HPLC法测定黄芪药材中毛蕊异黄酮葡萄糖苷的含量

由天下分享时间：2024/12/23 15:45:12 加入收藏我要投稿点赞

阮佳佳1.林灵超2

【摘要】摘要:采用HPLC法测定了黄芪药材中毛蕊异黄酮葡萄糖苷的含量。以FL2200－II为高效液相色谱仪.采用Ultimate XB－C18色谱柱.流动相乙腈－0.2%甲酸溶液(20∶80).检测波长260 nm.流速1.0 mL/min。毛蕊异黄酮葡萄糖苷在0.5～50 μg/mL内线性良好.R2=0.9999;测得某黄芪药材中毛蕊异黄酮葡萄糖苷平均含量为31.86%.平均加标回收率99.55%.RSD为0.98%。利用反相高效液相色谱对黄芪药材中毛蕊异黄酮葡萄糖苷进行含量测定.方法简便.准确度高.重现性好.可应用于毛蕊异黄酮葡萄糖苷的含量测定。【期刊名称】广州化工【年(卷),期】2012(040)012 【总页数】2

【关键词】关键词:HPLC法;黄芪;毛蕊异黄酮葡萄糖苷黄

芪

为

豆

科

植

物

蒙

古

黄

芪

Astragalus

membranaceus(Fisch.)Bge.var.mongholicus(Bge.)Hsiao 或膜荚黄芪 Astragalus membranaceus(Fisch.)Bge.的干燥根.具有补气升阳.固表止汗.利水消肿、生津养血.行滞通痹.托毒排脓.敛疮生肌等功效［1］。化学成分研究表明.黄芪药材主要含皂苷类、黄酮及其苷类和多糖类成分［2］.其中黄酮类成分中以毛蕊异黄酮葡萄糖苷最为活性较高.有抗病毒、抗菌、降血脂、抗氧自由基等作用.还具有抗缺血和改善血象作用［3］。

实验参照了相关资料［4－6］.在通过对色谱方法的摸索后.建立了等度分析黄芪中的毛蕊异黄酮葡萄糖苷.分析方法简单.可进行对黄芪中的毛蕊异黄酮葡萄糖

苷的分析检测。

1 仪器与试剂

FL2200－II高效液相色谱仪.浙江福立分析仪器有限公司;色谱柱(Ultimate XB －C18/4.6×250 mm.5 μm).浙江福立分析仪器有限公司;HS2060超声波清洗器.浙江福立分析仪器有限公司;JA2004型电子分析天平.上海雷韵公司。乙腈(色谱纯).美国进口;水为超纯水;甲酸(分析纯).国药集团;对照品:毛蕊异黄酮葡萄糖苷(纯度:98%).美国进口;黄芪药材.市购。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱为 Ultimate XB －C18/4.6 mm ×250 mm.5 μm.流动相为乙腈∶0.2%甲酸=20∶80.流速为1.0 mL/min.检测波长为260 nm.柱温30℃.进样量20 μL。

2.2 对照品溶液的配制

精密称取毛蕊异黄酮葡萄糖苷对照品适量.精密称定.以甲醇制成每1 mL含50 μg的溶液.过滤.备用。 2.3 供试品溶液的配制

取某黄芪药材粉末约1 g.精密称定.置于圆底烧瓶中.精密加入甲醇50 mL.称定重量.加热回流4 h.放冷.再称定重量.用甲醇补足减失的重量.摇匀.滤过.精密量取滤液25 mL.回收溶剂至干.残渣加甲醇溶解.转移至5 mL两瓶中.加甲醇至刻度.摇匀.过滤.备用。

2.4 对照品与样品的溶液分析

在上述色谱条件下.进行对照品溶液和样品溶液的分析.色谱图如图1。

2.5 精密度测试试验

取50 μg/mL对照品溶液.于上述色谱条件下进行进样.进样量为20 μL.重复操作6次.测得平均保留时间为13.8 min.RSD 为 1.05%;平均峰面积为3456123.5.RSD 为0.883%。 2.6 标准曲线的建立

分别移取 0.1 mL、0.5 mL、1.0 mL、2.0 mL、5.0 mL 对照品溶液.置于10 mL白容量瓶中.以流动相稀释至刻度.摇匀.过滤。于上述色谱条件下进样。后以峰面积为纵坐标.标样浓度为横坐标.绘制标准曲线.见图2。

由上述标准曲线可知.曲线方程为y=69478x－14478.R2=0.9999.在0.5 ～50 μg/mL 范围内线性良好。 2.7 供试品含量测定