7、简述在真核基因表达调控中，结合在不同部位的调控蛋白质之间相互作用的可能方式。
8、简单说明有那些方法可以得到所需要的基因。
9、试述分子遗传学及经典遗传学对基因概念的理解，有何异同？
参考答案
6、解答：（1）原核生物DNA的复制是单起点的，而真核生物染色体的复制则为多起点的；
（2）真核生物DNA合成所需的RNA引物及后随链上合成的―冈崎片段‖的长度比原核生物要短：在原核生物中引物的长度约为10－60个核苷酸，―冈崎片段‖的长度为1000－2000个核苷酸；而在真核生物中引物的长度只有10个核苷酸，而―冈崎片段‖的长度约为原核生物的十分之一，只有100－150 核苷酸。 （3）有二种不同的DNA聚合酶分别控制前导链和后随链的合成。
在原核生物中有DNA聚合酶I、II和III等三种聚合酶，并由聚合酶III同时控制二条链的合成。
而在真核生物中共有α、β、γ、δ和ε等五种DNA聚合酶。聚合酶α和δ是DNA合成的主要酶，由聚合酶α控制不连续的后随链的合成，而聚合酶δ则控制前导链的合成，所以其二条链的合成是在二种不同的DNA聚合酶的控制下完成。聚合酶 β可能与DNA修复有关，而γ则是线粒体中发现的唯一一种DNA聚合酶。
（4）染色体端体的复制：原核生物的染色体大多数为环状，而真核生染色体为线状。 7、
真核生物 遗传物质的传递 通过受精 接合，性导， 转化，转导 两类噬菌体混合感染 重组过程 在完整的二倍性 合子中进行 部分二倍体中进行 两类亲本噬菌体 重组结果 形成两种交互 的重组体 只有一种重组体，相反的重组体不出现 形成端余杂合子※细菌 噬菌体 在寄主细胞中大量 （也形成两种交互复制后，复制过程中在交配池中重组 重组体） 7、真核基因表达的调控分为无个层次：转录前水平、转录水平、转录后水平、翻译水平、翻译后水平。在这当中，调控蛋白的作用有：
转录前水平 调控基因的丢失，基因扩增，基因重排，HMG蛋白与DNase优先敏感位点，DNA甲基化水平的调整，组蛋白修饰。
转录水平 转录过程中，调控蛋白通过反式作用因子、顺式作用元件的相互作用来调节转录的起始、转录的速率及转录的终止。
转录后水平 调控了对hnRNA的加工，通过改变mRNA的种类、大小、数量等调节了基因的表达。
翻译水平 通过调节氨基酸数量，多核糖体的形成，信号肽的切除，其实密码子，中指密码子等调节了基因的表达。
翻译后水平 通过调节修饰蛋白，调节蛋白构象及其定位等调节了基因的表达。
其中，转录水平的调控有如下机制：
①顺式作用元件与反式作用因子的相互作用。 基因的所有顺式调控成分，包括上游启动子成分（UPF）和增强子，都要与相应的反式作用因子结合，结合后通过蛋白质之间的相互作用（包括反式作用因子之间的作用，反式作用因子与顺式作用元件的相互作用），才能实现它们对基因转录的调控。
②可诱导的顺式调控成分。 它主要是指那些热震惊、重金属、病毒感染、生长因子、固醇类激素等作出反应的基因调控成分。这些成分中有增强子和部分UPF成分。
不同物种的同一诱导基因的顺式调控成分有很大的保守性。
顺式调控成分对基因转录的激活作用可以通过不同途径。可能是一种正调控因子的激活，也可以是阻遏蛋白的失活，也可以是它们同时发生。 ③一些组织特异性的顺式调控成分也参与调控。 8、概括地讲，有如下方法可以获得目的基因：
⑴PCR法 设计特定的引物，即可以扩增得到特定目的基因。
⑵酶法 经过特定的限制性内切酶作用及凝胶电泳后可以专一的获取特定大小的目的基因。
⑶探针法 用特定的探针（探针根据DNA序列、RNA序列或蛋白质序列进行设计）从总DNA溶液中获取特定目的基因。
⑷cDNA法 用特异功能的mRNA进行反转录，也可以获取特定目的基因。 ⑸用差别杂交或扣除杂交法获取特定目的基因。 ⑹用mRNA差别显示技术分离目的基因。 ⑺用表达文库分离目的基因。 ⑻双酵母杂交体系获取目的基因。
