪项不属于发酵液的预处理： （D ）
A.加热 B.调pH C.絮凝和凝聚 D.层析
8、能够除去发酵液中钙、镁、铁离子的方法是（C）
A． 过滤 B． 萃取 C． 离子交换 D． 蒸馏 9、从四环素发酵液中去除铁离子，可用（B）
A． 草酸酸化 B． 加黄血盐 C． 加硫酸锌 D． 氨水碱化 10、盐析法沉淀蛋白质的原理是（B）
A.降低蛋白质溶液的介电常数 B.中和电荷，破坏水膜 C.与蛋白质结合成不溶性蛋白 D.调节蛋白质溶液pH到等电点 11、使蛋白质盐析可加入试剂（ D）
A：氯化钠；B：硫酸；C：硝酸汞；D：硫酸铵 12、盐析法纯化酶类是根据（B）进行纯化。
A.根据酶分子电荷性质的纯化方法 B.调节酶溶解度的方法
C.根据酶分子大小、形状不同的纯化方法 D.根据酶分子专一性结合的纯化方法 13、盐析操作中，硫酸铵在什么样的情况下不能使用（B）
A.酸性条件 B碱性条件 C.中性条件 D.和溶液酸碱度无关 14、有机溶剂沉淀法中可使用的有机溶剂为（D）
A.乙酸乙酯 B正丁醇 C.苯 D.丙酮 15、有机溶剂为什么能够沉淀蛋白质（B）
A.介电常数大 B介电常数小 C.中和电荷 D.与蛋白质相互反应 16、蛋白质溶液进行有机溶剂沉淀，蛋白质的浓度在（ A）范围内适合。
A. 0.5％～2％ B1％～3％ C. 2％～4％ D. 3％～5％
17、生物活性物质与金属离子形成难溶性的复合物沉析，然后适用（C ）去除金属离子。
A. SDS B CTAB C. EDTA D. CPC
1
18、单宁沉析法制备菠萝蛋白酶实验中，加入1%的单宁于鲜菠萝汁中产生沉淀，属于(D )沉析原理。
A盐析 B有机溶剂沉析 C等电点沉析 D有机酸沉析 19、当向蛋白质纯溶液中加入中性盐时，蛋白质溶解度（C ）
A、增大 B、减小 C、先增大，后减小 D、先减小，后增大
20、将四环素粗品溶于pH2的水中，用氨水调pH4.5—4.6，28－30℃保温，即有四环素沉淀结晶析出 。此沉淀方法称为（B）
A、有机溶剂结晶法 B、等电点法 C、透析结晶法 D、盐析结晶法
21、将配基与可溶性的载体偶联后形成载体-配基复合物，该复合物可选择性地与蛋白质结合，在一定条件下沉淀出来，此方法称为（A）
A、亲和沉淀 B、聚合物沉淀 C、金属离子沉淀 D、盐析沉淀 22、在一定的pH和温度下改变离子强度（盐浓度）进行盐析，称作(A)
A、KS盐析法 B、β盐析法 C、重复盐析法 D、分部盐析法
23、某蛋白在硫酸铵饱和度为60%时可完全沉淀。现有该蛋白水溶液10mL，欲使该蛋白完全沉淀，应加入饱和硫酸铵溶液（B）mL。
A、10 B、15 C、20 D、25
24、关于非离子多聚物沉淀蛋白的原理，下列说法错误的是（B）
A、沉淀作用是聚合物与生物大分子发生共沉淀作用。
B、由于聚合物有较强的疏水性，使生物大分子脱水而发生沉淀。
C、聚合物与生物大分子之间以氢键相互作用形成复合物，在重力作用下形成沉淀析出。 D、通过空间位置排斥，使液体中生物大分子被迫挤聚在一起而发生沉淀。 25、关于核酸沉淀，下列说法正确的是（D）。
A、在核酸提取液中加入氯仿/异戊醇或氯仿/辛醇，振荡一段时间，使核酸在氯仿/水界面上
形成凝胶状沉淀而蛋白质留在水溶液中。
B、在对氨基水杨酸等阴离子化合物存在下，核酸的苯酚水溶液提取液中，蛋白质进入水层，
而DNA和RNA沉淀于苯酚层中被分离除去。
C、在DNA与RNA的混合液中，用异丙醇选择性地沉淀RNA而与留在溶液中的DNA分
离。
D、由于核酸都不溶于有机溶剂，所以可在核酸提取液中加入乙醇、异丙醇或2-乙氧基乙醇，
使DNA或RNA沉淀下来。
26、过滤的透过推动力是（D）。
A.渗透压 B.电位差 C.自由扩散 D.压力差
27、在Cohn方程中，logS=β-KsI中，盐析常数Ks反映（C）对蛋白质溶解度的影响。 A.操作温度 B.pH值 C.盐的种类 D.离子强度
28、在Cohn方程中，logS=β-KsI中，β常数反映（B）对蛋白质溶解度的影响。 A.无机盐的种类 B.pH值和温度 C.pH值和盐的种类 D.温度和离子强度 29、在相同的离子强度下，不同种类的盐对蛋白质盐析的效果不同，一般离子半径（A）效果好。 A.小且带电荷较多的阴离子 B.大且带电荷较多的阴离子 C.小且带电荷较多的阳离子 D.大且带电荷较多的阳离子
