Pharmacy Information 药物资讯, 2024, 9(3), 85-91
Published Online May 2024 in Hans. http://www.hanspub.org/journal/pi https://doi.org/10.12677/pi.2024.93013
Analysis and Discussion on Microbiological Monitoring of Purified Water by Drug Inspection Institutions
Xiaomin Ling, Yanfei Zhong, Haiming Liang
Guangdong Institute for Drug Control, Guangzhou Guangdong
Received: Mar. 20, 2024; accepted: Apr. 3, 2024; published: Apr. 10, 2024
thrdth
Abstract
Objective: Microbial monitoring of the purified water system of the drug inspection agency to un-derstand the microbes of the test water. Methods: Sampling was conducted at the main outlet, the main return outlet and each use point of the purified water, the test was conducted according to the microbial detection method under the purified water section of Pharmacopoeia of the People’s Republic of China 2015 Part II, and microbial monitoring was conducted regularly for 3 months. Results: The total outlet and total return outlet of purified water, microbiological limit are in line with the provisions; at 38 points of use, only 9 points of use are in compliance with the microbio-logical limit in 13 tests. Conclusion: The preparation, storage and distribution of purified water should be able to prevent the breeding and reproduction of microorganisms. In order to ensure the quality of test water and ensure that all points of use of purified water can be used, compre-hensive control of purified water microorganism limits is required.
Keywords
Drug Inspection Institutions, Purified Water, Microbiological Monitoring, Pharmacopoeia of the People’s Republic of China 2015
药品检验机构对纯化水微生物监测的 分析与探讨
凌晓敏，钟燕飞，梁海明
广东省药品检验所，广东 广州
文章引用: 凌晓敏, 钟燕飞, 梁海明. 药品检验机构对纯化水微生物监测的分析与探讨[J]. 药物资讯, 2024, 9(3): 85-91. DOI: 10.12677/pi.2024.93013
凌晓敏 等
收稿日期：2024年3月20日；录用日期：2024年4月3日；发布日期：2024年4月10日
摘 要
目的：对药品检验机构的纯化水系统进行微生物监测，了解试验用水微生物情况。方法：在纯化水总出水口、总回水口和各使用点进行取样，按《中国药典2015年版·二部》纯化水项下微生物检测方法进行检测，连续3个月定期进行微生物监测。结果：纯化水总出水口和总回水口，微生物限度均符合规定；38个使用点，仅有9个使用点在13次检验中微生物限度符合规定。结论：纯化水的制备、储存和分配应能防止微生物的滋生和繁殖，为确保试验用水质量，保障各纯化水使用点均可使用，需全面控制纯化水微生物限度合格。
关键词
药品检验机构，纯化水，微生物监测，中国药典2015年版
Copyright ? 2024 by author(s) and Hans Publishers Inc.
This work is licensed under the Creative Commons Attribution International License (CC BY 4.0). http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/
1. 引言
Open Access 纯化水作为中国药典规定的试验用水，在药品检验机构广泛应用于药品检验分析各个领域，可用于各种化学试剂、诊断试剂的配制，各种仪器、设备、容器的清洗等，纯化水的质量直接关系到实验结果。药品生产质量管理规范(2010年修订)第99条规定：纯化水、注射用水的制备、贮存和分配应当能够防止微生物的滋生[1]，可以看出纯化水要求在符合其他质量标准的同时，也强调了对微生物的控制，因此，对纯化水的微生物进行监测显得很重要。为更好地加强纯化水的微生物监测，保障实验室试验用水的质量，确保试验结果的可靠性和有效性，现依据《中国药典2015年版·二部》纯化水项下微生物限度检测方法对某药品检验机构新建成的纯化水系统进行为期3个月定期的微生物限度监测并对监测情况进行分析探讨。《中国药典2015年版·二部》规定：纯化水为饮用水经蒸馏法、离子交换法、反渗透法或其他适宜的方法制得[2]。该药品检验机构纯化水系统采用反渗透法制备，反渗透法是利用膜处理技术，有效去除无机盐、有机物、细菌、热原、病毒、悬浊物等[3]。
