JAASIVMADC
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猪支原体肺炎疫苗多菌株免疫效果比较
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编号： 10-3-10
猪支原体肺炎疫苗多菌株免疫效果比较
试验方案 参考编号
猪支原体肺炎疫苗多菌株免疫效果比较
动物试验
2014- -
动物试验 完成日期 实验室试验 完成日期
2014--
试验的日期
开始日期实验室试验开始日期
2014--
2014--
动物试验 地点
实验室试验
江苏省农科院兽医所
地点
试验负责人
动物试验 负责人
邵国青
冯志新、熊祺琰、华利忠
动物试验参
甘源、王佳、徐飞扬、陈财
与者
实验室试验
冯志新、熊祺琰、华利忠
负责人
实验室实验
冯志新、熊祺琰、马庆红、陈财、王佳
参与者：
试验方案起
冯志新、熊祺琰、华利忠
草人
试验方案 讨
邵国青、刘茂军、冯志新、熊祺琰
论参加者
试验方案定
2014-
稿人及时间
记录的附件
页数
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目录
猪支原体肺炎疫苗多菌株免疫效果比较 ........................................................................... 1 猪支原体肺炎疫苗多菌株免疫效果比较 ........................................................................... 1 目录 ....................................................................................................................................... 2 猪支原体肺炎疫苗多菌株免疫效果比较 ........................................................................... 3 1 目的 ................................................................................................................................... 3 2 材料与方法 ....................................................................................................................... 3
2.1 材料 ......................................................................................................................... 3 2.2 方法 .......................................................................................................................... 4
2.2.1 动物分组说明 ................................................................................................ 4 2.2.2 动物分组与试验操作概表 ............................................................................ 5 2.2.3 免疫 ................................................................................................................ 6 2.2.4 疫苗免疫后临床症状观察记录 ................................................................... 7 2.2.5 疫苗免疫后血清抗体及分型检测 ............................................................... 7 2.2.6 疫苗免疫后细胞免疫指标检测 ................................................................... 7 2.2.7 疫苗免疫后黏膜免疫指标检测 ................................................................... 7 2.2.8 攻毒 ................................................................................................................ 7 附录 1 攻毒保护率计算 ............................................................................................... 9 附录 2 猪支原体肺炎发病猪临床症状评判标准 ..................................................... 10 附录 3 动物分组记录表 ............................................................................................. 11 附录 4 动物免疫记录表 ............................................................................................. 12 附录 5 免疫后异常临床症状观察记录表 .................................................................. 13 附录 6 抗体检测记录表 ........................................................................................... 14 附录 7 淋巴细胞增殖试验结果 ............................................................................... 16 附录 8 血象分析 ....................................................................................................... 17 附录 9 T 淋巴细胞分类计数 .................................................................................... 18 附录 10 黏膜抗体检测记录表 ................................................................................. 19 附录 11 攻毒记录单 .................................................................................................... 20 附录 12 特殊情况记录表 ............................................................................................ 21 附录 13 攻毒后临床症状观察记录表 ....................................................................... 22 附录 14 日增重记录 .................................................................................................... 24 附录 15 攻毒后肺部剖检记录 ................................................................................... 26 附录 16 攻毒后剖检记录 ............................................................................................ 28 附录 17 攻毒后肺部病理损伤记录 ........................................................................... 30 附录 18 攻毒后肺部猪肺炎支原体抗原定量检测 ................................................... 32
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猪支原体肺炎疫苗多菌株免疫效果比较
1 目的
猪支原体肺炎活疫苗 AN306菌株与原 168 菌株的肺内注射免疫效果比较；猪支原体肺炎疫苗（天邦、吉林正业、辉瑞）免疫效果比较；
2 材料与方法
2.1 材料
2.1.1 待试的疫苗产品与试剂 2.1.1.1 疫苗
A. 猪支原体肺炎活疫苗 AN306 株 F321，由江苏省农业科学院兽医所研制，规格为 2
×107CCU/瓶（ 2ml 冻干），批号为 20140325。有效期： ______。PCR鉴定 :Mhp_____，
Mhr_______。
B. 猪支原体肺炎活疫苗（ 168 株），由南京天邦生物科技有限公司提供，规格为 50 头
份 / 瓶，批号为 139078-1。有效期： ______。 PCR鉴定 :Mhp_____， Mhr_______。
C.猪支原体肺炎活疫苗（乳兔继代株） ，由吉林正业生物科技有限公司提供，规格为
4 头份 / 瓶，批号为 2014002。有效期： _20150110__
D.猪支原体肺炎灭活疫苗（ P-5722-3 株， Suvaxyn RespiFend MH），由上海硕腾（辉 瑞）提供，规格为 50 头份 / 瓶，批号为 1302777A。有效期： 15/11/16_ 2.1.1.2 试剂
A．猪支原体肺炎活疫苗（乳兔继代株）稀释液 B．猪支原体肺炎雾化活疫苗稀释液
, 批号： 2014002；有效期： 20170115
C．猪支原体肺炎肌注活疫苗佐剂 G-1-1
2.1.2 动物
选择猪肺炎支原体抗体、抗原均阴性的 饲养地点：江苏省农科院兽医所
5-10 日龄仔猪， 54 头.
