临床检验生物化学习题及答案
4.酶 浓度 测定方法分为绝对定量法与相对定量法两大类。绝对定量法就是直接测定酶蛋白量或酶摩尔浓度。相对定量法就是根据酶的催化活性或酶促反应速度来间接测定酶浓度的方法。目前临床上所用的方法多属相对定量法。
5. 在酶活性测定时,如果底物或产物不能直接测定或难于准确测定,可采用酶偶联法测定,即在反应体系中加入一个或几个工具酶,将待测酶生成的某一产物转化为新的可直接测定的产物,当加入酶的反应速度与待测酶反应速度达到平衡时,指示酶的反应速度即代表待测酶的活性 。
6.临床同工酶的分析方法有 电泳法、免疫分析法、 色谱法、动力学分析法、蛋白酶
水解法 。
7.体液中酶浓度测定时,要控制的主要影响因素包括 标本及标本采集与处理因素、试剂及方法学因素、仪器及操作因素,以及最适测定条件选择与条件的优化。 8. 测定酶浓度的样本来自不同的组织与器官,但以血清与血浆最为常用,特别就是血清,既可避免抗凝剂的影响,又可防止抗凝时因振摇所致的溶血。 临床酶学测定之前,标本的采集、处理与贮存应注意:防止 溶血、合理使用抗凝剂、适宜的温度、减少副反应干扰。此外,采集各种体液样本的器皿质地与洁净度,采血部位,以及血清中过量的胆红素、脂质,样品制备过程中的振摇等,均影响酶活性测定。 9. 用自动生物化学分析仪测定酶活性,通常采用公式进行计算。当条件固定时, 理论 K 值为常数。 由于仪器等诸多因素的影响, 在临床实际工作中,均需用校准物 定期检查与校正实际测定 K 值。
10. 转氨酶的测定方法有许多种,以往多用比色法如赖氏法 (Reitman-Frankel) 、金氏法 (King) 与改良穆氏法 (Mohun) ,其中以赖氏法最常用,由于此法操作简便、经济,一些小型实验室仍在使用。目前,国内外实验室多采用IFCC推荐的连续监测方法对 ALT 进行测定。
ALT主要用于肝脏疾病的诊断。 由于肝细胞中ALT浓度比血液高约7000倍,只要有1/1000肝细胞中的ALT进入血液就足以使血中ALT升高1倍,故此酶就是 反映 肝损伤的一个很灵敏指标。 但应特别注意的就是,重症肝炎时由于大量肝细胞坏死,
临床检验生物化学习题及答案
血中ALT可仅轻度增高,临终时常明显下降,但 胆红素却进行性升高,出现所谓“酶胆分离”现象,常就是肝坏死的前兆。
11. CK 的测定方法有比色法、紫外分光光度法与荧光法等。由于以磷酸肌酸为底物的逆向反应速度为正向反应速度的6倍,所以采用逆向反应进行测定较为普及。如肌酸显色法与酶偶联法,其中后者最常用,为国内外测定 CK 的参考方法。CK 同工酶 多用电泳与免疫抑制法测定,但两法均会受溶血与巨CK的干扰,免疫抑制法还会受到CK-BB的干扰。因此现在推荐用免疫化学方法直接测定 CK-MBmass ,可不受溶血与巨CK的干扰。CK 同工酶亚型 (CK-MM 亚型 与 CK-MB亚型 )多用琼脂糖凝胶高压电泳与等电聚焦电泳等。
CK 及其同工酶与亚型就是目前临床上测定次数最多的酶,主要用于心肌、骨骼肌与脑疾患的诊断与鉴别诊断及预后判断。
12. ACP 的测定多就是利用磷酸苯二钠法与磷酸对硝基酚法等在酸性条件下测定 ACP 。国外多推荐使用磷酸百里酚酞为底物的比色法,因为前列腺ACP对此底物亲合力高,测定结果基本能反映ACP含量高低。不同方法参考值也不同。此外还可通过用 L- 酒石酸这类抑制剂鉴别与估量 PAP 活性。由于 ACP 不稳定,酶活性测定困难,目前已发展一些免疫学方法特异而灵敏地测定 ACP 特别就是 PAP 。 总ACP升高可作为前列腺癌、骨疾病或网状内皮系统疾病的诊断指标。