2. 试验仪器与材料
2.1. 主要仪器设备
Milli-Q? CLX 7000分析仪进水系统(Milli)，MIR-254-PC生化培养箱(Panasonic)，1379生物安全柜(Thermo)，HTY-602集菌仪(杭州泰林生物技术设备有限公司)，SCP6 PLUS菌落计数器(英国BIBBY)。
2.2. 培养基
R2A琼脂培养基(批号3104827)，pH 7.0 氯化钠–蛋白胨缓冲液(批号190128)，上述培养基均购自广东环凯微生物科技有限公司。
DOI: 10.12677/pi.2024.93013
86
药物资讯
凌晓敏 等
2.3. 样品来源及取样方法
样品来源：总出水口2个、总回水口2个、实验室区域38个使用点出水口(东边实验室17个、西边实验室21个)。取样频率：总出水口与总回水口每周二次取样监测，其他出水口每周一次取样监测。取样方法：取样前，各取样点打开阀门排水5 min，用已灭菌玻璃瓶直接取水，每个取水点取2瓶水样，每份取样量约100 mL，取样结束立即盖好玻璃瓶盖。取样到检测的过程时间需要加以严格控制，应在取样结束2 h内完成检测。
3. 试验方法与结果
3.1. 试验方法
按照《中国药典2015年版·二部》纯化水项下规定[2]：采用薄膜过滤，取水样1 mL加至pH 7.0无菌氯化钠–蛋白胨缓冲液100 mL中混匀，通过孔径0.45 μm的薄膜过滤器过滤，取出滤膜，菌面朝上，贴于R2A琼脂培养基平板上。同时取pH 7.0的无菌氯化钠–蛋白胨缓冲液代替试验组中的纯化水样品按试验组方法操作，作为阴性对照。将培养皿倒置于30℃~35℃培养箱中培养5 d，菌落计数。阴性对照不得有菌生长。
3.2. 试验结果
《中国药典2015年版·二部》纯化水项下规定：微生物限度标准为1 mL供试品中需氧菌总数不得过100 cfu [2]。1 mL样品中菌落总数超过300 cfu，将不点计，表述为>300 cfu/mL。如表1所示，总出水口和总回水口微生物限度检测结果均符合规定。如表2所示，东边实验室17个取样点，其中有4个取样点每次检测均符合规定，分别为E-6、E-14、E-16、E-17；2个取样点每次检测均不合格，分别为E-3、E-4；其他11个取样点均出现部分检测结果不符合规定。如表3所示，西边实验室21个取样点，其中有5个取样点每次检测均符合规定，分别为W-2、W-3、W-4、W-11、W-21；3个取样点每次检测均不合格，分别为W-5、W-6、W-13；其他13个取样点均出现部分检测结果不符合规定。各点合格率详见表4。结果表明，该药品检验机构新建成的纯化水系统微生物限度合格率较低，可取水的使用点较少，仍需进一步排查出现不符合规定的原因，进行整改。
Table 1. Microbial limit detection data for total water outlet and total water return (unit: cfu/mL) 表1. 总出水口和总回水口微生物限度检测数据(单位：cfu/mL)
菌落数
取样时间
总出水口1
2024-01-14 2024-01-17 2024-01-21 2024-01-24 2024-01-28 2024-02-12 2024-02-18 2024-02-21 2024-02-25 2024-02-28
0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
总出水口2
1 0 0 0 0 0 1 0 0 0
总回水口1
0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
总回水口2
0 0 0 4 0 0 0 0 0 0
DOI: 10.12677/pi.2024.93013
87
药物资讯
凌晓敏 等
Continued
2024-03-04 2024-03-07 2024-03-11 2024-03-14 2024-03-18 2024-03-21 2024-03-25 2024-03-28 2024-04-01 2024-04-08 2024-04-11 2024-04-15 2024-04-18
0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 2 0 4
0 0 0 0 0 0 0 0 1 1 0 2 1
0 0 1 0 0 1 0 0 0 3 0 0 0
注：总出水口1和总回水口1代表东边实验室纯化水罐总出水口和分配系统总回水口，总出水口2和总回水口2代表西边实验室纯化水罐总出水口和分配系统总回水口。
Table 2. Microbial limit detection data of 17 purified water use points in the eastern laboratory (unit: cfu/mL) 表2. 东边实验室17个纯化水使用点微生物限度检测数据(单位：cfu/mL)
菌落数
取样时间
E-1
2024-01-14 2024-01-21 2024-01-28 2024-02-12 2024-02-18 2024-02-25 2024-03-04 2024-03-11 2024-03-18 2024-03-25 2024-04-01 2024-04-08 2024-04-15
E-2
E-3
E-4
E-5
E-6 33 42 33 22 11 10 23 5 10 6 20 17 51
E-7
E-8
E-9 65
E-10 E-11 E-12 E-13 E-14 E-15 E-16 E-17 123 >300 292 276 >300 >300
93 57
89 69 64 35 44 16 15 16 10 40 16 8 57
119 120 254 79 73 24 27 9 15 28 17 25 77
0 1 11 52 2 3 1 8 2 10 9 11 16