饲养员： _徐飞扬，陈才 __
仔猪免疫状况：未打气喘病疫苗。
2.1.3 动物饲料
仔猪料 :
2.1.4 设备
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气雾免疫设备、滴鼻头、 20（10、 5、2）ml 注射器、耳标、耳号钳、冰盒、相机、解剖器械、离心管。
2.1.5 攻毒用强毒
猪肺炎支原体强毒 JS 株组织强毒，来自本所，批号 20130625，-20 ℃保存，有效期至： 2014/06/25 。
2.2 方法
2.2.1 动物分组说明
G1:- 猪支原体肺炎活疫苗 168 株肺内免疫组。
7
每头猪肺内注射免疫 1 头份（ 1ml）即 1×10 CCU 的猪支原体肺炎活疫苗
G2: -猪支原体肺炎活疫苗 AN306 株肺内免疫组。 7
每头猪肺内注射免疫 1ml，即 1×10 CCU 的猪支原体肺炎活疫苗
AN306株。
G3: -猪支原体肺炎活疫苗 168 株气雾免疫组。
每头猪气雾免疫 5× 107CCU 的猪支原体肺炎活疫苗 168 株。免疫一次， 6 周后攻毒，攻毒后 28 天剖杀。
G4:- 猪支原体肺炎活疫苗 168 株肌注免疫组。
每头猪肌肉注射免疫 5×107 CCU 的猪支原体肺炎活疫苗 168 株。首免后两周二免，一免后 6 周攻毒，攻毒后 28 天剖杀。
G5: -猪支原体肺炎灭活疫苗肌注免疫组。
每头猪肌肉注射免疫 1 头份 (2ml) 猪支原体肺炎灭活疫苗。首后 2 周，加强免疫一次，首免后 6 周攻毒，攻毒后 28 天剖杀。
G6:- 猪支原体肺炎乳兔活疫苗胸腔免疫组。
每头猪胸腔注射免疫 1 头份（ 5ml）猪支原体肺炎乳兔活疫苗。免疫一次，一免后 6 周攻毒，攻毒后 28 天剖杀。
G7: -猪支原体肺炎乳兔活疫苗滴鼻免疫组。
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每头猪滴鼻免疫 ？头份猪支原体肺炎乳兔活疫苗。免疫一次， 6 周后攻毒，攻毒后 28 天剖杀。
G8: -健康对照组（不免疫，不攻毒） 。
不接种疫苗。不攻毒，其它组攻毒后
28 天剖杀。
G9: 攻毒对照组（不免疫，只攻毒） 。
不免疫疫苗，只攻毒，攻毒后
28 天剖杀。
2.2.2 动物分组与试验操作概表
DPI- 7
组
组别 号
N 疫苗
剂量
DPI-0
DPI-14 DPI-21 DPI-28 DPI-35 DPI-42 DPI-70
1× 107
G
168 肺 内组 AN306 肺内组 168 气 雾组 168 肌 注组 灭活苗 组
1
6 天邦
CCU/ 头（ 1
肺内免疫 / 采血 /鼻拭
鼻拭子
头份）
G
1× 10
6
ADC
7
采血 /
子 /称重 鼻拭子 气雾免疫 / 采血 /鼻拭
2 CCU/ 头 5× 10
7
采血 /
G
3
6 天邦
CCU/ 头 5× 10
7
子 /称重 肌注免疫 /
G 4
鼻 拭 子
肌注免 疫 /鼻 拭子
采血 /
6 天邦
CCU/ 头 2ml/1 头份
鼻拭子
采血 / 鼻拭子
鼻拭子 /攻毒 /
剖检 / 称重 称重
采血 /鼻拭 子 /称重
鼻拭子
G
5
6 辉瑞
G 乳兔苗
吉林 6
正业
胸腔免疫 /
5ml/1 头份
采血 /鼻拭 子 /称重
鼻拭子
采血 / 采血 /
6 胸腔组
G 乳兔苗
吉林 6
正业 滴鼻免疫 /
鼻拭子 1 头份
采血 /鼻拭 子 /称重 采血 /鼻拭
-
子 /称重 -
7 滴鼻组
健康对 照组 攻毒对 照组
6 6
G 8
-
G 9
- 称重 攻毒 / 称重
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