食品中细菌总数的测定方法
一、目的:
1.学习并掌握细菌的分离和活菌技术的原理和基本方法 2.了解菌落总数测定在对备件样品进行卫生学评价中的意义 二、原理:
菌落总数是指食品经过处理并在一定条件下培养后,所得1g或1mL检验中所含细菌菌落的总数。菌落总数主要作为判别食品污染程度的标志,也可以应用这一方法观察细菌在食品中繁殖的动态过程,以便在对杯件样品进行卫生学评价是提供依据。 三、仪器:
超净工作台、电炉、培养箱、试管、10ml移液管、1ml移液管、洗耳球、试管架、锥形瓶、平皿
四、试剂:样品:酱油 ,无菌水, 营养琼脂 五、实操过程:
1、溶解培养基:将固体培养基放在电炉上煮沸,然后冷却至41~43℃待用
2、取10ml移液管分别吸取9ml水放入3支试管中
3、取1ml移液管吸取1ml酱油加入第一支试管内,另取第二支1ml移液管插入第一支试管内,吸取溶液后放出溶液,重复3次,使酱油混合均匀后,再分别吸取1ml加入到第二支试管和第一个平皿内;取第三支1ml移液管插入第二支试管内吸取溶液,然后放出溶液,重复三次,使溶液混合均匀,然后分别吸取1ml溶液分别加到第三支试管和第二个平皿内;取第四支1ml移液管插入第三支试管内吸取溶液,然后放出溶液,重复三次,使溶液混合均匀,再吸取1ml放入第三个平皿内,贴好标签
4、倒培养基:在平皿内倒入其2/3体制的培养基,用手轻轻摇匀 5、待琼脂培养基凝固后,翻转平板,置36±1℃温箱内培养48±2h,取出计算平板内菌落数目 六、实操结果及分析讨论 1.平板菌落数量和生长描述: 培养时间:24小时 梯度 10-1 10-2 10-3
菌落数量 35 12 4 典型菌落特征 菌落分布比较密集 分布较松散 只有4个点