苦丁茶中熊果酸和齐墩果酸的同步分析方法研究＊
蒋珍藕，赖茂祥＊＊，孙 翠，张启伟
【摘 要】摘要：【目的】分析苦丁茶（Ilex kudincha C.J.Tseng）中熊果酸和齐墩果酸，并对不同部位、不同采收时间、不同产地的苦丁茶进行比较。【方法】采用原位预处理－薄层色谱法。【结果】熊果酸、齐墩果酸能够很好地被分离，可以同时被检识。【结论】苦丁茶中熊果酸含量较高，而齐墩果酸含量较低。 【期刊名称】广西科学 【年(卷),期】2014(000)003 【总页数】4
【关键词】苦丁茶 原位预处理－薄层色谱法 熊果酸 齐墩果酸
【研究意义】苦丁茶（Ilex kudincha C.J.Tseng）为冬青科冬青属植物，是我国南部地区广泛应用的药、茶两用植物，主产于广西、广东、海南等地，是保健茶中的佼佼者；药用具有散风热，清头目，除烦渴的功效，用于头痛，齿痛，目赤，耳鸣，耳中流脓，热病烦渴，痢疾等［1］；茶饮具有生津、提神、益智、抗衰老、降血压、降血脂等效果。在我国，就栽培面积大小、产量多少和民间应用的广泛程度而言，除了茶以外，位居其次的便是苦丁茶。市面上苦丁茶的种类繁多，品种复杂，随着其商品的多样化，同名异物不断增多。因此，制定科学可靠的质量控制方法显得意义重大。【前人研究进展】苦丁茶含有熊果酸和齐墩果酸活性成分［2～4］，由于这两个化合物是同分异构体，结构相似，性质相近，用一般的薄层色谱法难以分离。【本研究切入点】目前尚没有采用薄层色谱法同时检识苦丁茶中熊果酸和齐墩果酸的文献报道。【拟解决的关键问题】本文参照文献［5，6］，采用原位预处理法，建立苦丁茶中同时鉴别熊果酸和
齐墩果酸的薄层色谱方法，并对不同部位、不同采收时间、不同产地的苦丁茶进行比较，为制定苦丁茶质量标准奠定实验基础。
1 材料与方法
1.1 材料
B2200S型超声波清洗器；电热恒温干燥箱（上海精密实验设备有限公司）；ZF－2型三用紫外仪（上海市安亭电子仪器厂）；YOKO－ZS薄层色谱成像仪（武汉药科新技术开发有限公司）。
薄层层析硅胶G预制板（批号20121108，青岛海洋化工有限公司）；薄层层析硅胶G（化学纯，批号060320，青岛海洋化工有限公司，国家药典委员会监制）；其余所用试剂均为分析纯。
熊果酸对照品（批号110742－200518，供含量测定用，中国食品药品检定研究院提供）；齐墩果酸对照品（批号110709－200505，供含量测定用，中国药品生物制品检定院提供）。
本实验所用药材样品均由广西中医药研究院中药资源研究所提供，所有药材样品均经广西中医药研究院赖茂祥研究员鉴定为苦丁茶。 1.2 方法
1.2.1 供试品溶液的制备
取样品粉末1g，加乙醇30mL，超声处理30 min，滤过，滤液蒸干，残渣加无水乙醇1mL使溶解，作为供试品溶液。 1.2.2 对照品溶液的制备
取熊果酸、齐墩果酸对照品，分别加无水乙醇制成每1mL含1mg溶液，作为对照品溶液。
1.2.3 薄层原位预处理
吸取供试品溶液5μL、齐墩果酸对照品溶液和熊果酸对照品溶液各3μL，分别点于同一硅胶G薄层板上。将薄层板点样的一端浸入质量分数1%碘－二氯甲烷溶液约12～15mm，使溶液浸过迅速取出，立即覆以一玻璃板，30min后取下玻璃板，挥去薄层板上残留的溶液。 1.2.4 薄层色谱条件
以环己烷－丙酮－乙酸乙酯－甲酸（9∶2∶1∶0.2）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以质量分数10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点清淅，置紫外灯（365 nm）下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
1.2.5 不同产地的苦丁茶嫩芽的薄层色谱分析 （1）供试样品见表1。
（2）分别取上述供试样品制成供试品溶液，按上述方法进行薄层试验。 1.2.6 不同产地的苦丁茶老叶的薄层色谱分析 （1）供试样品见表2。
（2）分别取上述供试样品制成供试品溶液，按上述方法进行薄层试验。 1.2.7 不同采集时间苦丁茶老叶的薄层色谱分析
（1）供试样品来自广西南宁地区大院，时间分别为2011年9～10月的13号，11月18号，12月16号，2012年1～7月的18号，8月26号。 （2）分别取上述供试样品制成供试品溶液，按上述方法进行薄层试验。 1.2.8 苦丁茶嫩叶和老叶比较的薄层色谱分析 （1）供试样品见表3。
苦丁茶中熊果酸和齐墩果酸的同步分析方法研究
