人脐带血间充质干细胞的分离培养及增殖及增殖能力
闫曼;杨依勇;秦书俭;郑德宇
【期刊名称】《中国组织工程研究》 【年(卷),期】2010(014)010
【摘要】背景:随年龄的增加,骨髓来源的间充质干细胞在数量和质量上均受到影响,并对供体损伤较大,寻找替代的间充质干细胞来源成为研究热点,而脐带血中是否含有间充质干细胞仍存在争议.目的:拟从人脐带血中分离培养间充质干细胞,并对其生物学特性进行检测.方法:无菌条件下,应用Percoll密度梯度离心法分离脐血标本,收获中间层细胞,加入含胎牛血清、青霉素和链霉索、L-谷氨酰胺的DMEM基础培养液,再经反复贴壁纯化,除去悬浮生长细胞,得到较多呈融合状态的贴擘细胞,待细胞达60%～80%融合时胰酶消化传代.分别取第1,5,9代细胞,观察细胞形态变化,流式细胞仪检测细胞表面抗原的表达,绘制细胞生长曲线,MTT法检测细胞活性.结果与结论:分离的脐血间充质干细胞大小均匀,呈梭形或星形的成纤维细胞样细胞.第1,5,9代脐带血间充质干细胞高表达CD29,CD105和CD166,低表达CD34和CD45:接种后5 d细胞进入指数增生期,9 d后数量减少,群体倍增时间为(53.5±8.32)h;细胞生长状态良好,在细胞活力方面1～7代摹本相似(P＞0.05),至第9代细胞增殖活力稍下降,但仍无明显差异(P＞0.05).结果证实可在体外成功从脐血中分离培养出间充质干细胞,第1～9代细胞均具有良好的增殖能力. 【总页数】4页(1739-1742)
【关键词】细胞周期;生长增殖;活性;脐血;间充质干细胞 【作者】闫曼;杨依勇;秦书俭;郑德宇
【作者单位】辽宁医学院附属一院手外科,辽宁省锦州市121001;辽宁医学院解剖学教研室,辽宁省锦州市121001;辽宁医学院解剖学教研室,辽宁省锦州市121001;辽宁医学院解剖学教研室,辽宁省锦州市121001 【正文语种】中文 【中图分类】R394.2 【相关文献】
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人脐带血间充质干细胞的分离培养及增殖及增殖能力