如下方法，见姚连生、郑仲承《核酸与生命》一书（科学出版社，1985-10，85——89）
①密度梯度离心法 适用于有特别密度的目的基因，如1.723g/cm3梯度层分离rDNA。
②两相分配法 目的基因有特殊的碱基组成，而在有机溶剂中相、水相中分配比例不同。
③逆相层析法 用聚氯三氟乙烯粒子作为支持体，将DNA上拄吸附，用梯度盐溶液洗脱：可将珠蛋白基因纯化500倍。
④多聚赖氨酸法 选择性地沉淀GC含量少的DNA，再用四甲胺处理上清，可沉淀GC含量多的DNA。
⑤凝胶电泳法 依据目的基因的大小，在酶解DNA片段电泳后，从相应胶区回收其DNA即为目的基因。
⑥反转录法 纯化目的蛋白质的mRNA，用反转录法得到其互补DNA。 ⑦人工合成基因 知道蛋白质的氨基酸顺序，就可以根据密码子推断其基因组成并人工合成起DNA序列。
9、答：（1）经典遗传学对于基因本质的认识：每个基因位于染色体上的某一点(此称为位点),它是重组、突变、功能的基本单位。（2分）
（2）分子遗传学对基因本质的认识：基因是一段核苷酸序列，它对重组、突变、功能有更深入的认识，它们的基本单位定义如下：重组子，它是性状重组时，可交换的最小单位，又称交换子；一个交换子可只包含一个核苷酸对；突变子，它
是性状突变时，产生突变的最小单位，一个突变子小到可只是一个核苷酸对；作用子，起功能作用的单位，它包括一段DNA，此与一条多肽链的合成相对应，平均有500－1500个核苷酸。因此，分子遗传学基因的定义为：基因是生物遗传和变异的物质基础，是一段可以转录为功能性RNA的DNA，它可以重复、断裂的形式存在，并可转座。（4分）
（3）按照以上，分子遗传学保留了经典遗传学认为基因是功能单位的解释，而抛弃了最小结构单位的说法。（2分） 遗传学试卷十一试卷及答案 计算题：
1、基因型为 AAbb和 aaBB的个体杂交，F1自交得F2，（1）若两基因之间距离为α，问aabb占多少？（2）若Aabb占β，问两基因之间的距离是多少？（8分）
2、在果蝇中，有一品系对三个常染色体隐性基因a、b和c 是纯合的，但不一定在同一条染色体上，另一品系对显性野生型等位基因A、B、C是纯合体，把这两个个体交配，用F1雌蝇与隐性纯合雄蝇亲本回交，观察到下列结果： 表型 数目 abc 211 ABC 209 aBc 212 AbC 208
问：(1) 这两个基因中哪两个是连锁的？ (2) 连锁基因间的重组值是多少? (15分)
3、a、b、d三个基因位于同一染色体上，让其杂合体与隐性纯合体测交，得到下列结果。
F1配子种类 实验值 配子所属类型 +++ 74 ++d 382 +b+ 3 +bd 98 a++ 106
a+d 5 ab+ 364 abd 66
试分析：（1）各配子所属的类型并填于表上。 （2）三个基因的排列顺序。
（3）计算遗传距离绘出基因连锁图。 （4）计算符合系数。
4、用P1进行普遍性转导，供体菌为pur＋nad＋Pdx－，受体菌为pur－nad－Pdx
＋
。转导后选择具有pur十的转导子，然后在100个pur十转导子中检查其它基
因的情况：
基因型 菌落数 nad十pdx十 1 nad十pdx－ 24 nad－pdx十 50 nad－pdx－ 25
（1）pur和pdx的共转导频率是多少？（2分） （2）哪个非选择性标记离pur近？（2分） （3）nad和pdx在pux的两侧还是同侧？（4分）
5、在番茄中，基因O(olbate)，P(peach)和S(compound inflorescence)是在第二染色体上。对这三个基因是杂合的F1用三隐性个体进行测交，得到下列结果：
测交于代类型 数目 配所属类型
+++ 73 ++S 348 +P+ 2 +PS 96 O++ 110 O+S 2
OP+ 306 OPS 63
遗传学试题及答案