13. 临床上测定血液AMY主要用于诊断急性胰腺炎,常在腹痛后 2～3 h 开始升高(也有延至12 h 后升高者),多在12～24 h 达峰值,2～5 d 恢复正常。 峰 值 一般为4 ULN～ 6 ULN ,最高可达40倍。此值愈高,急性胰腺炎的可能性就愈大, 但 高低与疾病预后关系不大,但 若持续性升高达数周,常提示胰腺炎有反复,或有并发症发生。尿 AMY 约于发病后12～24 h 开始升高,下降也比血液 AMY 慢,因此在急性胰腺炎后期测定尿 AMY 更有价值。
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唾液腺疾病如腮腺炎患者血AMY也可升高,但临床 表现迥异 ,且主要为S-AMY升高,有别于胰腺炎以P-AMY升高为主。
第二章 生物化学检验中的诊断酶学参考答案
一、单项选择题 (A 型题 )
1 . A 2. B 3. B 4. D 5. B 6. C 7. B 8. C 9. B 1 0. E
1 1. D 12. D 13. B 14. B 15. A 16. D 1 7 . B 1 8 . D 19. E 20. B
21.C 22. B 23. A 24. E 25. E 26. B 27. A 28. B 29. C 30. A
31. D 32. A 33. C 二、多项选择题 ( B型题 )
1.E 2.D 3. C 4.A 5.E 6.B 三、多项选择题 (X 型题 )
1 . ABCD 2 . ABE 3 . ABDE 4 . ABCD 5 . ABC 6 . ABCD
7 . AD 8 . ABDE 9 . ABCD 10 . ACDE 11 . BCDE 12 . ABE 13 . AE
四、名词解释
1.酶就是一种由活细胞产生,具有高度专一性、高度催化活性的物质 ,又称为生物催化剂 ,主要就是蛋白质。
2.血浆固有酶指属血浆蛋白的固有成分,在血浆中发挥特定催化作用的一类酶,也称血浆特异酶。
3.酶失活至原来活性一半时所需时间称为酶的半寿期(t 1/2 )。半寿期可用来代表酶从血中清除的快慢。
4.连续监测法就是指每隔一定时间(2～60s),连续多次测定酶反应过程中某一反应产物或底物量随时间变化的数据,求出酶反应初速度,间接计算酶活性浓度的方法。 5.在酶学分析中,作为试剂用于测定化合物浓度或酶活性浓度的酶称为工具酶。
临床检验生物化学习题及答案
6.酶活性IU定义为:在特定条件下, 1 min能转化1 m mol底物 的酶量,即 1IU=1 m mol、min -1 。目前国内外大多数临床实验室常省略国际二字,即将IU简写为 U。
7.同一种属中由不同基因或等位基因所编码的多肽链单体、纯聚体或杂化体,具有相同的催化作用,但其分子构成、空间构象、理化性质、生物学性质以及器官分布或细胞内定位不同的一组酶称为同工酶。
8.底物启动模式就是指样品先与缺乏某种底物的试剂1预孵育一定时间后,再加入含这种底物的试剂2,启动样品中的待测酶的酶促反应。 五、问答题
