参附注射液对心肌缺血再灌注损伤模型大鼠的保护作用

参附注射液对心肌缺血再灌注损伤模型大鼠的保护作用

易 凡 尚玉强 李 炳 程 龙 夏家红

【摘 要】〔摘 要〕目的 探讨参附注射液(SFI)对心肌缺血再灌注损伤(MIRI)模型大鼠的保护作用。方法 60只健康SD大鼠随机均分为假手术组，缺血再灌注模型组以及SFI处理低、中、高剂量组(分别5、10、20 ml/kg)。建立大鼠MIRI模型，记录心电图中T波及S-T段电压变化，测定各组肌酸激酶(CK)、CK同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)和基质金属蛋白酶(MMP)-9的活性和肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6的浓度，并观察心肌组织病理学改变，分析SFI对MIRI的保护作用。结果 与假手术组比较，模型组心电图中的ST段和T波均出现了不同程度的偏移，且心室脏器系数、心肌梗死区重量以及梗死百分比增大(P<0.05)；SFI处理后，心电图中的ST段和T波偏移较小，心室脏器系数、心肌梗死区的重量和百分比明显降低，且高剂量组改善最明显(P<0.05)。与假手术组相比，模型组大鼠心肌酶谱CK-MB、CK、LDH、MMP-9活性及TNF-α、IL-6浓度明显升高(P<0.05)，与模型组相比，给药后SFI处理组以上指标均明显下降，且随着剂量增加下降越明显(P<0.05)。结论 SFI对大鼠MIRI有明显的保护作用，可能与改善CK-MB、CK、LDH、MMP-9活性及TNF-α、IL-6浓度有关，且使用高剂量的SFI对大鼠MIRI保护作用更显著。 【期刊名称】中国老年学杂志 【年(卷),期】2017(037)014 【总页数】3

【关键词】〔关键词〕参附注射液；心肌缺血再灌注损伤

目前认为，炎性因子的作用、自由基大量产生、微血管内皮损伤等原因为心肌

缺血再灌注损伤(MIRI)的主要产生机制〔1〕。在MIRI的病理生理过程中，血浆中肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1、IL-6的浓度会升高，基质金属蛋白酶(MMP)-9活性增加并会导致缺血再灌注损伤。研究表明，药物处理可明显减轻心脏、肝脏等缺血再灌注损伤，而中药对缺血再灌注损伤有良好的治疗效果，应用前景好〔2〕。参附注射液(SFI)由红参、黑附片的提取物组成，主要活性物质是人参皂苷和乌头碱，并有氨基酸、糖类和无机离子，其中人参皂苷已被证实是SFI减轻MIRI症状的活性物质〔3〕。本研究旨在探究SFI对MIRI的保护作用。

1 材料与方法

1.1 实验动物及分组 健康SD大鼠60只，雌雄各半，体重245～350 g，由武汉大学动物实验中心提供〔合格号：SYXK(鄂)2015-0058〕。按随机数字表法分为假手术组，缺血再灌注模型组以及SFI处理低、中、高剂量实验组，每组12只。

1.2 实验药物及试剂 SFI：四川雅安三九药业有限公司，规格10 ml/支，批号：0064277。肌酸激酶(CK)、CK同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)试剂：四川迈克试剂有限公司。TNF-α、IL-6试剂：美国R&D公司。MMP-9试剂：上海康朗生物科技发展有限公司(美国TSZ公司原装进口)。

1.3 动物模型及实验 经腹腔注射20%乌拉坦5 ml/kg麻醉后行气管切开术并行气管插管、人工辅助呼吸。记录正常Ⅱ导联心电图(ECG)。在大鼠胸骨旁左侧第四肋骨行开胸术，假手术组大鼠的左冠状动脉前降支只穿线，而不结扎，结扎模型组、SFI处理组大鼠的左冠状动脉前降支15 min结扎建模成功标志为心电图ST段抬高0.1 mV或T波高耸，心肌呈暗红色。建立MIRI模型后，由假手

术组和模型组组成的对照组给予静脉注射10 ml/kg生理盐水，分别经尾静脉向SFI处理低、中、高剂量组推注SFI 5、10、20 ml/kg。 1.4 观察指标

1.4.1 ST段和T波的偏移和变化 记录给药后0.5、1、2 h时间点的ECG，测定ECG之T波及S-T段电压，并计算变化值。

1.4.2 血清指标检测 灌注2 h后，用1%肝素抗凝试管经右颈动脉采血9 ml，并分3份，经2 500 r/min离心10 min分离血清，根据试剂盒说明对血清CK、CK-MB、LDH的活性进行测定。按试剂盒说明测定血清TNI-α、IL-6的浓度，用即酶联免疫吸附法(ELISA)测定MMP-9的活性。

1.4.3 心肌梗死病理学参数变化 将大鼠处死后，取大鼠心脏，用生理盐水洗净，将大鼠的心房组织及脂肪去掉，再称重、记录大鼠的心室重量、梗死区重量，计算脏器系数。心肌连续切7～8片，每片厚2 mm，用2，3，5-氯化三苯基四氮唑染色后，计算大鼠心肌梗死面积及梗死百分比。

1.5 统计学方法 应用SPSS14.0软件进行重复测量与设计分析及单因素方差分析。

2 结 果

2.1 各组MIRI大鼠ST段和T波的偏移和变化 与假手术组比较，结扎后模型组与SFI处理组ECG中的ST段和T波均有大幅的偏移(P<0.05)。SFI处理组给药后，与模型组比较，ECG中的ST段和T波偏移相对较小，其中SFI处理高剂量组在给药0.5、1、2 h后ECG ST段和T波的偏移幅度明显减小，SFI处理中剂量组在给药1 h后ECG ST段的偏移幅度减小(P<0.05)。见表1。

2.2 各组心肌梗死参数变化 与假手术组相比，模型组及SFI剂量组各项心肌梗