55 24 10 24 8 11 3 21 9 3 15 66 46
>300 117
136 >300 120
64 18 67 13 12 48 20 7 13 29 26 42
114 >300 29
>300 >300 151 >300 >300 141
134 >300
>300 142
206 >300 169 83 13 24 16 72
>300 264 >300 >300 >300 >300
125 >300 >300 221 134 58 89
148
93
76 55 44 33 39 17 15 23 68 166
143 >300 >300 >300 >300 >300 >300 >300 174 >300 >300 >300 111 162 223 19 51 134 98
281 >300 >300 274 >300 >300 272
202 >300
112 >300 107
181 162
>300 205 >300 121 >300
90 66 43 60
211 167 76 277 162
227 >300 144 >300 45
>300
185 >300 7 21 32 137
>300 >300
272 >300 >300 153 88
173
215
226 >300 98 195
162 148
>300 >300 >300 106 52
187 >300 >300 >300 272
Table 3. Microbial limit detection data of 21 purified water use points in the west laboratory (unit: cfu/mL) 表3. 西边实验室21个纯化水使用点微生物限度检测数据(单位：cfu/mL)
菌落数
取样时间
W-1 W-2 W-3 W-4 W-5 W-6 W-7 W-8 W-9 W-10 W-11 W-12 W-13 W-14 W-15 W-16 W-17 W-18 W-19 W-20 W-21
2024-01-14 63 15 39 29 144 265 >300 96 142 119 2024-01-21 32
7
7
9 >300 >300 >300 76 219
88
38 81
97 >300 19 27 >300
5
53 >300 >300 175 159
68
28 55
50 >300 >300 >300 >300 65
DOI: 10.12677/pi.2024.93013
88
药物资讯
凌晓敏 等
Continued
2024-01-28 28
8
4
4 178 >300 >300 121 108 135
44
202 >300
5
45 >300 >300 169
80
45
29 74 52 12 26 25 31 32 13 30 31
2024-02-12 25 21 14 17 118 >300 195 23 >300 >300 40 2024-02-18 23 2024-02-25 8 2024-03-04 36
3
19 15 >300 262 >300 161 107 133
46 43 7 7 40
296 >300 21 68 >300
7
25 >300 >300 158 156 247 79 >300 >300 241 120 69 >300 >300 >300 135 52 >300 >300 >300 185 73 >300 >300 >300 280 106 >300 >300 >300 118 42
29
22
21
37
37 36 40 98 43 21
11 22 39 >300 >300 >300 22 106 162 5
5
7 159 >300 >300 97 194 7 107 >300 >300 79
83
49 >300 47 9
>300 107
2024-03-11 192 17 16 2024-03-18 51
7
16
82 112 29 >300 51 1 3
>300 49 >300 21
5 226 >300 >300 66 >300 128
2024-03-25 31 11 13 2024-04-01 106 24 15 2024-04-08 21 43
9
3 106 266 191 >300 198 >300 14 3 128 >300 74 137 >300 64 10 195 >300 160 233 >300 98 2 122 >300 131 263 >300 248
7
10 >300 39 29 >300 >300 >300 >300 22 108 108 147 138 197 74
196 167 247 238
54 58
38 >300 >300 38 34
18 >300 33
2024-04-15 31 39 52
Table 4. Qualified rate of microbial limit detection at each use point of laboratory purified water 表4. 实验室纯化水各使用点微生物限度检测合格率
取样点 总出水口1 总出水口2 总回水口1 总回水口2
E-1 E-2 E-3 E-4 E-5 E-6 E-7 E-8 E-9 E-10 E-11 E-12 E-13 E-14 E-15 E-16 E-17 W-1
检测总次数
23 23 23 23 13 13 13 13 13 13 13 13 13 13 13 13 13 13 13 13 13 13
合格次数
23 23 23 23 3 1 0 0 12 13 9 1 5 3 2 1 11 13 10 13 13 11
不合格次数
0 0 0 0 10 12 13 13 1 0 4 12 8 10 11 12 2 0 3 0 0 2
合格率(%) 100.0 100.0 100.0 100.0 23.1 7.7 0.0 0.0 92.3 100.0 69.2 7.7 38.5 23.1 15.4 7.7 84.6 100.0 76.9 100.0 100.0 84.6
DOI: 10.12677/pi.2024.93013
89
药物资讯
药品检验机构对纯化水微生物监测的分析与探讨