1.V=Vm[s]/(Km+[s])= Vm*3Km /(Km+3Km)=3/4Vm=0、75Vm,即V/Vm=0、75。 2. 正常血浆中酶的动态变化特点:①正常血浆酶根据酶的来源及其在血浆中发挥催化功能的情况,可将血浆酶分成血浆特异酶与非血浆特异酶两大类,非血浆特异酶可进一步分为外分泌酶、细胞内酶与其她酶。②一般认为,血液中酶的清除方式与其她血浆蛋白质类似,但就是具体清除途径尚未完全明了。血浆酶主要在血管内失活或分解,尿液则就是小分子酶排出的途径。
影响酶浓度的因素包括 影响正常血浆酶含量的自身因素与生物学因素,前者主要有细胞内外酶浓度的差异、酶的相对分子量、酶的组织分布、酶在细胞内的定位与存在形式、酶的半寿期等;后者主要就是性别、年龄、食与药物、运动、妊娠与分娩、体位改变、昼夜变化及家庭因素等。
3.血浆酶的病理性变化主要包括酶合成异常、酶释放增加、酶清除异常等。酶合成异常包括合成减少与合成增多。酶从病变(或损伤)细胞中释放增加就是疾病时大多数血清酶增高的主要机制。炎症、缺血、坏死、创伤与肿瘤等就是细胞释放大分子酶蛋白的重要原因。此外,血液含抑制物、代谢紊乱、药物、遗传性酶缺陷等原因也可致酶活性下降。
4.酶 浓度 测定方法分为绝对定量法与相对定量法两大类。绝对定量法就是直接测定酶蛋白量或酶摩尔浓度。相对定量法就是根据酶的催化活性或酶促反应速度来间接测定酶浓度的方法。目前临床上所用的方法多属相对定量法。
临床检验生物化学习题及答案
5. 在酶活性测定时,如果底物或产物不能直接测定或难于准确测定,可采用酶偶联法测定,即在反应体系中加入一个或几个工具酶,将待测酶生成的某一产物转化为新的可直接测定的产物,当加入酶的反应速度与待测酶反应速度达到平衡时,指示酶的反应速度即代表待测酶的活性 。
6.临床同工酶的分析方法有 电泳法、免疫分析法、 色谱法、动力学分析法、蛋白酶
水解法 。
7.体液中酶浓度测定时,要控制的主要影响因素包括 标本及标本采集与处理因素、试剂及方法学因素、仪器及操作因素,以及最适测定条件选择与条件的优化。 8. 测定酶浓度的样本来自不同的组织与器官,但以血清与血浆最为常用,特别就是血清,既可避免抗凝剂的影响,又可防止抗凝时因振摇所致的溶血。 临床酶学测定之前,标本的采集、处理与贮存应注意:防止 溶血、合理使用抗凝剂、适宜的温度、减少副反应干扰。此外,采集各种体液样本的器皿质地与洁净度,采血部位,以及血清中过量的胆红素、脂质,样品制备过程中的振摇等,均影响酶活性测定。 9. 用自动生物化学分析仪测定酶活性,通常采用公式进行计算。当条件固定时, 理论 K 值为常数。 由于仪器等诸多因素的影响, 在临床实际工作中,均需用校准物 定期检查与校正实际测定 K 值。
10. 转氨酶的测定方法有许多种,以往多用比色法如赖氏法 (Reitman-Frankel) 、金氏法 (King) 与改良穆氏法 (Mohun) ,其中以赖氏法最常用,由于此法操作简便、经济,一些小型实验室仍在使用。目前,国内外实验室多采用IFCC推荐的连续监测方法对 ALT 进行测定。
ALT主要用于肝脏疾病的诊断。 由于肝细胞中ALT浓度比血液高约7000倍,只要有1/1000肝细胞中的ALT进入血液就足以使血中ALT升高1倍,故此酶就是 反映 肝损伤的一个很灵敏指标。 但应特别注意的就是,重症肝炎时由于大量肝细胞坏死, 血中ALT可仅轻度增高,临终时常明显下降,但 胆红素却进行性升高,出现所谓“酶胆分离”现象,常就是肝坏死的前兆。
11. CK 的测定方法有比色法、紫外分光光度法与荧光法等。由于以磷酸肌酸为底物的逆向反应速度为正向反应速度的6倍,所以采用逆向反应进行测定较为普及。如
临床检验生物化学习题及答案
