Agilent 1260（四元泵）高效液相色谱仪
使用、清洁及维护保养操作规程
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Agilent 1260（四元泵）高效液相色谱仪
使用、清洁及维护保养操作规程
1目的
建立1260（四元泵）高效液相色谱仪使用、清洁及维护保养操作规程，规范人员操作。 2 适用范围
适用于Agilent（四元泵）高效液相色谱仪的使用与维护。 3 责任与监督
检验人员负责执行本规程，部门负责人监督本规程的实施。 4 规程细则 4.1仪器原理
高效液相色谱法系采用高压输液泵将规定的流动相泵入装有填充剂的色谱柱，对供试品进行分离测定的色谱方法。注入的供试品，由流动相带入色谱柱内，各组分在柱内被分离，并进入检测器检测，由积分仪或数据处理系统记录和处理色谱信号。 4.2仪器操作 4.2.1系统组成：
本系统由四元梯度泵、VWD检测器、自动进样器、柱温箱及Openlab Chemstation工作站和台式电脑等组成。
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4.2.2操作前准备： 4.2.2.1流动相的选择
分类：组成分——单组分和多组分
极性-极性、弱极性、非极性
常用溶剂：甲醇、水、乙腈、乙醇、乙酸乙酯、四氯化碳等。 （溶剂最好为HPLC级，水为纯化水）
其中多采用二元或多元组合溶剂作为流动相，通过调节各组分的比例改变流动相的极性，已达到最佳的分离效果，对于部分情况还可以加入缓冲盐，调节出峰时间和达到改善峰型的效果。
4.2.2.2流动相的选择
为了除去流动相中的杂质，保护系统和色谱柱，在流动相使用完，装入新的溶剂前应使用抽滤瓶对溶剂进行过滤。
4.2.2.3流动相的超声与脱气
为了除去溶解在流动相中的气泡，降低基线噪音，在HPLC开机前应把各溶剂瓶在超声机中超声10-15min左右。
对于溶解在流动相中的极微气体，安捷伦1260HPLC四元泵中集合了脱气机，可以进一步对混合后的流动相进行脱气处理。 4.2.2.4流动相冷却
流动相在超声机中长时间超声后，由于水分子振动摩擦，使水温上升，因此流动相瓶中的溶剂也会被加热。加热后的流动相进入液相系统和色谱柱后，会影响基线噪声的增加，使平稳时间延长。 4.2.3开机与关机
4.2.3.1 1260HPLC及化学工作站开机使用与关机
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4.2.3.2Agilent1260HPLC化学工作站开机步骤 ? 打开计算机
? 打开主机各模块电源（不分先后），再双击仪器联机图标，进入Agilent1260LC化学工作
站；
? 旋开泵上的排气阀（逆时针），将工作站中的泵流量设到5ml/ml（右键点击泵，选择方法），
溶剂设到100%，单击“确定”，排除管线中气体约5min。
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? 若是使用多元泵，则依次切换到B,C,D溶剂分别排气；
? 关闭排气阀，检查柱前压力，若大于10Bar，则应更换排气阀滤芯/过滤白头； ? 将工作站中的泵流量设到1ml/min，再设定溶剂比例，如：A=20%,B=80%，冲洗色谱柱
30min左右至基线平稳；
? 单击泵下面的瓶图标，输入溶剂瓶A、B内流动相的实际体积（为保护泵和色谱柱，请按
实际体积输入）并勾选“操作项”中的两个对话框，单击“确定”，如果各溶剂瓶溶剂体积小于停泵体积，泵将自动停止。
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