2
30、下列关于固相析出说法正确的是（ B ）
A.沉淀和晶体会同时生成 B析出速度慢产生的是结晶 C.和析出速度无关 D.析出速度慢产生的是沉淀
二、填空题
1、Cohn方程logS=β-KsI中，Ks越 大 ，β值越 小 ，盐析效果越好。 2、固液分离的主要方法有 离心 和 过滤 。
3、对发酵液进行预处理方法主要有 加热法、 调节PH值、 凝聚和絮凝 、使用惰性助助滤剂、加入反应剂 。
4、根据过滤机理的不同，过滤操作可分为 澄清过滤 和 滤饼过滤 两种类型 5、盐析的操作方法有 加入固体盐 、 加入饱和溶液法 、 透析平衡法。
6、核酸的沉淀方法主要有 有机溶剂沉淀法、 等电点沉淀发、 钙盐沉淀法、 溶剂沉淀法。 7、蛋白质胶体溶液的稳定性主要靠 蛋白质分子间静电排斥作用、蛋白质周围的水化层 等因素稳定。
8、为使过滤进行的顺利通常要加入 惰性助滤剂。
9、典型的工业过滤设备有 半框压滤机 和 真空转鼓过滤机 。 10、常用的蛋白质沉析方法有 盐析、 等电点 和 有机溶剂 。
三、其他题型
1、什么是生物技术下游加工过程？
从发酵液或酶反应液或动植物细胞培养液中提取、分离、纯化、富集生物产品的过程。 2、针对分离对象而言，生物分离过程有何特点？
1）发酵液或培养液是产物很低的水溶液;2）培养液是多组分的混合物；3）生化产品的稳定性差；4）对最终产品质量要求高
3、生物分离工程的一般步骤是什么？各步骤中的单元操作主要有哪些？
1）发酵液的预处理与固-液分离，主要操作有：加热、调节PH、沉降、过滤、错流过滤、均质化研磨、溶胞、萃取；2）初步纯化，主要步骤：沉淀、吸附、萃取、超滤；3）高度纯化，主要步骤：层析、离子交换、亲和、疏水、吸附、电泳；4）成品加工，主要步骤：无菌过滤、超滤、冷冻干燥、喷雾干燥、结晶。 4、生物分离过程的选择准则是什么？
1）采用步骤数应最少，2）步骤的次序要相对合理，3）适应产品的技术规格，4）生产规格，5）进料组成，6）产品形成，7）产品的稳定性，8）物性，9）环保和安全要求，10）生产方式 5、通过本课程的学习，谈谈你对生物技术下游加工过程今后发展动向的理解。
将会加强基础理论研究，传统分离技术的提高和完善，新技术的研究与开发，生物技术下游工程与上游工程相结合，强化物理化学作用的影响，生物分离过程的高效集成化，清洁生产。随着商业竞争的增多和生产规模的扩大，产品的竞争优势最终归结为低成本和高纯度，所以成本的控制盒质量控制是生物技术下游加工过程发展的动力和方向。
6、在进行产品的分离纯化制备之前，为什么要对发酵液进行预处理？
由于所需的产品在培养液和菌体中浓度很低，并与许多杂质在一起，同时发酵液或生物溶液又属于非牛顿性流体，所以必须进行预处理。
3
7、什么是封头过滤？什么是错流过滤？
一般过滤中，滤液的流动方向与滤饼基本垂直，称为封头过滤。如果料液给过滤介质表面一个平行的大流量冲刷，则过滤介质表面积积累的滤饼就会减少到可以忽略的程度，而通过过滤介质的流速则比较小，这种过滤方式称作错流过滤。
8、发酵液预处理中，凝聚和絮凝的作用机理有何不同？
凝聚指在投加化学物质作用下，胶体脱稳并使小粒子聚集成1mm大小状凝聚体的过程，机理：中和粒子表面电荷、消除双电层结构、破坏水化膜。
絮凝指在某些高分子剂存在下，絮凝剂存在下，基于架桥作用，使胶粒形成较大絮凝团的作用，机理：架桥作用。
9、中性盐沉淀蛋白质的基本原理是什么？
蛋白质和酶均易溶于水，分子中的-COOH、-NH2和-OH等亲水基团，与极性分子相互作用形成水化层，包围于蛋白质分子周围形成亲水胶体，削弱了蛋白质分子之间的作用力，蛋白质分子表面极性基团越多，水化层越厚，蛋白质分子与溶剂分子之间的亲和力越大，因而溶解度也越大。 10、硫酸铵是蛋白质盐析中最常用的盐类，为什么？
因为硫酸铵溶解度大、分离效果好，不易引起变性，有稳定酶和蛋白质结构的作用，价格便宜，废液不污染环境。
《生物分离工程》复习题二（第4~5章）
一、选择题
1、以下哪项不是在重力场中，颗粒在静止的流体中降落时受到的力（ B ）
A.重力 B. 压力 C.浮力 D. 阻力
