洁净室沉降菌检测标准操作规程

由天下分享时间：2024/12/21 21:50:18 加入收藏我要投稿点赞

洁净室沉降菌检测标准操作规程 1. 目的

建立洁净室沉降菌检测的标准操作程序，用以规范检测人员的检测操作。 2. 范围

适用于洁净区沉降菌的检测。 3. 职责

3.1 质量部专职检验员负责洁净室沉降菌的检测。 3.2 质量监督员负责监督本规程的执行情况。 4. 内容

4.1 仪器设备及培养基

4.1.1 培养皿：玻璃培养皿或一次用无菌培养皿。 4.1.2 培养基：大豆酪蛋白琼脂培养基（TSA）。 4.1.3 仪器：恒温培养箱、高压蒸汽灭菌锅。 4.2 检测用培养基平皿的制备

玻璃培养皿使用前应先灭菌，制备培养基平皿时注意无菌操作，每批次应设置对照平皿。制备好的培养基平皿在2～8℃的环境中存放。 4.3 采样

4.3.1 工作区采样点的位置离地0.8米～1.5米左右（略高于工作面）。采样点的布置力求均匀，避免采样点在某局部区域过于集中，按照洁净区的面积大小，而制定最少采样点数目，并在关键设备或关键工作活动范围处增加采样点。

图1 采样点位置参考图

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洁净室沉降菌检测标准操作规程 4.3.2 采样次数

对任何小洁净室或局部空气净化区域，采样点不得少于2个，每个采样点一般采样一次。

表1 最少采样点数表2 最少培养皿数

面积（m） 100 <10 ≥10～<20 ≥20～<40 ≥40～<100 ≥100～<200 ≥200～<400 2～3 4 8 16 40 80 2洁净度级别 10 000 2 2 2 4 10 20 100 000 2 2 2 2 3 6 洁净度级别 100 10 000 100 000 最少培养皿数 14 2 2 注：表中的面积，对于单向流洁净室，是指送风面积，对于非单向流洁净室，是指房间面积。 4.4 采样注意事项

4.4.1 测试用具要做无菌处理，以确保测试的可靠性，正确性。 4.4.2 采取一切措施，防止人为对样本的污染。 4.4.3 对培养基、培养条件及其它参数做相应的记录。

4.4.4 计数时一般用透射光对培养皿背面或正面仔细观察，不要漏记培养皿边缘生长的菌落，并须注意细菌菌落与培养基沉淀物的区别。必要时，用显微镜鉴别。

4.4.5 采样前应仔细检验每个培养皿的质量,如发现变质、破损或污染的应剔除。 4.5 测试状态

空态、静态和动态三种状态均可进行测试。空态或静态时，室内测试人员不得多于2人。确保静态测试时洁净室净化空调系统已处于正常运行状态，动态测试时洁净室已处于正常生产状态。测试状态的选择必须符合生产的要求，并在报告中注明测试状态。沉降菌测试前，被测试洁净室（区）的温湿度必须达到规定的要求，静压差、换气次数、空气流速必须控制在规定值内。 4.6 测试时间

对单向流，如100级净化房间及层流工作台，应在净化空调系统正常运行不少于10分钟后开始；对非单向流，如10 000级、100 000级以上的净化室，测试应在净化空调系统正常运行不少于30分钟后开始。动态测试时，须记录生产开始的时间及测试时间。 4.7 测试方法及培养计数

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洁净室沉降菌检测标准操作规程 4.7.1 测试方法

将已制备好的培养皿按采样点的布置要求逐个放置，然后从里到外逐个打开培养皿盖，使培养皿表面暴露0.5小时，再将培养皿盖盖上后倒置。 4.7.2 培养

全部采样结束后，将培养皿倒置于恒温培养箱中30～35℃培养，时间不少于48小时。 4.7.3 计数

用肉眼直接点标记计数，然后用5～10倍放大镜检查，有无遗漏。若培养皿上有二个以上菌落重叠，可分辨时以二个以上菌落数计数。得出各个培养皿的菌落数，统计总菌落数及总皿数，求出1皿的平均菌落数。 4.8 结果评判

平均菌落数要低于标准，若出现微生物超标的情况，则必须对此区域先进行消毒，然后重新采样两次，测试结果均须合格。具体技术要求见表3和表4。

表3 洁净室静态沉降菌技术要求洁净级别 100 10 000 100 000 CFU/皿，0.5小时 ≤1 ≤3 ≤10

表4 洁净室动态沉降菌技术要求洁净级别 100 10 000 100 000 4.9 结果记录

专职检验员负责培养平皿的菌落数统计工作，并及时填写《尘降菌检测记录》。 5. 支持文件

5.1 《洁净区环境监测管理规程》 6. 相关记录

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