2、颗粒与流体的密度差越小，颗粒的沉降速度（A ）
A.越小 B.越大 C.不变 D.无法确定
3、等密度区带离心的密度梯度中最大密度（A）待分离的目标产物的密度。
A.大于 B.小于 C.等于 D.以上均可
4、差速区带离心的密度梯度中最大密度（B）待分离的目标产物的密度。
A.大于 B.小于 C.等于 D.以上均可
5、以下各物质可用于密度梯度离心介质的是（D）。
A.蔗糖 B.聚蔗糖 C.氯化铯 D.以上均可
6、针对配基的生物学特异性的蛋白质分离方法是（C ）。
A.凝胶过滤 B.离子交换层析 C.亲和层析 D.纸层析 7、用于蛋白质分离过程中的脱盐和更换缓冲液的色谱是（ C ）
A．离子交换色谱 B.亲和色谱 C.凝胶过滤色谱 D.反相色谱 8、蛋白质分子量的测定可采用（ C ）方法。
A．离子交换层析 B.亲和层析 C.凝胶层析 D.聚酰胺层析 9、凝胶色谱分离的依据是（ B ）。
A、固定相对各物质的吸附力不同 B、各物质分子大小不同
C、各物质在流动相和固定相中的分配系数不同 D、各物质与专一分子的亲和力不同 10、下列哪一项是强酸性阳离子交换树脂的活性交换基团（ A ）
4
A 磺酸基团（-SO3 H） B 羧基-COOH C 酚羟基C6H5OH D 氧乙酸基-OCH2COOH 11、依离子价或水化半径不同，离子交换树脂对不同离子亲和能力不同。树脂对下列离子亲和力排列顺序正确的有（ A）。
A、Fe3+﹥Ca2+﹥Na+ B、Na+﹥Ca2+﹥Fe3+ C、Na+﹥Rb+﹥Cs+ D、Rb+﹥Cs+﹥Na+ 12、如果要将复杂原料中分子量大于5000的物质与5000分子量以下的物质分开选用（D ）。
A、Sephadex G-200 B、Sephadex G-150 C、Sephadex G-100 D、Sephadex G-50 13、离子交换法是应用离子交换剂作为吸附剂，通过（A ）将溶液中带相反电荷的物质吸附在离子交换剂上。
A、静电作用 B、疏水作用 C、氢键作用 D、范德华力 14、阴离子交换剂（ C ）。
A、可交换的为阴、阳离子 B、可交换的为蛋白质 C、可交换的为阴离子 D、可交换的为阳离子 15、洗脱体积是（ C ）。
A、凝胶颗粒之间空隙的总体积 B、溶质进入凝胶内部的体积
C、与该溶质保留时间相对应的流动相体积 D、溶质从柱中流出时所用的流动相体积 16、工业上强酸型和强碱型离子交换树脂在使用时为了减少酸碱用量且避免设备腐蚀，一般先将其转变为（ B）。
A、钠型和磺酸型 B、钠型和氯型 C、铵型和磺酸型 D、铵型和氯型 17、吸附色谱分离的依据是（ A）。
A、固定相对各物质的吸附力不同 B、各物质分子大小不同
C、各物质在流动相和固定相的分配系数不同 D、各物质与专一分子的亲和力不同 18、下面哪一种是根据酶分子专一性结合的纯化方法（A ）。
A. 亲和层析 B. 凝胶层析 C. 离子交换层析 D. 盐析 19、酚型离子交换树脂则应在（ B）的溶液中才能进行反应
A. pH＞7 B pH＞9 C. pH﹤9 D. pH﹤7
20、羧酸型离子交换树脂必须在（ C）的溶液中才有交换能力
A. pH＞5 B pH﹤7 C. pH＞7 D. pH﹤5 21、离子交换树脂使用（ B ）进行溶胀
A.水 B乙醇 C.氢氧化钠 D.盐酸
22、下列关于离子交换层析洗脱说法错误的是（D ）
A. 对强酸性树脂一般选择氨水、甲醇及甲醇缓冲液等作洗脱剂 B弱酸性树脂用稀硫酸、盐酸等作洗脱剂 C. 强碱性树脂用盐酸-甲醇、醋酸等作洗脱剂
D. 若被交换的物质用酸、碱洗不下来，应使用更强的酸、碱 23、离子交换用的层析柱直径和柱长比一般为（ B）之间
A. 1：10-1：20 B1：10-1：50 C. 1：10-1：30 D. 1：20-1：50 24、通过改变pH值从而使与离子交换剂结合的各个组分被洗脱下来，可使用（A ）
A. 阳离子交换剂一般是pH值从低到高洗脱 B阳离子交换剂一般是pH值从高到低洗脱 C. 阴离子交换剂一般是pH值从低到高 D. 以上都不对
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生物分离工程复习题一第1-9章16K含答案
